鸡减蛋综合征病毒（EDSV—76）末端前体蛋白的基因结构分析

从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒弱毒株ＡＡ－２,经常规方法提取其病毒核酸后,组建了完整的限制性内切酶ＰｓｔＩ及ＨｉｎｇⅢ水解片段的基因文库,并对其中ＨｉｎｄⅢ,－ＳａｃⅠ进行了序列测定。同源比较分析证明：其Ｌ链含编码病毒末端前体蛋白,容量为５８０个氨基酸残基的开放读码框架。     

应用差异PCR技术研究MTX耐药细胞的遗传学改变

基因扩增是介导细胞产生耐药性的一种普遍性机制。为探讨MTX耐药的小鼠细胞中与耐药机制形成有关的分子遗传学背景,应用差异PCR技术,检测了MTX耐药细胞中DHFR基因的扩增和过表达,并对c-myc及p53基因状态与dhfr扩增之间的相关性进行了探讨。结果表明：dhfr的扩增和过表达直接介导细胞耐药。未检测到c-myc的扩增和p53拷贝数的变化;也未检测到c-myc mRNA水平的改变,但p53基因的mRNA水平明显升高,显示p53可正常表达。这些结果表明dhfr的扩增与这两个侯选基因的状态无关,提示该耐药细胞中可能存在其他的分子遗传学改变允许基因大量扩增。     

一种简单高效的5'-突出末端平端化方法

目的:报道一种利用Pfu DNA聚合酶延伸法补平限制片段5’-突出末端的平端化方法。方法:Pfu DNA聚合酶是用于PCR扩增的常规高保真DNA聚合酶,可在DNA模板和dNTPs存在条件下,沿5’→3’方向催化寡聚核苷酸聚合。由于终产物为平末端,可利用这一特点进行限制片段5’-突出末端补平。本文采用这一方法消除pAN7-1潮霉素抗性标记末端的XbaⅠ位点,以便载体构建中能够利用这一常见位点。pAN7-1先用XbaⅠ酶切成线性化载体,产生的5’-突出末端再用Pfu DNA聚合酶延伸法补平,通过平端化载体自连后XbaⅠ位点的消除来评价Pfu DNA聚合酶的平端化效果。结果:随机挑取3个重组子提取质粒均不能再用XbaⅠ切开,表明XbaⅠ位点成功消除。结论:Pfu DNA聚合酶具有高效率及高保真特性,因此本法简单高效而且经济适用。     

Ligand Perception,Activation, and Early Signaling of Plant Steroid Receptor Brassinosteroid Insensitive

Leucine-rich repeat receptor-like kinases （LRR-RLKs） belong to a large group of cell surface proteins involved in many aspects of plant development and environmental responses in both monocots and dicots. Brassinosteroid insensitive 1 （BRI1）, a member of the LRR X subfamily, was first identified through several forward genetic screenings for mutants insensitive to brassinosteroids （BRs）, which are a class of plant-specific steroid hormones. Since its identification, BRI1 and its homologs had been proved as receptors perceiving BRs and initiating BR signaling. The co-receptor BRIl-associated kinase 1 and its homologs, and other BRI1 interacting proteins such as its inhibitor BRI1 kinase inhibitor I （BKI1） were identified by genetic andbiochemical approaches. The detailed mechanisms of BR perception by BRI1 and the activation of BRI1 receptor complex have also been elucidated. Moreover, several mechanisms for termination of the activated BRI1 signaling were also discovered. In this review, we will focus on the recent advances on the mechanism of BRI1 phosphorylation and activation, the regulation of its receptor complex, the structure basis of BRI1 ectodomain and BR recognition, its direct substrates, and the termination of the activated BRI1 receptor complex.     

PTEN对SMMC—7721人肝癌细胞迁移增殖及粘着斑激酶磷酸化水平的影响

抑癌基因PTEN编码产物具有双专一性磷酸酶活性 ,并与细胞骨架张力蛋白同源。PTEN可参与粘着斑的形成和解聚而影响细胞迁移。现用PTEN表达质粒转染SMMC 772 1肝癌细胞 ,研究SMMC 772 1细胞运动能力的变化及PTEN与粘着斑激酶 (FAK)酪氨酸磷酸化水平之间的关系。PTEN过表达能够显著抑制细胞在Fn基质上的活动 :细胞在Fn基质上的迁移下降了 35 % ;在 30min和 6 0min两个时间点 ,Fn基质上细胞铺展分别降低了 2 9%和 2 6 % ;而在多聚赖氨酸基质上细胞铺展并没有变化。运用免疫沉淀和Western印迹方法 ,分析FAK及其酪氨酸磷酸化水平 ,发现PTEN过表达不影响FAK表达 ,但显著降低Fn诱导的FAK酪氨酸磷酸化水平 ,两者水平呈负相关。流式细胞仪分析细胞周期结果表明 ,PTEN抑制细胞 ,S期细胞下降了 16 %。上述结果提示 ,PTEN抑制肝癌细胞迁移铺展和增殖 ;PTEN对细胞运动的影响可能通过调节FAK酪氨酸磷酸化水平而实现。     

线粒体、细胞色素c与细胞凋亡

线粒体是细胞的一个独特而重要的细胞器,它为细胞各种生命活动提供能量。许多研究表明,线粒体的作用远比人们了解的复杂和多样。近年来研究发现,线粒体与细胞凋亡密切相关,表现在如下一些方面。１．细胞凋亡早期线粒体跨膜电位（ΔΨｍ）下降自１９９３年以来,Ｋｒｏ...     

冬闲期种植多花黑麦草对稻田土壤性状的影响

“多花黑麦草(Lolium multiflorum L.; Italian Ryegrass)—水稻(Oryza sativa L.; Rice)”草田轮作(IRR)系统是我国南方农区新型的轮作模式之一。利用冬闲田种植多花黑麦草不仅能够生产大量的优质青饲料, 缓解冬季畜禽饲草紧缺的问题, 而且可以改善土壤物理和化学性质, 提高养分循环效率, 并对土壤微生物群落产生积极影响。通过讨论种植多花黑麦草对土壤团聚体结构、容重、pH、腐殖酸、有机质、碳氮比、土壤氮、磷、钾含量和土壤微生物群落等的影响, 系统总结了黑麦草在土壤培肥方面的作用效应, 并进一步探讨了南方农区利用IRR系统发展“草牧业”的困难与挑战, 旨在为IRR系统的进一步推广提供更为全面深入的理论指导。     

芸苔属植物自交不亲和性S-受体激酶的内吞作用及信号传递网络

文章就芸苔属植物自交不亲和性反应中S-受体激酶的内吞作用以及下游信号传递网络的研究进展作一综述。     

研究发现将碳水化合物转化为脂肪关键基因

加州大学伯克利分校的科学家们揭示了机体将碳水化合物转化为脂肪的分子机制,他们在研究中发现BAF60c基因会导致脂肪肝。研究显示,即使饮食中含糖量高,缺乏BAF60c基因的小鼠依然不能将碳水化合物转化为脂肪。     

真核翻译起始因子2α激酶在肾脏疾病中的作用研究进展

肾脏疾病的防治一直是医学研究的重点。真核翻译起始因子2α激酶（eIF2α）是哺乳动物细胞中代谢应激反应的关键因子,可诱导整体蛋白质翻译抑制,并在不同的细胞代谢应激下控制细胞存活。eIF2α激酶在维持机体的正常生理功能方面及肿瘤、免疫和代谢相关疾病等的发生发展过程中发挥重要作用。研究提示eIF2α激酶可能参与多种肾脏疾病的病理过程,因此,本文对eIF2α激酶家族及其在肾脏疾病中的可能作用等方面的研究进展进行归纳总结,以期为肾脏疾病的防治提供新的参考和理论依据。