过量表达的hTR75可独立介导hTNFα的细胞毒性

利用细小ＲＮＡ 病毒属脑炎和心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）的内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）元件构建了人肿瘤坏死因子受体７５ 基因（ｈＴＲ７５） 和新霉素抗性基因（ｎｅｏＲ）的双顺反子表达载体, 通过电脉冲转染ＢＨＫ２１ 细胞, 筛选出分别和同时稳定过量表达两种ｈＴＮＦ受体的细胞株。这些细胞在ｍＲＮＡ 和蛋白质水平均可检测到ｈＴＲ７５ 的表达。利用野生型和具有两种受体选择性结合活性的ｈＴＮＦα突变体对这些细胞株进行测定, 发现过量表达的ｈＴＲ７５ 可以独立地介导ｈＴＮＦα对ＢＨＫ２１ 细胞的细胞毒性, 而ｈＴＲ５５ 的存在并不能显著增强这种作用。上述结果为进一步阐明ＴＲ７５ 的功能以及两种受体间的相互作用提供了一条新的途径。     

乙型肝炎病毒的核心启动子各区段功能的研究

将一系列核心启动子区的缺失突变引入乙肝病毒（ＨＢＶ）线性转录单元,从病毒的抗原,ＲＮＡ以及子代ＤＮＡ等各个水平,分析了各缺失突变对前基因组ＲＮＡ和前核心ＲＮＡ转录的影响,对核心启动子各片段的功能进行了深入的研究。Ｃ片段缺失后检测不到ｅ抗原和前核心ＲＮＡ,却仍有核心抗原和前基因组ＲＮＡ的合成以及病毒子代ＤＮＡ的复制;而Ｂ３片段缺失后ｅ抗原和核心抗原均有显著下降,但仍能检测到两种ｍＲＮＡ的合成和病毒子     

脓毒血症大鼠心肌Ⅱ型磷脂酶A2活性变化及其调控

观察了脓毒血症大鼠心肌ＩＩ型ＰＬＡ２活性,蛋白质含量及其ｍＲＮＡ的变化,结果发现,脓毒血症早期为晚期心肌ＩＩ型ＰＬＡ２活性较对照组分别降低２５．０％（Ｐ〈０．０５）及增高４７．６％（Ｐ〈０．０１）,ＩＩ型ＰＬＡ２蛋白质含量分别降低了２７．０％及增高４８．０％（均Ｐ〈０．０１）,心肌ＩＩ型ＰＬＡ２ｍＲＮＡ合成率与含量呈现类似的双相变化,在脓毒血症早,晚期ｍＲＮＡ合成率分别降低４５．０％和升高７０．０     

羟基脲诱导前后HEL细胞内GATA转录因子与人β—类珠蛋白基因调控元件的结合模式分析

HEL细胞是一株人红白血病细胞株,其中成年型β-珠蛋白基因不能表达。我们以往的试验证明,羟基脲诱导以后,能使HEL细胞内成年型β-珠蛋白基因表达。本文以此为模型,探索了β-珠蛋白基因在HEL细胞内诱导表达的分子机制。结果表明,羟基脲诱导之后,与人β-珠蛋白基因5’远侧端DNaseⅠ超敏感点2核心DNA序列以及近侧端启动子DNA序列相结合的GATA-1蛋白因子量明显增多,而GATA-2蛋白因子量明显减少。结果显示,GATA蛋白家族各成员在HEL细胞分化及珠蛋白基因表达的过程中扮演着不同的角色。推测GATA-1可能有促进β-珠蛋白基因的表达,使HEL细胞趋向终末分化的作用,GATA-2则可能与胚胎型珠蛋白基因表达有关,并有抑制红细胞向终末分化的功能。     

鲑鱼胰岛素样生长因子I cDNA在镜鲤中的表达

通过显微注射技术,将冠以鲤鱼β－肌动蛋白基因（ＣＡ）启动调控顺序的鲑鱼胰岛素样生长因子Ｉ（ｓＩＧＦ－Ｉ）的ｃＤＮＡ,即ＣＡｓＩＧＦｃ注入镜鲤受精卵内,经聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术检测,受本胚胎发育各期均携有外源基因拷贝。     

因子与巢式交配设计群体近交率的比较研究

探讨了因子和巢式交配设计群体近交率的形成机理,结果表明,这两种交配设计群体结构本身并不导致基近交率累积的差异。在育种选择情况下因子交配设计比巢式设计群体的近交率上升慢,而在完全随机留种和限制随机种情形这两种酱地群体近交率的影响没有差异,但在交配设计情况下,限制随机留种比完全随机留有有交地控制群体近交率的提高。这一结果显示,在动物的家畜遗传留种比完全随机留各 效地控制群体近交率的提高。这一结果显示,     

羟基脲诱导前后HEL细胞内GATA转录因子与人β—类珠蛋白基因调控元件 …

HEL cells, a human erythroleukemia cell line, expressing mainly the gamma-globin genes, small amount of epsilon-globin gene, but not beta-globin gene. Our previous studies demonstrated that beta-globin gene could be expressed in HEL cells induced by hydroxyurea. However, the molecular mechenism is still unknown. Here the binding patterns of GATA factors (GATA-1 and GATA-2) to the regulatory elements of human beta-globin gene were examined with the nuclear extracts from hydroxyurea-induced and uninduced HEL cells. Our results showed in EMSA assay that GATA factors could bind to the core sequence of HS2(-10681 to -10971 bp), the 3' flanking sequence of HS2 core(-10323 to -10680 bp) and the promoter of human beta-globin gene(+20 to -112 bp). However, the binding patterns between hydroxyurea-induced and uninduced HEL cells were different. Furthermore, by using Western-blot analysis, our data showed that the amount of GATA-2 was decreased in hydroxyurea-induced HEL cells. In contrast to GATA-2, the amount of GATA-1 was increased in hydroxyurea-induced HEL cells. These results showed that the different members of GATA family might play different roles during the differentiation of erythrocytes. GATA-1 may stimulate the differentiation of HEL cells, while GATA-2 can probably inhibit the differentiation of HEL cells.     

质粒复制与反义RNA的调控机制

质粒作为基因克隆和表达载体在基因工程和分子生物学研究中被广泛地应用。质粒自身的性质,如复制,质粒不亲和性的分子基础,传代中的分配机制和接合转移诸方面的研究也在深入地开展。这些研究为进一步完善质粒载体的改造提供了理论基础。     

植物基因的调控机制探讨

在高等植物中,绝大多数基因的表达是以一定的时间和空间顺序进行调控的,有的基因只在某些特异的组织中表达,有的只在某一特异的发育阶段表达,还有的则只在植物体受到一定的生理刺激后才表达。