高纯度α-亚麻酸抗血栓活性的初步研究

目的:评价从椒目中提取和纯化获得的高纯度α-亚麻酸的抗血栓药理活性。方法:采用小鼠和大鼠在体血栓形成和肺动脉栓塞等模型,分别观察试药对血小板在动-静脉旁路中丝线上的沉积、肺动脉栓塞小鼠的死亡率、体外血小板聚集和出凝血时间等指标。结果:1.50mg/kg,100mg/kg和250mg/kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸(α-亚麻酸/亚油酸=1/1)给小鼠灌胃治疗10天,显著延长出、凝血时间(P<0.01);明显降低胶原蛋白-肾上腺素诱发性肺动脉栓塞小鼠的死亡率(P<0.01)。2、35mg/kg,70mg/kg和175mg/kg高纯度α-亚麻酸及混合不饱和脂肪酸给大鼠灌胃治疗10天,明显抑制血小板在动-静脉旁路中丝线上的沉积(P<0.01)和大鼠体外血小板聚集(P<0.01)。结论:从椒目中提纯的高纯度α-亚麻酸,作为一种木本油脂新的药用资源和其混合不饱和脂肪酸均具有明显抗血小板聚集和溶栓药理作用,并具有一定量效关系;同时还发现,当α-亚麻酸/亚油酸=1/1时,其抗血栓药理活性优于同剂量高纯度的α-亚麻酸。     

匍枝根霉（Rhizopus stolonifer）As 3.38△6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆与酵母表达

通过气相色谱法(GC)快速分析8种真菌的脂肪酸成分,发现匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)具有较高的γ-亚麻酸含量,利用RT-PCR和RACE方法获得了全长为1475bp的匍枝根霉△6-脂肪酸脱氢酶基因的cDNA序列,其中开放阅读框为1380bp,编码459个氨基酸。生物信息学分析所克隆的基因具有△6-脂肪酸脱氢酶的典型结构:N端具有细胞色素b5结构、具有3个保守的组氨酸区序列和跨膜结构;把该基因的开放阅读框序列连接到表达载体pYES2.0上,构建重组表达载体pYRnD6D,并将其转入缺陷型酿酒酵母INVScl中进行表达。GC分析表明,该序列在酵母中获得了表达,表达产物表现出△6-脂肪酸脱氢酶的酶学活性,能将底物亚油酸转化为γ-亚麻酸。新生成的γ-亚麻酸占酵母细胞总脂肪酸的12.25%。     

miR-216a-5p调控胰腺癌细胞凋亡的分子机制研究

[目的]研究miRNA调控胰腺癌细胞SW1990凋亡的潜在分子机制.[方法]通过高通量测序检测人胰腺星状细胞与人胰腺癌组织源细胞中的差异miRNA.在胰腺癌细胞SW1990中过表达差异miRNA后,检测其凋亡水平.通过miRDB在线分析miRNA的靶标后,在胰腺癌细胞SW1990中过表达潜在靶标,检测其凋亡水平.[结果...     

绿豆子叶脱分化过程中RNA聚合酶的制备、特性及其活性的研究

绿豆(Phaseolus vadiatus L.)子叶切段在脱分化形成愈伤组织过程中,制备的染色质具有较高的RNA聚合酶活力,3天愈伤组织的酶活力高于5天和7天的;3天、5天和7天加激素脱柱依次分分化形成的愈伤组织,其酶活力均比不脱分化的高一倍以上, 用DEAE —纤维素酶部,依据层析洗脱性质和层析图谱及对d—鹅膏菌素的敏感程度,证明三个峰是RNA聚合I,II和III。     

糖尿病病理性神经痛大鼠坐骨神经中miR-133a的上调对疼痛阈值的影响及机制

摘要 目的：探究糖尿病病理性神经痛大鼠坐骨神经中miR-133a的上调对疼痛阈值的影响及机制。方法：使用NGS测序和定量PCR分析糖尿病病理性神经痛大鼠坐骨神经中的相关 miRNA表达,预测潜在下游目标。使用miR-133a-3p转染的 RSC96细胞进行体外实验。使用微蛋白质印迹和蛋白质印迹以及免疫荧光分析验证miR-133a-3p的作用。使用miR-133a-3p拮抗剂分析miR-133a-3p与DNP之间的关联。结果：miR-133a-3p模拟物增加了RSC96细胞中VEGFR-2、p38αMAPK、TRAF-6和PIAS3的表达,并降低了NFκB p50和MKP3的表达（P＜0.05）。在正常大鼠中,AAV-miR-133a-3p通过神经内注射到坐骨神经中可诱导机械性异常性疼痛和p-p38 MAPK激活（P＜0.05）。在DM大鼠中,miR-133a-3p 拮抗剂给药可减轻DNP并下调p-p38磷酸化（P＜0.05）。结论：坐骨神经中miR-133a-3p的过度表达会引起这种疼痛,miR-133a-3p可能是患有神经性疼痛的患者的有用治疗靶点。     

miR-19a-3p在前列腺癌细胞侵袭和迁移中的作用

miR-19a-3p通过多种机制调节癌细胞的增殖和转移,然而,miR-19a-3p在前列腺癌转移中的生物学作用和机制尚不清楚。本研究旨在考察mir-19a-3p在前列腺癌中的表达情况,及其对细胞侵袭和迁移的影响。本研究发现,miR-19a-3p在骨转移性前列腺癌组织和前列腺癌细胞中明显下调。上调miR-19a-3p可显著抑制前列腺癌细胞的侵袭和迁移。然而,下调miR-19a-3p则会逆转上述变化。此外,本研究还发现miR-19a-3p通过靶向TGF-β信号传导的下游效应物SMAD2来抑制前列腺癌细胞中TGF-β信号传导的活性,从而抑制前列腺癌细胞的侵袭和迁移。因此,本研究表明mir-19a-3p与前列腺癌的发生发展密切相关,mir-19a-3p有望成为前列腺癌的新治疗靶点及生物标志物。     

卷枝毛霉孢子原生质体的制备与再生

为了构建高产γ-亚麻酸的卷枝毛霉稳定遗传转化体系,利用酶解法对卷枝毛霉(Mucor circinelloides sp.)EIM-10的孢子进行原生质体制备。研究酶液组成、渗透压稳定剂、酶解温度、酶解时间等对卷枝毛霉孢子原生质体形成和再生的影响,建立了制备卷枝毛霉孢子原生质体的最适条件:1%纤维素酶和2%溶壁酶为酶解体系,0.5mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,酶解温度32℃,酶解时间2.5 h,再生培养基为0.5 mol/L NaCl高渗培养基。用双层平板培养法进行原生质体再生,在此条件下原生质体的形成量为1.2×106个/mL,再生率为70.5%。     

喷雾干燥制备高纯α-亚麻酸微胶囊研究

本文采用喷雾干燥法制备高纯α-亚麻酸为芯材、亚麻籽胶为壁材的微胶囊,并以微胶囊化效率和含油率为指标,考察了制备工艺.结果表明,最佳微胶囊原料配方为:芯材与壁材的比例为(m/m)3∶2,料液浓度为5％,进料温度为20℃;最佳喷雾干燥工艺条件:进风温度为180℃,出风温度为80℃,雾化器转速21000 rpm,进料速度为42.01 mL/min.在此工艺条件下亚麻酸的微胶囊化效率为96.18％,含油率为60.09％.     

琉璃苣油研究进展

琉璃苣在欧美国家传统用作蔬菜、调味品、观赏花卉;药用用来治疗湿疹、月经不调等症,并用作治疗抑郁症的药物。现代研究表明其种子中γ-亚麻酸含量很高,有多种药理作用和保健功效。琉璃苣在我国引种栽培已获得成功。主要论述了琉璃苣油的化学成分、保健功能、加工方法等研究近况,为开发利用这一宝贵资源提供参考。