小鼠睾丸注射不同转染试剂和注射方法对外源基因表达的影响

为探讨不同转染试剂(LipofectamineTM LTXPLUSTM、Lipofectamine2000和纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D))和睾丸注射方法 (睾丸网注射、曲精细管注射和间质注射)对转基因小鼠生产效率的影响,将pEGFP-C1质粒分别与不同转染试剂混合后,按照不同的注射方法注入小鼠睾丸内,30 d后检测小鼠精子密度、活力、精子阳性率以及配种后仔鼠转基因阳性率。结果 3种转染试剂对小鼠繁殖性能影响由小到大依次为LipofectamineTM LTXPLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D。转染后LipofectamineTM LTXPLUSTM、Lipofectamine 2000和PAMAM-D组精子的GFP阳性率分别为35.65%±0.69%、12.86%±0.35%和10.04%±0.20%。配种后仔鼠的PCR阳性率分别为29.17%、13.70%和5.88%。3种不同注射方法对小鼠睾丸都造成损伤,由小到大依次为睾丸网注射、曲精细管注射和睾丸间质注射,三者的阳性精子比例分别为35.13%±1.727%、15.13%±1.457%和0%,配种后仔鼠的PCR阳性率分别为33.3%、12.5%和0%。结果表明,LipofectamineTM LTXPLUSTM和睾丸网注射对小鼠睾丸的损伤最小,并能获得较高的转染效率。     

不同剂量丹参注射液联合泼尼松龙治疗口腔粘膜下纤维性变的临床研究

目的：探讨采用不同剂量的丹参注射液联合波尼松龙治疗口腔粘膜下纤维性病的治疗效果,为今后的治疗提供更多的依据。方法：选择从2010年1月至2013年1月期间在我院口腔科治疗的100例口腔粘膜下纤维性病患者,根据门诊号,随机将患者分为低剂量组、次低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照组,每组各20例,低剂量组、次低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别使用不同剂量丹参注射液联合波尼松龙治疗,对照组单纯使用波尼松龙治疗,观察治疗一个疗程后患者口腔粘膜情况及张口度。结果：中剂量组和高剂量组情况改善要明显好于低剂量、次低剂量组、对照组,差异具有显著性（P〈0．05）。结论：丹参注射液联合泼尼松龙治疗口腔粘膜下纤维性病疗效令人满意,其中低剂量丹参注射液便有效果,一定范围内剂量越高,疗效越好,值得在临床推f,     

Flow‐injection chemiluminescence determination of haemoglobin in the blood

In this study, a sensitive and simple flow‐injection chemiluminescence (CL) method was developed for the quantitative analysis of haemoglobin. The method is based on the ability of haemoglobin to enhance the CL signal generated by a H₂O₂–K₄Fe(CN)₆–fluorescein alkaline system enhanced by CdTe quantum dots. Under the optimized conditions, haemoglobin can be detected in concentration range 7.35 × 10^–9–2.5 × 10^–6 mol/L, with a detection limit (3σ) of 1.8 × 10^–9 mol/L and a relative standard deviation (RSD; for 5 × 10^–7 mol/L haemoglobin) of 2.06% (n = 11). The present CL method was successfully applied for the determination of haemoglobin in three kinds of blood samples taken from an infant, an adult man, an adult woman and two reference samples. Compared with previous reports, the CL method described in this work is simple and rapid, with high sensitivity. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

国产色谱柱在复方氨基酸输液含量测定中的应用研究

运用两种国产色谱柱检测复方氨基酸注射液中各氨基酸的含量,分别建立了分离检测方法,优化了梯度洗脱的条件。在waters和agilent的高效液相仪上,两个厂家的色谱柱均显示出较好的分离效果。结果表明国产色谱柱能经济有效的达到质量控制的目的,可以推广使用。     

精子介导的转基因技术

精子介导的转基因技术是近十几年发展起来的一种新技术.从各个种的实验证明,精子有瞬间吸收外源DNA的能力.这一过程由一系列因子起重要调节作用.一种特异的DNA结合蛋白介导了外源DNA与精子的结合,同时精浆中存在一种因子起抑制两者结合的拮抗作用.CD4分子与外源基因的内化有关.内化的DNA可能与精子核支架结构(nuclear scaffold)结合,并整合或重排.但仍需要大量实验数据进一步证明是否产生真正可遗传的转基因后代,及如何提高转基因效率,以使这一方法得到普遍的推广及应用.     

尿酸酶－鲁米诺化学发光传感器

研制了依赖于鲁米诺化学发光反应和固定化尿酸酶柱的测定血清尿酸的生物传感器。其测定血清样品响应时间47s。测定每份样品需时1．5min,样品体积17μl。工作曲线的线性范围1~20mg／dl。批内不精密度3．22％～4.36％,批间6.18%～7．8%。测定值回收率为93％～109％。与医院常规酶试剂盘方法比较相关系数r=0.9909。固定化尿酸酶柱室温使用,4℃冰箱保存,连续使用5个半月测定样品2000次以上,仍保持原酶柱活力的94%。     

离子注入麦角甾醇酵母选育及发酵工艺

通过离子注入诱变筛选到产麦角甾醇酵母高产菌,得率较出发菌提高55％～60％。对高产菌进行发酵条件优化,发现其对发酵通氧量有更高的要求,培养基中添加10％的糖或0．1％的Ca（NO3）2对麦角甾醇发酵有明显促进作用。     

Cryopreserved Morulae can be used to Efficiently Generate Germline-transmitting Chimeras by Blastocyst Injection

The production of chimeric mice is a complex process, requiring the careful coordination of tissue culture cell growth, production of a large number (30–75) of competent blastocysts and the availability of appropriately timed pseudo pregnant female mice. Failure at any of these steps can impinge upon the rapid production of chimeras. One potential improvement for the efficient generation of chimeric mice would be the utilization of cryopreserved embryos suitable for injection. C57Bl/6 morulae were frozen using a standard 2-step protocol with ethylene glycol as the cryopreservation agent. We determined that cryopreserved morulae could thaw, culture to blastocyst stage in KSOM media and survive injection at rates equivalent to control embryos. Cryopreserved morulae were also equivalent to controls at all later stages in the process of production of chimeric mice, including birth rate, percentage chimerism of resulting animals and ability to produce germline progeny. Hence, cryopreservation of morulae for blastocyst injection is a suitable option to enhance the efficiency of chimeric mouse generation.     

苦参碱注射液对急性病毒性心肌炎的治疗作用

目的：观察苦参碱注射液治疗急性病毒性心肌炎（AVM）的临床疗效。方法：将AVM患者120例随机分为治疗组63例及对照组57例,对照组采用常规疗法,治疗组在对照组基础上给予苦参碱注射液治疗,连用2周。观察临床疗效。结果：治疗组总有效率90.5%,对照组总有效率73.7%,两组比较有显著性差异。治疗组治疗后血清肌酸磷酸激酶（CPK）、天冬氨酸转氨酶（AST）及血清乳酸脱氢酶（LDH）较对照组治疗后明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：苦参碱对急性心肌炎有良好疗效。     

简易注气法测定刺槐木质部导管组织长度

导管组织在木本植物水力学特性及水分关系中的作用逐渐受到关注,但其长度的传统测试装置和方法相对繁琐。本研究在注气法原理基础上进行改进,改进后装置简易、操作便捷。结果表明,本方法可以成功测定刺槐(Robinia pseudoacacia L.)导管的长度及相关参数:气体传导耗散系数为0.111±0.012;最大导管长度为56.9±1.5 cm;平均导管长度为19.6±2.5 cm;最大分布导管长度为9.8±1.3 cm。枝条注气方向对测试结果没有明显影响。测试过程中注气端压强变化不明显,对导管长度及相关参数的测定和计算影响不显著。本方法与传统注气法相比具有更高的精确度。