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181.
为探讨胰岛素对神经细胞中神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达及活性的影响,应用流式细胞术、原位杂交、电子自旋共振等技术方法研究胰岛素对PC12细胞中神经型一氧化氮合酶的影响.胰岛素作用PC12细胞9 h 后,神经型一氧化氮合酶的免疫荧光强度显著升高,且呈浓度依赖关系,其最大效应为对照的(155±13)%(P<0.01, n=3, t-test).加入胰岛素(16 mU/L, 6 h)也能够显著上调nNOS mRNA的表达,为对照的(182±13)%(P<0.01, n=3, t-test).另外加入胰岛素(16 mU/L)作用9 h后,神经型一氧化氮合酶的活性也显著升高,为对照的(167±15)%(P<0.01, n=4, t-test).由上述结果可知,胰岛素对PC12细胞的神经型一氧化氮合酶的表达及活性有上调作用. 相似文献
182.
183.
肠毒素大肠杆菌定居因子抗原基因CFA—1在痢疾杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
通过体外重组的方法,构建了包含asd基因的重组表达质粒pZHY21,与福氏志贺氏菌Fwl101构成了宿主-载体平衡致死系统,Westem印迹结果表明,在没有抗生素条件选择的情况下,稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CFA-I。电镜结果显示,在重组菌株的菌体表面,表达产物能够装配成菌毛。重组菌通过口服和鼻饲免疫小鼠后,可以诱生CFA-I的抗体;同时可以检测到分泌型IgA产生,表明重组菌可以诱导相应的粘膜免疫反应。 相似文献
184.
基因工程菌大肠杆菌JM109富集废水中镍离子的研究 总被引:4,自引:2,他引:4
利用通过基因工程技术所构建的在细胞内同时表达出高特异性镍转运蛋白和金属硫蛋白的基因工程菌富集水体中的镍离子。菌体细胞对Ni2+的富集速率很快,富集过程满足Langmuir等温线模型。与原始宿主菌相比,经基因改造的基因工程菌不仅最大镍富集容量增加了5倍多,而且对pH值、离子强度的变化及其它共存重金属离子的影响都呈现出更强的适应性。相比而言,Na+、Ca2+、Cd2+、Pb2+的影响较小,但Mg2+、Hg2+和Cu2+所引起的负面效应较大。进一步的实验表明基因工程菌对Ni2+的富集行为不需要外加营养物质。 相似文献
185.
对重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的工程菌表达产物进行纯化,经过超声破碎,包涵体抽提,凝胶层析,复性,离子交换一系列纯化步骤,终产物纯度达98%,比活性达10000000u/mg。 相似文献
186.
SZ-51是一种抗人活化血小板单克隆抗体,并显示了很好的导向血栓显像与导向溶栓性能。为了减少该单抗的免疫原性以及能获得高效表达的SZ-51“人源化”单抗,我们构建了真核表达载体a-Lys17-51VK/Hu.a-Lys30-51VH/Hu。应用Lipofectin方法分别将重、轻链表达载体导入骨髓瘤细胞SP2/0中,并在相应的选择性培养基中进行耐药克隆筛选,经过体外长期传代培养和二次单克隆化,获得了一株高效表达重组SZ-51嵌合抗体的细胞株。培养上清中抗体蛋白的表达量为5mg/L,经Westernblot证实重组嵌合抗体具有与亲本鼠源单抗相同的GMP-140结合特性,而且能与鼠源SZ-51单抗竞争结合活化血小板。本研究结果表明,基因工程“人源化”SZ-51单抗可以作为导向载体进行导向显像与导向溶栓,并为今后进一步应用于临床展示了良好的前景。 相似文献
187.
运用Western印迹和HPLC分别测定不同时间电场刺激和刺激后不同培养时间条件下,PC12细胞内酪氨酸羟化酶(TH)和细胞培养液中多巴胺(DA)含量的变化。结果显示,受到短时间(5、10min)脉冲电场刺激的PC12细胞,经较短时间(2天)的培养后,细胞内TH的含量和培养液中DA的含量均比对照组有所提高,但随着培养时间的延长(3~5天),TH和DA的含量均明显下降。然而,长时间(15、20、30min)脉冲电场刺激组则先表现为TH和DA的合成受到抑制,但随着培养时间的延长,其合成则被逐渐激活。采用蛋白激酶A(PKA)特异性抑制剂H-89和有丝分裂原活化蛋白激酶的激酶(MEK1/2)特异性抑制剂U0126,研究脉冲电场刺激所激活的与TH和DA合成相关的信号通路。结果表明,在没有神经生长因子(NGF)存在的情况下,PC12细胞主要通过PKA通路来激活TH的合成,低频脉冲电场刺激也主要激活PKA通路,因为抑制这条信号通路能显著抑制电场刺激所诱导的TH合成。 相似文献
188.
D—葡萄糖苷酶抑制剂的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
用高灵敏度的荧光法研究了13种糖类化合物对α或β-D-葡萄糖苷酶的抑制作用,实验结果表明:5-氨基-5-脱氧-D-吡喃葡萄糖-1-磺酸铵盐(1)、5-氨基-5-脱氧-D-吡喃葡萄糖-1-磺酸(2)、5-氨基-5-脱氧-D-葡萄糖-1-亚硫酸加成物(3)等三种氮杂糖对α或β-D-葡萄糖苷酸均呈现竞争性抑制作用,化合物(1)的K=372μmol/L;Ki^β=6.38μmol/L,化合物(2)的Ki^ 相似文献
189.
我国首次发现的HIV—1和HIV—2双重感染样品中病毒部分基因的序列特 … 总被引:1,自引:0,他引:1
上海市卫生检疫局送检了一例HIV-1和HIV-2抗体检测均呈阳性的双重感染样品,对其感染的HIV前病毒的gag和env基因区进行了序列分析,首次阐明我国发现的HIV双重感染样品的HIV部分基因特征。从HIV感染者淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中提取前病毒DNA,分别使用HIV-1和HIV-2特异性引特用套式PCR扩增HIV-1和HIV-2 相似文献
190.