Prokaryotic expression and purification of HIV-1 Vif and hAPOBEC3G,preparation of polyclonal antibodies

To prepare HIV-1 Vif and hAPOBEC3G and to produce their antibodies, the full length gene fragment of HIV-1 Vif was amplified by PCR from a plasmid of HIV-1 NL4.3 cDNA, and the APOBEC3G gene was obtained by RT-PCR from the total RNA of H9 cells. The resulting DNA construct was cloned into a prokaryotic expression vector (pET-32a). Recombinant pET-vif and pET-APOBEC3G were expressed respectively in Eserichia coli BL21 (DE3) as an insoluble protein. The vector also contained a six-histidine tag at the C-terminus for convenient purification and detection. To express and purify the HIV-1 Vif and hAPOBEC3G in E. coli cells, the accuracy of inserted gene and specificity of proteins were detected by the two enzyme digestion method, SDS-PAGE, and Western blotting. Rabbits were then immunized by Vif or APOBEC3G protein and serum samples were tested by indirect ELISA to determine the level of antibodies. Immunoenzyme and immunofluorescence assays were performed to identify the specificity of polyclonal antibodies. The titer of the anti-Vif antibodies was 1:204800, and that of the anti-APOBEC3G antibodies was 1:102400. Thus the antibodies could detect the antigen expression in the cells, demonstrating that fusion proteins with high purity and their corresponding polyclonal antibodies with high titer and specificity were achieved.     

基于代谢计量分析的L-苏氨酸发酵过程优化

目的:以L-苏氨酸生产菌株TRFC为供试菌株,基于代谢计量分析对发酵过程中底物葡萄糖、蔗糖的影响做理论分析并对发酵过程进行优化.方法:利用代谢计量学方法对L-苏氨酸生产菌株代谢途径进行分析,以碳源优化及5、10 L发酵实验进行过程优化.结果与结论:发酵过程中,生物量及苏氨酸的产率取决于由葡萄糖转化的生物量占总量的摩尔比率,及转化的苏氨酸占总量的摩尔比率,最大理论值分别为24.1%、17.89%;种子及发酵培养基中葡萄糖与蔗糖的添加比例分别为2:8、8:2时得到最优值,L-苏氨酸最终产量为70 g/L.     

水分胁迫及复水过程中小麦幼苗叶片内Ca^2＋的定位

展现了冬小麦幼苗在干旱胁迫及干旱后复水过程中叶肉细胞内Ｃａ＾２＋的动态分布：在正常水分条件下生长的小麦幼苗,其细胞中的Ｃａ＾２＋主要位于液泡内,同时,细胞间隙中有大量的Ｃａ＾２＋分布。在水分胁迫下,随着胁迫时间的加长,液泡和细胞间隙的Ｃａ＾２＋逐渐进入细胞质,导致细胞质中自由Ｃａ＾２＋浓度过高,并对细胞造成伤害。复水后,细胞质中高浓度Ｃａ＾２＋迅速排入液泡和细胞间隙,细胞质中Ｃａ＾２＋浓度又基本恢     

学习植物生理学应贯彻的3个科学观点

植物生理学是研究植物生命活动规律的科学,植物的生命活动包括水分代谢、矿质营养、光合作用、呼吸作用,以及在此基础上的种子萌发、生长、运动、开花、结果等生长发育过程。植物的生命活动十分复杂,各代谢间相互联系、     

Meiosis:Recent Progress and New Opportunities

<正>Sexual reproduction in diploid organisms requires the production of haploid gametes via the process of meiosis,in which a single round of DNA replication is followed by two consecutive cell divisions(or two nuclear divisions and one cytokinesis).In the majority of known cases the proper segregation of the parental genome into gametes is accompanied and facilitated by meiotic crossover formation,which     

香果树组织培养过程中遗传变异的RAPD分析

用RAPD分子标记方法,从DNA水平上分析野生型香果树以及通过器官发生途径和体细胞胚胎发生途径得到的香果树再生植株以及体细胞胚胎发生过程中不同继代次数的培养物之间的遗传变异。筛选了100个随机引物,其中有75条随机引物能够扩增出条带,从中选取11个引物进行PCR扩增的结果显示：香果树体细胞胚胎无性系中有RAPD多态性位点,在胚性愈伤组织中也检测到少数RAPD变异位点。表明RAPD分子标记方法可以鉴定香果树组织培养过程中的遗传变异。     

应用激光扫描共聚焦显微镜研究卵母细胞和早期胚胎的细胞骨架

介绍了应用激光扫描共聚焦显微镜, 结合免疫荧光技术研究卵母细胞和早期胚胎细胞骨架的方法.观察了β-微管蛋白、γ-微管蛋白、微丝以及染色体在小鼠卵母细胞和早期胚胎中的分布和形态, 讨论了实验过程中的注意事项以及实验结果的分析和处理方法.     

微集雨模式与降雨变律对燕麦大田水生态过程的影响

以春燕麦坝莜3号品种为试材,分别于2009年和2010年在甘肃省定西市农业气象站进行大田试验。两个生育期的降雨总量基本一致,其中2009年生长季的降雨变律特征与多年观察值相似,而2010年则表现为"前半期降雨多、后半期降雨少"的变律特征。微集雨技术共含8个不同处理,包括①平地不种植(裸地)、②平地种植和③6个垄沟和覆膜处理组(3种垄沟宽度比(2 ∶ 1、1 ∶ 1和2 ∶ 3)× 2种覆膜方式(垄上覆膜和不覆膜)),测定了各处理组土壤剖面贮水量、耗水量、水分利用效率和产量相关指标。结果表明,垄上覆膜处理组的叶面积指数、水分利用效率和产量显著高于其它处理组,同时提高了雨水转化为土壤水和作物水的转化效率,并促进了生育后期土壤贮水量的迅速回升。就不同垄沟比来说,各参数值在垄沟比为1 ∶ 1的处理组中最高。此外,就两种降雨变律年型而言,"降雨量前倾"的2010年燕麦的水分利用效率、产量和叶面积指数显著高于2009年(P<0.05),且显著提高了0-130 cm剖面土壤贮水量。     

武夷山木荷种群结构和动态的研究

 本文采用“空间序列代替时间变化”的方法,对武夷山区常绿阔叶林演替过程中木荷种群动态规律进行了研究,结果表明,在木荷种群侵入黄山松幼林向木荷林以及成熟木荷、甜槠、青冈林的发展过程中,种群结构由增长型→稳定型→成熟型→衰退型,空间分布格局由随机型趋于集群分布,种群密度呈现负增长;在成熟木荷、甜槠、青冈林中,由于种间和种内竞争的影响以及林窗效应,木荷种群结构和密度有一个波动性的变化过程,在这一变化过程中,木荷种群仍趋于集群分布。此外,对成熟木荷、甜槠、青冈林中木荷种群不同大小级的分布格局动态进行了研究,表明其幼苗、幼树和中树等级的个体均呈集群分布,而大树等级的个体呈随机分布。根据上述研究结果,对木荷种群动态机制作了探讨。     

《微生物学报》EndNote Style

2013年1月编制End Note文献管理软件能够帮助科研人员更好地进行学术研究、学习以及论文的撰写,这已经被越来越多的人熟悉、接受。为了方便作者写作与投稿,我们编制了"《微生物学报》End Note Style"文件。利用End Note轻松调取收集的文献,自动按照《微生物学报》的格式生成论文的参考文献。