稻瘟病菌无毒基因Avr-Pi1、Avr-Pi2和 Avr-Pi4a的遗传分析及其分子标记

用CO39近等基因系品种C101LAC（Pi-l),C101A51(Pi-2),C104PKT(Pi-3),C101PKT(Pi-4α）,C105TTP-4L-23(Pi-4b)对稻瘟病菌菌株81278ZB15和GUY11及其有性后代进行毒性分析,结果表明,81278ZB15含Avr-Pil,Aur-Pi2,Aur-Pi4α,Aur-Pi4b无毒基因,有性后代在Pi-1,Pi-2,Pi-4α上的无毒,有毒分离比例符合1：1,有8个后代个体发生了这3个无毒基因座的重组,推断81278ZB15对Pi-l,Pi-2,Pi-4α的的无毒性是由3个不同的单一基因座控制的,且3个基因座紧密连锁,进一步采用rep-PCR法比较了亲本及其在性后代的DNA指纹,获得了与3个无毒基因座紧密连锁的DNA标记（RPF1.2),RPF1.2与Aur-Pil,Aur-Pi2,Aur-Pi4α的遗传距离分别为5.9cM,2.2cM和2.2cM,2个亲本对Pi-3,CO39均有毒性,对Pi-4b均无毒性,但是后代中出现3个对Pi-3,1个对CO39无毒的个体;8个对Pi-4α有毒的个体,对其中可能的原因进行了初步探讨。     

RAB5A基因表达改变对人肺腺癌细胞系GLC-82和SPC-a1的分化和侵袭特性影响

为探讨RAB5A基因对两种人肺腺癌细胞系GLC－82和SPC－al分化及侵袭特性的影响。利用细胞转染技术将构建的RAB5A反义RNA重组质粒（pcDNA3-AntiRAB5A)和RAB5A正义真核表达载体分别转染入低分化人肺腺癌细胞系GLC－82和低转移人肺腺癌细胞系SPC－al中,在稳定筛选后,通过裸鼠体内实验和体外人工基底膜侵袭和细胞趋化运动实验,观察观察转染后细胞分化和转移特性的改变,观察转染前后细胞,发现转染后GLC－82细胞体外侵袭重组基底膜能力及趋化运动能力降低（t检验P＜0．02）;裸鼠体内成瘤实验,瘤块切片病理观察转染后GLC－82细胞出现腺腔样及基底模样结构,分化程度增高,转染后SPC－al细胞体外趋化运动能力,侵袭重组基底膜能力均增强(t检验P＜0．02）。RAB5A基因通过影响细胞的体外趋化运动能力,侵袭重组基底膜能力等对GLC－82和SPC－al细胞的侵袭表型形成及GLC－82细胞的分性发挥重要作用。     

江苏水稻黑条矮缩病毒S10的cDNA克隆序列分析

从来自江苏连云港并在本实验室保存的水稻黑条矮缩病毒接种的病株玉米中提取dsRNA,采用改进的单引物扩增技术获得了病毒基因组片段S10的cDNA克隆并测定了其全序列.结果表明S10全长1 801bp,含有一个ORF,组织结构与日本报道的RBSDV基本一致,核苷酸和推导的氨基酸序列与MRDV的相似性分别为87.5%和92.6%,与RBSDV的相似性分别为93.3%和96.4%.该研究也为病毒dsRNA克隆和序列分析奠定了基础.     

中国人HIV辅助受体CXCR4基因的克隆及序列测定

为了获得HIV辅助受体CXCR4基因,进一步探索艾滋病(AIDS)的诊断、防治方法,采用逆转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)从中国人外周血淋巴细胞中克隆了CXCR4 cDNA基因,得到了预期的1 100bp左右的片段.将PCR产物与T载体连接,并进行了酶切反应鉴定,获得与T载体正向连接的克隆.测序结果表明克隆的片段含有一个开放性阅读框架,编码352个氨基酸残基.搜索GenBank,目标片段与M99293、XM051223、XM051224、XM051225有很高的同源性,比较结果显示克隆的片段包括完整的编码序列,含两个碱基的差异.     

人腺病毒E4转录区ORF4蛋白与细胞凋亡

人腺病毒基因早期转录区4的第4开放阅读框架编码的E4ORF4蛋白是一种多功能病毒调节蛋白,能够特异地引起转化细胞的凋亡,而对正常细胞没有影响,并且这种凋亡机制不依赖于经典的p53途径,E4ORF4蛋白功能的发挥需要与细胞内蛋白磷酸酶2A的相互作用,而且它还能改变Src激酶的活性,E4ORF4蛋白的多种功能协调合作,最终导致了转化细胞的凋亡。     

细菌表面S-层的结构及其功能和应用前景

细菌的细胞外壁一般由细胞壁和细胞膜组成 ,除此之外 ,在许多古细菌和真细菌中还有一层表面结构 ,称为表面层 (Ｓｕｒｆａｃｅｌａｙｅｒｓ)或称为Ｓ 层 (Ｓ ｌａｙｅｒｓ) ,它们是由蛋白质组成的晶格状结构 ,位于细胞壁或细胞膜外层 ,是生物进化过程中最简单的一种生物膜[1,2 ] 。图 1　细菌细胞表面Ｓ 层的冰冻蚀刻电镜照片[3 ]1　Ｓ 层的形态结构细菌的每一个分类群都存在Ｓ 层 ,涉及 3 0 0多个种 ,其中在古细菌中分布更广。与大多数原核细胞的其它表层结构不同 ,Ｓ 层只有通过电镜 ,特别是冰冻蚀刻技术才能清晰地观察到。在真细菌和古细…     

多个抗虫基因转化水稻两用系培矮—64S

应用基因枪法对水稻两用系培矮－64S进行了转化。质粒载体pKC-3串联了三个抗虫基因,将其转化成熟胚诱导形成的愈伤组织,共获得33株转基因植株。分别对R0代植株不同的基因进行PCR及Southern blot分析,并对R1代植株进行了PCR分析。结果表明,三个抗虫基因均已整合到水稻基因组并获得稳定遗传。     

中国水仙查尔酮合酶cDNA的克隆及序列分析（简报）

Chalcone synthase (CHS) is a key enzyme in the biosynthesis of all classes of flavonoids. The production of flower pigment is specifically regulated by the activity of CHS. We cloned the cDNA sequence of CHS-A gene from Narcissus by PCR and analyzed the coding sequence of gene. The result demonstrated that the sequence of the coding region was 1167bp, encoding a protein of 389 amino acid which was more than 80% homology with CHS of the other 8 plants, such as Nicotine abacus and Solana tuberosum.     

热带假丝酵母1230 POX4、POX5基因及其编码蛋白的研究

根据GenBank中热带假丝酵母菌株pk233(ATCC 20336)POX4和POX5基因序列,设计了两对引物。通过PCR扩增,用一种简易的方法克隆了1230菌株中这两个基因。对POX4、POX5的测序表明,1230菌株的POX5基因与pk233菌株的POX5基因存在菌株间的差异。这种差异对蛋白功能的影响有待进一步研究。对POX4和POX5编码的蛋白PXP4、PXP5进行Pfam分析和二级结构预测后,推测PXP4和PXP5的N端可能是FAD结合部位。