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91.
本文讨论了检测丙型肝炎病毒核糖核酸(HCVRNA)的样本来源和处理,引物的设计,合成和选择等问题;重点介绍了蛋白酶K消化法,聚乙二醇沉淀法,异硫氰酸胍一步法,硅凝胶提取法和直接捕获法提取HCV RNA的5种方法,以及一步PCR法,常规RT-巢式PCR,直接RT-巢式PCR,化学修饰的RT-巢式PCR,联合PCR,双温PCR和定量竞争性PCR等7种PCR方法检测HCV RNA,用PCR检测HCV RNA方法的标准化以及检测HCVRNA具有非常重要的意义。本文还介绍了一种新型的定量方法-bDNA信号放大技术检测HcVRNA。 相似文献
92.
用甲型流感病毒75-39株鼠肺适应型,免疫治疗S37腹水瘤小鼠,存活率达93.3%。体外流感病毒感染S37肿瘤细胞,经不同时间观测,到3天时S37细胞经胎盘蓝染色发现细胞100%死亡。而对照组S37细胞死亡率为10%左右(p<0.01)。进一步研究病毒免疫治疗S37腹水瘤小鼠的机理,发现经病毒感染后小鼠NK细胞杀伤活性升高达58%,正常鼠NK活性为22%,两者有显著性差异(p<0.01)。另外,检测病毒注射后小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性也随之升高。 相似文献
93.
利用大鼠肝脏线粒体为材料,以琥珀酸为底物,研究了不同浓度的丹参酮Ⅱ-A磺酸钠对线粒体态4、态3呼吸及呼吸控制率,线粒体跨膜电位,线粒体呼吸链复合体(Ⅱ+Ⅲ)电子传递及质子转移活性的影响。结果证明丹参酮ⅡA-磺酸钠是线粒体呼吸链复合体(Ⅱ+Ⅲ)的有效抑制剂。文中对丹参酮ⅡA-磺酸钠在心肌缺血再灌注过程中的保护作用的分子机理进行了讨论。 相似文献
94.
本文以人分裂细胞核抗原(PCNA)基因作为目的基因,把包括PCNA基因5′端非翻译区(5′NTR)的24bp和编码38个氨基酸114 bp的顺序插入pTZ19R,构建与LacZ’5′端的融合基因。用寡核苷酸定点突变法在PCNA 5′NTR形成SD顺序,再用PCR法在SD顺序左右两侧分别随机突变6个和7个碱基,使它们与结构基因5′端顺序自发地形成各种可能的翻译起始区(TIR)二级结构。重组质粒转化JM109(DE3),以T7 RNA聚合酶-T7启动子调控转录。对288个重组子的β-gal活性测定表明,不同重组的表达量可相差55倍,其中9个表达量不同的重组子的RNA dot blot证实它们在转录水平无明显表达差异。由此提示,该研究策略和方法能有效地改变目的基因的TIR二级结构和捕获具有高翻译起始效率的表达克隆。 相似文献
95.
小麦条锈菌毒性小种及其无毒性突变型侵染初期,是不亲和反应的小麦叶片内可翻译mRNA水平迅速增加,而呈亲和反应叶片的增加幅度小且滞后。同时前者的Poly(A+)-RNA水平高于未接种对照,后者低于对照。32P标记实验证实不亲和反应叶片Poly(A+)-RNA的合成增加早于亲和反应叶片。Poly(A+)-RNA体外翻译产物经SDS-PAGE分离后,放射自显影图谱显示一些多肽条带的35S-Met相对掺入量有定量差异。 相似文献
96.
MethodsforHandy,RapidIsolationofHighQualityRNAbyGuanadiumThioeyauateDuJianYuanYanhuaMaShenglinDongZhiwei(BeijingInstituteforCancerResearchBeijing100034)硫氰胍是一种有效的蛋白变性剂。早在1979年,Chirgwin等就利用氯化铯/硫氰胍超离心技术成功地从RNA酶富集的胰脏组织中提取出未降解的RNA分子[2],从而使它成为抑制RNA酶的首选药物并得到广泛使用,但受到超速离心设备的限制。1983年,Cathala报道了氯化锂/硫氰胍RNA提取法[1]。该方法操作简便,获得的RNA质量很高,但所需时间较长。为了能在短时间内更快… 相似文献
97.
乌奴龙胆中五个新的环烯醚萜甙 总被引:4,自引:0,他引:4
从藏药乌奴龙胆(GentianaurnulaSmith)(龙胆科)的全草中分离到5个新的环烯醚萜甙,命名为乌奴龙胆甙(gentioumoside)A-E;它们的结构主要通过光谱分析得以确定。其中,乌奴龙胆A-C是二聚环烯醚萜甙,而乌奴龙胆甙D和E为马钱素型的环烯醚萜甙,所有这些化合物的分子中都具有一个2,3-二羟基苯甲酰基或其衍生物的取代基。 相似文献
98.
四株嗜盐菌Haloarcula vallismortis(EM201)、Haloferax denitrificans(EM303)、A_5和B_2已通过一对特定引物用PCR技术从总DNA中扩增出各自的16SrDNA片段,分子大小在1.47kd左右.DNA杂交也表明这些PCR产物具有嗜盐菌的同源性. 相似文献
99.
本文研究维生素A对中国对虾(Penaeus chinensis)生长及视觉器官的影响,获得如下结果:1.体长 4cm、体重1g小虾对饲料中VA的最适添加量为 18,000 IU/100g饲料,体长8cm,体重7g大虾对饲料 中VA的最适添加量为12,000 IU/100g饲料,在VA最适添加量下,对虾增长、增重最快,饲料系数最 低。2.中国对虾的视网膜电图在暗适应条件下有b、c、d三波,在白、蓝、黄三种光照刺激下,只有A3组 (12,000IU/100g饲料)其视网膜电位达最高值,即b波振幅达2.45mV,d波振幅达3.7mV,表明VA 在最适添加量下,视觉反应灵敏,视觉功能正常; 3.VA最适添加量的 A3组对虾眼组织完整、无畸变, 而VA含量过高或不足各组,其小眼、视网膜、髓体、X-器官等都有不同程度的畸变、不完整、干瘪等现 象,表明VA投喂量不当时,会引起视觉器官的发育障碍或病变。 相似文献
100.