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141.
Kristel Eggermont Inge J. Goderis Willem F. Broekaert 《Plant Molecular Biology Reporter》1996,14(3):273-279
We describe here a reliable high-throughput method for extraction of RNA from fresh or frozen plant tissue that obviates laborious
and time-consuming homogenisation by mortar and pestle. The method is based on homogenisation by high-speed reciprocal shaking
in presence of a mixture of inexpensive abrasive materials; i.e., quartz sand and glass beads. After homogenisation, the method
follows a standard procedure for RNA extraction by phenol/LiCl. Yield and quality of RNA obtained by homogenisation with the
sand/glass bead mix are identical to those obtained by mortar and pestle. 相似文献
142.
143.
用抗单纯疱疹病毒(HSV)型共同性gC和gD羊克隆抗体(McAb),包被即Eppendorf管,捕捉HSV,同时加入3个引物:一个是HSV─1/HSV─2型共同性上游引物,另两个分别是HSV─1和HSV─2型特异性下游引物。借此建立了能直接分型检测HSV的抗原捕获聚合酶链式反应(AC─PCR)。HSV─1的扩增产物为477bp,HSV─2的为399bp两型病毒经AC─PCR扩增后产生分子量不同的DNA片段,致使AC─PCR能直接分型检测HSV。HSV─1和HSV─2扩增产物的克隆和序列分析表明,本方法特异性好。用本法检测Balb/c幼鼠中枢神经系统HSV感染的脑标本,进一步证实本方法不仅敏感、特异,而且分型准确。 相似文献
144.
丙型肝炎病毒基因组部份NS5区蛋白基因在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
在大肠杆菌中表达了丙型肝炎病毒基因组NS5区A段和部份B段蛋白。NS5A蛋白溶于水,可经过GST亲和层析柱纯化;NS5B蛋白不溶于水,经PBS-Triton X-100洗涤,尿素溶解后,通过离子交换柱纯化。经SDS-PAGE和Westemblot分析,NS5A蛋白除在57kD左右有条带外,还有不同程度的降解产物;NS5B蛋白主要在58kD左右有条带出现。为查明表达蛋白抗体在病人血清中的分布,取9 相似文献
145.
昆虫核酸分子系统学研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
本文从研究对象、方法、类群、内容等方面综述了近十年来昆虫核酸分子系统学研究进展概况。文中首先介绍了RFLPA、探针杂交及DNA指纹、PCR与RAPD-PCR、顺序分析方法及应用情况,列举了在双翅目、膜翅目、同翅目、直翅目等目昆虫中的研究进展,并从居群遗传结构、分类学研究、系统发育和分子进化4个方面总结了昆虫核酸分子系统学的研究内容和主要成果,最后指出RAPD-PCR与RFLP联合用于测序是近期昆虫分子系统学上最有应用价值的方法。 相似文献
146.
147.
肾综合征出血热人体组织中病毒包涵体的性质及意义的进一步研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用免疫组化、原位分子杂交、电镜及免疫电镜等方法进一步对肾综合征出血热人体尸检组织中病毒包涵体(IB)的抗原、核酸性质和超微结构特点作了进一步观察。结果,在39例中的20例尸检病例组织中显示出病毒核蛋白抗原和血凝素抗抗原阳性的IB,其中包括16例陕西尸检病例组织中的6例休克期和1例多尿期病例,17例上海病例中的3例休克期和9例少尿期病例及3例江西病例中的1例休克期病例。IB主要分布在呼吸道和肺泡、肾远曲小管和集合管、胃肠道、腺垂体、扁桃体、胰腺、前列腺等组织的粘膜上皮和腺上皮细胞及肝细胞和睾丸生精上皮细胞胞浆中,阳性细胞形态基本正常。应用原位分子杂交,可在该组细胞小同时检测到病毒RNA,多为胞浆内弥漫阳性,仅少数组织中显示出病毒RNA阳性IB结构。电镜观察阳性组织细胞中出现由大量微丝微管及颗粒样结构组成的IB结构,其小的病毒颗粒状结构、内质网及纤维丝状结构呈病毒抗原阳性,上述结构位于高尔基体区。结果说明该病毒有感染上皮细胞的特性,对其宿主细胞的致细胞病变作用是极其温和的,且多表现在亚细胞水平。IB可能是病毒过量表达抗原的堆积或病毒复制部位,而微丝微管结构可能参与病毒的感染过程。 相似文献
148.
兔出血症病毒主要结构多肽的氨基酸分析 总被引:1,自引:0,他引:1
兔出血症病毒主要结构多肽的氨基酸分析王恒安,杜念兴,徐为燕(南京农业大学,南京210095)关键词兔出血症病毒,结构多肽,氨基酸分析有关兔出血症病毒(RHDV)结构多肽的报道很多,有认为只有1条,有报道4条的,也有报道多达6条的。但其主要结构多肽为分... 相似文献
149.
150.
小麦条锈菌毒性小种及其无毒性突变型侵染初期,是不亲和反应的小麦叶片内可翻译mRNA水平迅速增加,而呈亲和反应叶片的增加幅度小且滞后。同时前者的Poly(A+)-RNA水平高于未接种对照,后者低于对照。32P标记实验证实不亲和反应叶片Poly(A+)-RNA的合成增加早于亲和反应叶片。Poly(A+)-RNA体外翻译产物经SDS-PAGE分离后,放射自显影图谱显示一些多肽条带的35S-Met相对掺入量有定量差异。 相似文献