全文获取类型
收费全文 | 7966篇 |
免费 | 407篇 |
国内免费 | 2350篇 |
出版年
2024年 | 57篇 |
2023年 | 179篇 |
2022年 | 216篇 |
2021年 | 207篇 |
2020年 | 252篇 |
2019年 | 235篇 |
2018年 | 180篇 |
2017年 | 190篇 |
2016年 | 214篇 |
2015年 | 327篇 |
2014年 | 608篇 |
2013年 | 530篇 |
2012年 | 612篇 |
2011年 | 630篇 |
2010年 | 553篇 |
2009年 | 557篇 |
2008年 | 667篇 |
2007年 | 391篇 |
2006年 | 499篇 |
2005年 | 503篇 |
2004年 | 333篇 |
2003年 | 424篇 |
2002年 | 341篇 |
2001年 | 286篇 |
2000年 | 246篇 |
1999年 | 206篇 |
1998年 | 191篇 |
1997年 | 148篇 |
1996年 | 180篇 |
1995年 | 95篇 |
1994年 | 95篇 |
1993年 | 66篇 |
1992年 | 93篇 |
1991年 | 79篇 |
1990年 | 76篇 |
1989年 | 70篇 |
1988年 | 29篇 |
1987年 | 21篇 |
1986年 | 26篇 |
1985年 | 51篇 |
1984年 | 17篇 |
1983年 | 10篇 |
1982年 | 9篇 |
1981年 | 15篇 |
1976年 | 2篇 |
1966年 | 1篇 |
1963年 | 1篇 |
1959年 | 2篇 |
1958年 | 1篇 |
1950年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 354 毫秒
31.
聚合酶链式反应检测结核杆菌的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以人型结核杆菌基因组DNA为模板,合成二段引物各20个碱基进行聚合酶链式反应(PCR)。经琼脂糖凝胶电泳证实,获得一条245bp扩增带。PCR检测的敏感性染色体基因组DNA为1pg,菌悬液为13个活菌/ml。在特异性试验中,人型结核杆趋,牛型结核杆菌、BCG可见此扩增带。被试的其它14种扰酸菌以及变铅青链霉菌、大肠杆菌质粒Puc19、星状诺卡氏菌、红球菌均未见该扩增带。54例肺结核痰标本3种方法检查的阳性率分别为:萋尼氏抗酸染色16.7%,培养法14.8%,PCR 37.0%。前2种检查方法分别与PCR比较,经统计学处理均有显著性差异(P<0.01)。12例非结核性肺部疾患痰标本抗酸染色和PCR均为阴性。结果表明,PCR技术是快速、敏感、特异诊断结核病的方法。 相似文献
32.
蜘蛛染色体的常规制片技术 总被引:3,自引:1,他引:2
目前国内尚未见到有关蜘蛛染色体常规方法的报道。作者参考国外学者的方法,经过实践,并加以补充改进,掌握了蜘蛛染色体的常规制片技术。并且从制取的染色体片中得知,大腹园蛛的染色体数目为32条,横纹金蛛的染色体数目为26条。 相似文献
33.
植物同工酶的研究和应用 总被引:30,自引:2,他引:28
同工酶作为生物界存在的一种普遍现象受到了广泛的研究。同工酶学(Isozymology)虽然不是一个确定的学科,但它已渗透到生物学的每一个领域,尤其是对酶学、物理生物化学和比较生物化学、生理学、发育生物学、细胞和分子生物学、遗传学、进化论等学科更加完善起了并将继续起着重大作用。在科学史上,很少有象同工酶的概念及 相似文献
34.
35.
用抗单纯疱疹病毒(HSV)型共同性gC和gD羊克隆抗体(McAb),包被即Eppendorf管,捕捉HSV,同时加入3个引物:一个是HSV─1/HSV─2型共同性上游引物,另两个分别是HSV─1和HSV─2型特异性下游引物。借此建立了能直接分型检测HSV的抗原捕获聚合酶链式反应(AC─PCR)。HSV─1的扩增产物为477bp,HSV─2的为399bp两型病毒经AC─PCR扩增后产生分子量不同的DNA片段,致使AC─PCR能直接分型检测HSV。HSV─1和HSV─2扩增产物的克隆和序列分析表明,本方法特异性好。用本法检测Balb/c幼鼠中枢神经系统HSV感染的脑标本,进一步证实本方法不仅敏感、特异,而且分型准确。 相似文献
36.
MethodsforHandy,RapidIsolationofHighQualityRNAbyGuanadiumThioeyauateDuJianYuanYanhuaMaShenglinDongZhiwei(BeijingInstituteforCancerResearchBeijing100034)硫氰胍是一种有效的蛋白变性剂。早在1979年,Chirgwin等就利用氯化铯/硫氰胍超离心技术成功地从RNA酶富集的胰脏组织中提取出未降解的RNA分子[2],从而使它成为抑制RNA酶的首选药物并得到广泛使用,但受到超速离心设备的限制。1983年,Cathala报道了氯化锂/硫氰胍RNA提取法[1]。该方法操作简便,获得的RNA质量很高,但所需时间较长。为了能在短时间内更快… 相似文献
37.
斑须蝽三代卵块的空间分布和田间抽样技术研究 总被引:3,自引:0,他引:3
通过田间调查和计算,明确了斑须蝽三代卵块呈聚集分布,且以负二项分布为主。理论抽样数当t=1.00,D=0.3时,n=13.091/+63.878,如果防治指标定为百株虫卵块12块时,则最大抽样数为173株,序贯抽样的累积虫卵块数量界限为:T0(N)=0.12N±0.4735。田间随机取样以平行线和Z字形为最佳。 相似文献
38.
通过空间分布型指数分析,甘薯象对薯块、著株危害空间分布型为随机分布或均匀分布;同时确定了理论抽样数 相似文献
39.
人脑髓鞘碱性蛋白cDNA体外扩增、克隆和鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
采用聚合酶链反应(PCR)从人脑cDNA文库中扩增出600bp的髓鞘碱性蛋白(MBP)cDNA片段,与载体pGEM-3Zf(+)平端连接.重组质粒DNA转化宿主菌JM109,在含X-gal和IPTG的平板上直接筛选阳性克隆.限制性内切酶分析和成套引物扩增鉴定证明,该克隆含有7个外显子的21.5kD人脑MBP全长编码序列. 相似文献
40.
采用光亲和技术检测了血管活性肠多肽(VIP)与核苷酸之间的相互作用,发现VIP可以特异性结合同位素标记的GTP,还发现未标记的GTP以及其它三磷酸核苷抑制这种结合,这意味着VIP与上述三磷酸核苷之间的结合是一种典型的可逆性的结合反应.发现低浓度的GDP,GMP不但不抑制VIP与同位素标记GTP的结合反应,反而增强这种结合.联系到其它研究者关于GTP影响VIP与其受体结合反应的结果,可认为VIP能可逆性地连接一种三磷酸核苷,这种连接受反应系统中不同核苷酸比例影响,通过这种连接来调节VIP与其受体之间的反应. 相似文献