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免疫球蛋白变区基因的体外扩增及人—鼠嵌合抗体的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
应用聚合酶链反应法体外扩增抗人小细胞肺癌单克隆抗体的变区基因,经核苷酸序列分析,轻链变基因为324bp,编码108个氨基酸,重链变区基因为315bp,编码117个氨基酸,将重变区基因克隆至pSV2△HgptHuγ3质粒,经一系列克隆,筛选,得一插入方面正确的表达人-鼠嵌合重链抗体的载体-pSV2△Hgpt2F7VHHuγ3。用电穿孔方法将该粒导入鼠源骨髓瘤细胞J588L,用霉酚酸进行初步筛选,最终 相似文献
165.
本研究探讨了重组人IL-6与大鼠IL-3和/或小鼠GM-CSF结合对正常BN大鼠粒单系体外造血的调控效应。结果表明,IL-6在1000-4000U/ml呈剂量依赖性刺激粒系造血祖细胞集落形成及骨髓细胞的DNA合成,集落以GM型为主,其刺激活性低于IL-3或CM-CSF。lL-6与IL-3和/或GM-CSF的结合对粒单系集落形成及DNA合成无协同或相加作用,甚至出现拮抗效应,但却显著增大集落。提示IL-6可能具有双向调控作用,促进早期造血细胞的增殖,拮抗其它因子对晚期粒单系造血的刺激作用;具有重叠生物效应的这3种细胞因子在调控造血时,它们之间的相互作用应是顺序的而不是同时的。 相似文献
166.
Transthyretin(TTR) gene was highly expressed in normal liver and it has been found to be deleted in part of DNA samples from human hepatic cancer.Its mRNA expression was suppressed in most hepatoma samples.In order to study the biological effect of TTR gene on the growth of hepatoma cells,a recombinant vector containing TTR cDNA was constructed by pCMV,then it was transfected into hepatoma cell lines SMMC-7721 and Q3.It has been demonstrated that the inhibition of growth rate of TTR cDNA transfected hepatoma cells was about 50% in strength compared with that of the control.This inhibition was further enhanced when the transfected hepatoma cells were treated with all-trans retinoic acid.Hepatoma cells of cell lines PLC/PRF/5,SMMC-7721 and Q3 as well as hepatoma cells SMMC-7721 transfected with pCMV or pCMV-TTR were analyzed for TTR expression by Northern hybridization.The low level of TTR expression was found in both hepatoma cell lines and in SMMC-7721 cells transfected with pCMV alone.However,a remarkable TTR mRNA expression was observed in hepatoma SMMV-7721 cells transfected with pCMV-TTR.It seems possible that TTR gene might be a candidate of cancer suppressor gene for human hepatic cancer. 相似文献
167.
The DNaseI hypersensitive site 2 (HS2) of human β-globin locus control region(LCR) is required for the high level expression of human β-globin genes.In the present study,a stage-specific protein factor (LPF-β) was identified in the nuclear extract prepared from mouse fetal liver at d 18 of gestation,which could bind to the HS2 region of human β-globin LCR.We also found that the shift band of LPF-β factor could be competed by human β-globin promoter.However,it couldn‘t be competed by human ε-globin promoter or by human ^Aγ-globin promoter.Furthermore,our data demonstrated that the binding-sequence of LPF-β factor is 5‘CACACCCTA 3‘,which is located at the HS2 region of β-LCR(from-10845 to-10853 bp)and human β-globin promoter(from-92 to -84 bp).We speculated that these regions containing the CACCC box in both the human β-globin promoter and HS2 might function as stage selector elements in the regulation of human β-globin switching and the LPF-β factor might be a stage-specific protein factor involved in the regulation of human β-globin gene expression. 相似文献
168.
在基因治疗中,作为基因转移的载体,迄今几乎都用逆转录病毒,但是在某些情况下,DNA病毒作为载体具有明显的优越性,本对腺相关病毒、腺病毒和疱疹病毒作为外源基因载体进行了简要的讨论。 相似文献
169.
170.
郭中民 《国外医学:分子生物学分册》1994,16(3):109-113
载脂蛋白A-I是血浆中高密度脂蛋白的主要蛋白成份,十多年来其基因结构已清楚,并在染色体上得以定位。目前ApoA-I基因在原核,真核细胞以及转基因鼠中均已获表达,对于该基因的调控机理正在深入研究。本就以上几方面的进展加以综述。 相似文献