大鼠心肌缺血再灌注损伤中诱导CD4＋T细胞募集的趋化因子的表达

目的检测大鼠心肌缺血再灌注中诱导CD4＋T细胞趋化的趋化因子的表达。方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验动物模型,冠状动脉左前降支结扎45 min后恢复再灌,在不同的再灌注时间点0、2、6、9、12 h获取心脏组织（每组4只）,相应时间点的假手术组作为对照。RT-PCR检测趋化CD4＋T细胞的趋化因子的表达;免疫荧光检测趋化因子诱导的CD4＋T细胞的募集;组织学评价心肌细胞的损伤。结果诱导CD4＋T细胞募集的趋化因子的表达在再灌注2 h即迅速增高,随后出现下降。其中,CXCL-10（IP-10）的表达高峰出现在2 h,与其共用同一受体CXCR3的其它两个趋化因子CXCL9（Mig）和CXCL11（I-TAC）的表达,分别在再灌注12 h和9 h出现另一高峰。受趋化因子的诱导,组织中浸润的CD4＋T细胞逐渐增多;心肌的缺血再灌注损伤也随之不断加重。结论诱导CD4＋T细胞募集的趋化因子,通过CD4＋T细胞介导的免疫损伤作用,最终导致了心肌的梗死。     

Ca^2＋依赖和Ca^2＋不依赖的囊泡分泌研究进展

Ca^2＋是促发囊泡胞吐的关键调节因子。最近的研究表明,分泌囊泡和通道之间的空间距离调节囊泡分泌的过程和挂质。Ca^2＋通道开口附近形成的Ca^2＋微区和Ca^2＋钠区和囊泡快速递质释放有非常紧密的联系。SNARE蛋白和钙离子传感器synaptotagmins等在触发分泌中起调控作用。同时另有一类不依赖于Ca^2＋的囊泡分泌存在。Latrotoxin和mastoparan等可以激活这一类不依赖于Ca^2＋的信号通路,从而触发囊泡释放。本文主要从Ca^2＋对囊泡胞吐的调控作用着手,综述了Ca^2＋依赖和Ca^2＋不依赖的囊泡分泌过程和可能的调控机制。     

靶向肿瘤酸性微环境的抗肿瘤新策略

越来越多的体内体外实验及临床检测都证明了肿瘤酸性微环境对肿瘤的发生、发展和迁移起着重要作用。在肿瘤酸性微环境的重要调节因子中,V型ATP酶（V-ATPases）的作用至关重要。这些蛋白能将离子泵出膜外,在正常细胞和肿瘤细胞中都有着多种功能。本文回顾和总结了该领域的最新研究成果：在异种移植人肿瘤细胞的动物模型中,体内实验显示,采用小分子干扰RNA（siRNA）可抑制V．ATPaseS的功能,加入药物性质子泵抑制剂可显著地抑制人肿瘤细胞的生长。这些结果提示V-ATPases可作为癌症治疗中一个重要的新选择靶标。     

Cameleon测钙系统在H202诱导的A549细胞凋亡过程中的应用

观察Cameleon测钙系统在H202诱导的A549细胞凋亡过程中的应用,实时测定胞浆Ca2＋浓度（[Ca2＋]i）,并探讨[Ca2＋]I－与细胞凋亡和Pyk2磷酸化的关系。采用ca2＋指示器CameleonYC3．6转染A549细胞,24h后用50mmol／LH202刺激细胞。激光扫描共聚集显微镜实时测定选取细胞的[ca2＋]i变化。采用Westernblot检测H202刺激的细胞中Pyk2－tyr402磷酸化水平。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果发现,在H2O2作用下,A549细胞胞浆内游离[Ca2＋]迅速升高,同时Pyk2－tyr402磷酸化水平显著升高俨〈O．05）,凋亡细胞百分比显著增加（Ｐ〈0．01）。因此,H202促进A549细胞内Ca02＋释放,可能通过活化Pvk2诱导细胞凋亡。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与肿瘤免疫研究进展

调节性T细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的细胞群,在机体的免疫耐受中起着关键性作用。它们主要通过细胞-细胞直接接触的方式抑制CD4+和CD8+效应性T细胞的活化和增殖,来调节获得性免疫系统,阻止自身免疫疾病的发生。Treg中以自然产生的CD4+CD25+调节性T细胞(固有Treg细胞)研究最多。在人类,调控效能主要限于CD4+CD25high亚型。由于Treg独特的生物学功能,它在自身免疫性疾病的发生、移植耐受和肿瘤的发生和转归上越来越受到重视。该文就该类细胞的特点及其与肿瘤关系的研究进展作一综述。     

IL-21对恒河猴SHIV特异性CD8~+T细胞毒性效应的影响

目的探讨白细胞介素21(interleukin 21,IL-21)对SHIV特异性CD8+T细胞毒性效应的影响。方法定时采集16只SHIV感染恒河猴的外周血,应用实时荧光定量RT-PCR测定病毒载量,流式细胞仪测定CD8+T细胞绝对数,并且体外检测经IL-21刺激SHIV特异性CD8+T细胞后其IL-21R、CD107a及胞内穿孔素(perforin)的表达水平。结果体内实验结果表明外周血病毒载量和CD8+T细胞绝对数之间呈一定程度的负相关。体外实验结果表明SHIV特异性CD8+T细胞经IL-21刺激后其细胞表面表达的IL-21R显著上调,而且perforin+CD8+T细胞和CD107a+CD8+T细胞的百分比上升,同未经刺激的对照组相比具有统计学差异。结论 IL-21能够促进SHIV特异性CD8+T细胞的毒性效应。     

线粒体H^＋-ATPase超分子结构及其催化机制的研究现状

质子泵H^＋-ATPase广泛存在于线粒体,叶绿体,异养菌和光合细菌中,是生物体能量转换的核心酶,有极为重要的生理作用。近几年来,对H^＋-ATPase的结构、功能和调控机制的研究进展很快,对复合体的组装有了进一步的认识。对H^＋-ATPase的主要亚基已经完成序列测定及分析,对各亚基生理功能也进行了较为深入的研究。生物化学及分子生物学工作揭示：生物体内以多种方式对编码H^＋-ATPase主要亚基的基因表达和该酶的活力进行调控。其中,对于线粒体H^＋-ATPasc的研究显得尤为突出。本文综述了线粒体H^＋-ATPase的结构、功能、和调节方面的研究现状,并进一步提出了一些值得深入探讨的问题。     

不同电镜分型女性生殖道尖锐湿疣的CD4^＋、CD8^＋的表达

目的：探讨不同电镜分型的女性生殖道尖锐湿疣（CA）的免疫应答状态的异同。方法：将随机抽取的50例女性生殖道尖锐湿疣的活检组织按照扫描电镜和透射电镜下形态学特征分为尖锐型湿疣、结节型湿疣和内生型湿疣三组。以免疫组织化学方法（IHC）研究CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值于不同电镜分型CA中的表达。结果：结节型湿疣的CD4^＋T细胞数及CD4^＋／CD8^＋比值均显著低于尖锐型湿疣,内生型湿疣介于二者之间。结论：CD4^＋／CD8^＋比值在不同类型CA中的表达结果有统计学差异,结节型湿疣免疫应答状态异常,预示三种电镜分型的尖锐湿疣转归不同。CD4^＋／CD8^＋比值可作为判断预后的指标。     

乙型脑炎病毒结构蛋白C＋pre M和E基因的克隆与序列分析

目的对乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）结构蛋白基因进行扩增、克隆和序列测定。方法根据GenBank中发表的乙脑病毒结构蛋白基因C＋pre M基因和E序列,设计合成两对引物,以JEV Nakayama-NIH株RNA为模板,反转录并扩增目的cDNA,然后与pGEM-T easy载体连接并转化大肠杆菌DH5α菌株,提取的重组质粒用电泳、PCR和酶切鉴定后并进行测序。将JEV Nakayama-NIH与GenBank中报道的多株JEV结构蛋白C＋pre M基因和E基因序列进行了比较。结果Nakayama-NIH与其他参考株C＋pre M和E基因的核苷酸同源性为99%,证实扩增克隆的是JEV的结构蛋白C＋pre M和E基因。结论对JEV分子生物学特征进行了分析,为JEV特异性核酸探针的研制奠定了基础。     

HCO3^-、K^＋和HSO3^-对黄瓜幼苗光合作用的影响

本试验以‘津春4号’黄瓜幼苗叶片为试材,研究HCO3^-、K^＋和HSO3^-对黄瓜幼苗光合作用的影响,试图用KHCO3水溶液中的HCO3^-作为碳源来补充CO2的不足,同时用NaHSO3适当的抑制黄瓜的光呼吸,进而提高光合速率。结果表明：HCO3^-可以作为碳源来补充大气中CO2的不足,HCO3^-、K^＋和HSO3^-可以提高光合速率、叶片可溶性糖含量,可提高叶绿素a含量、叶绿素b含量及叶绿素总含量,从而增强了光合作用的原初反应,能显著提高PSI和PSII的光合电子传递速率,提高ATP合酶的活性,从而加快了光合磷酸化的进程。通过提高Rubisco羧化活性、PEPC酶的含量及活性,降低Rubisco加氧活性,加快了CO2的固定与还原。