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941.
Expression of two types of acetylcholinesterase gene from the silkworm, Bombyx mori, in insect cells 总被引:3,自引:0,他引:3
JIN-YAN SHANG YA-MING SHAO GUO-JUN LANG GAN YUAN ZHEN-HUA TANG CHUAN-XI ZHANG 《Insect Science》2007,14(6):443-449
Complementary DNAs encoding two types of acetylcholinesterase (ACHE) were isolated from the silkworm, Bombyx mori. The type 1 (Bmacel) and type 2 (Bmace2) ORFs are 2052 and 1917 bp in length, respectively. Both the complete ORFs of the Bmaces and C- terminal truncated forms were recombined into the Bacmid baculovirus vector under the control of the polyhedrin promoter and expressed in Trichoplusia ni (Tn-5B 1-4) cells. The resulting products exhibited ACHE activity and glycosylation of the expressed proteins. An inhibition assay indicated that the ace2-type enzyme was more sensitive than the acel-type enzyme to inhibition by eserine and paraoxon. 相似文献
942.
943.
Wang Shujing Liu Yan Lin Xuesong Fu Xue Xu Jianyong Liu Xinghan 《Frontiers of Biology in China》2007,2(3):276-283
To obtain an anti-tumor peptide of Tumstatin and detect its biological activity, the nucleotide sequence encoding 185–203
amino acids (19peptide) of Tumstatin was synthesized and inserted into the fusion protein vector pTYB2. After identification
by sequencing and restriction endonucleases, the recombined vector was transformed into BL-21 (DE3) E. coli competent cells. Transformed E. coli BL-21 (DE3) were induced by isopropyl-β-thiogalactopyranoside (IPTG), and then expressed. By 1,4-dithiothreitol (DTT) reduction,
the soluble 19peptide was obtained from a chitin affinity chromatograph. The biological activity of 19peptide was determined
by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-y1]-2,5-diphenytetrazolium bromide (MTT) assay, cell growth curve, the effect of the ascitic fluid
transfevent H22 hepatoma on mice and via histopathological slices. The purified 19peptide directly inhibited proliferation
and migration of murine B16 melanoma cells, SMMC-7721hepatoma carcinoma cells and human umbilical vein endothelial cells (HUVEC).
The tumor inhibition rate of mice ascitic fluid transfevent H22 hepatoma was 48.46%. Histopathological slices showed that
it could promote tumor tissue necrosis and decrease the density of blood vessels. With higher anti-tumor activity, 19peptide
has the potential to become a novel, potent anti-tumor agent.
Translated from Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2005, 21(3): 322–328 [译自: 中国生物化学与分子生物学学报] 相似文献
944.
Cloning, sequence analysis and identification of a nonsense mutation-mediated mRNA decay of porcine GSTM2 gene 总被引:2,自引:0,他引:2
Huang J Xiong Y Deng C Zuo B Xu D Lei M Jiang S 《Acta biochimica et biophysica Sinica》2007,39(8):560-566
The glutathione S-transferase mu 2 gene (GSTM2) encodes a GST functioning in the elimination of electrophilic compounds and the regulation of cell growth. In this study, the sequence of porcine GSTM2 gene that contains the complete sequence encoding a protein of 218 amino acids was cloned. The deduced amino acid sequence shared 76%, 78% and 76% identity with that of human, mouse and rat, respectively, mRNA expression analysis showed that the porcine GSTM2 gene was expressed at a high level in liver and testis, at a medium level in longissimus dorsi muscle, adipose tissue, spleen and lung, at a low level in kidney, and at a very low level in heart and embryo. A nonsense mutation (CGA→TGA) resulted from C27T substitution in the fifth exon to produce a premature translation termination codon was identified, and it was discovered that nonsense-mediated mRNA decay might have an effect on the regulation of porcine GSTM2 gene expression. This polymorphism was analyzed in Large White, Landrace, Meishan and Qingping pig populations using the Taq I-polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism method. The result showed that allele C had a higher frequency than allele T in each population. 相似文献
945.
cDNA微阵列技术研究干旱胁迫下柽柳基因的表达 总被引:3,自引:0,他引:3
运用cDNA微阵列技术研究干旱胁迫下柽柳(Tamarix androssowii)基因的表达。分别将Cy5和Cy3两种荧光染料标记在干旱处理和对照的柽柳cDNA上,并与载有柽柳基因的微阵列进行杂交,通过计算机对芯片进行扫描和分析研究干旱胁迫下基因的表达。共获得了47个下调表达和62个上调表达的基因。Blastx分析表明这些基因按功能可以分为脱水保护、信号传导与调控、活性氧清除、光合作用、代谢、核糖体蛋白、蛋白质的分解与再生等几大类别。同时,发现了一些与干旱胁迫相关的功能未知基因和新基因。从而揭示了柽柳具有活性氧消除、代谢调节、脱水保护、蛋白质降解与再生等抗旱途径,并阐述了干旱胁迫前后柽柳基因的差异表达。 相似文献
946.
发菜中超氧化物歧化酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
采用基因工程技术从发菜总DNA中克隆了一段的基因序列,该序列与基因库中已公布的编码地木耳(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为97%。将该基因插入含T7启动子质粒pET-32中构建表达质粒pET-sod,然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,表达菌株用1 mmol·L-1 IPTG诱导表达数小时后,产生较多的重组的蛋白,且该蛋白以可溶性蛋白形式存在。SDS-PAGE分析表明,在相对分子量约为22 kd的位置有一条明显蛋白质带。将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化;NBT光还原法测定表达产物的比活力,每毫克纯化蛋白约为2 550 U。对纯化后的蛋白进行高温胁迫研究,将该纯化蛋白在60℃高温下胁迫90 min后,其活性为原(未经胁迫)蛋白活性的85%。 相似文献
947.
目的:探讨不同剂量希罗达对4T1乳腺癌小鼠肿瘤血管生成的影响,并观察其抑瘤效果和毒副作用。方法:建立荷4T1乳腺癌小鼠模型,分别给予持续低剂量希罗达、最大耐受剂量(maximumtolerateddose,MTD)希罗达、低剂量希罗达治疗,观察肿瘤体积、小鼠体重和外周血白细胞计数及小鼠生存期。实验终末时行免疫组化染色,测定肿瘤微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。结果:与对照组和MTD希罗达治疗组比较,持续低剂量希罗达治疗组小鼠肿瘤MVD值和VEGF表达均显著降低(P<0.05)。与MTD希罗达治疗组比较,持续低剂量希罗达治疗组肿瘤生长比较缓慢,并且没有明显的体重减轻或白细胞数下降等毒性迹象,小鼠生存期无显著延长(P>0.05)。结论:持续低剂量希罗达给药方式靶向于乳腺癌血管生成,不易产生耐药,增加了抑瘤效果,毒副作用小,动物生存质量明显提高。 相似文献
948.
绝经是女性一生中很重要的生理现象之一,它能增加一系列复杂免疫、神经退化、新陈代谢和心血管方面的疾病。血液单核细胞能分化成各种各样的细胞,这些细胞在组织形态发生和免疫应答方面起着很重要的作用。本研究中采用了包含大约14,500个基因探针的Affymetrix Human U133A基因芯片来研究健康的绝经前和绝经后女性外周血液单核细胞中的基因表达谱。样本之间的对比分析表明有20个基因上调,20个基因下调。其中的28个基因根据它们的生物过程如细胞繁殖、免疫应答、细胞代谢等等被分成了6个主要的GO类别;剩下的12个基因其生物学功能还没有被鉴定。研究结果支持了我们的假设:血液单核细胞的功能状态确实受到绝经的影响,而且由此带来的改变可能是由全基因组范围的基因表达谱而决定的。本研究中鉴定的一些差异表达基因有可能作为以后研究与绝经相关的系统免疫、神经退化和心血管疾病的候选基因研究。此工作是这个研究方向的第一次尝试,为将来的进一步研究奠定了基础。 相似文献
949.
用RT-PCR技术从小立碗藓中(Physcomitrella patens)克隆了核编码的MinE基因,命名为PpMinE,并克隆了该基因的基因组DNA。序列比对显示该基因编码的蛋白质与真细菌和绿藻叶绿体编码的MinE蛋白具有较高的相似性。pMinE-EGFP融合蛋白在烟草中的瞬时表达证明该蛋白定位于叶绿体内。在大肠杆菌中过量表达PpMinE导致细胞不正常分裂,产生无染色体的小细胞,这表明MinE的功能在进化上是保守的。在系统发育树中,PpMinE和高等陆生植物有较近的亲缘关系。在已知的陆生植物的叶绿体基因组中没有找到MinE的同源蛋白,这暗示在进化过程中MinE从叶绿体到细胞核的水平转移可能发生在陆生植物发生以前。 相似文献
950.