对氨基苯甲酸乙酯衍生法测定IgM中的糖链结构

糖蛋白中痕量的完整寡糖链结构可用现代质谱方法测定。对寡糖的对氨基苯甲酸乙酯衍生物的液态二次离子质谱进行了研究,测定了基质效应,比较了正、负离子谱,使得麦芽七糖衍生物的最小检测量达到4p mol。应用氘标记类似物及高分辨质谱数据解释了IgM中N-连接的寡糖链分子结构。     

DAKO-M1在胃癌组织表达的免疫组织化学研究

对９５例胃癌组织进行ＤＡＫＯ－Ｍ１（ＤＡＫＯ－ＣＤ１５）表达的免疫组织化学研究。结果发现,ＤＡＫＯ－Ｍ１在胃癌中的阳性率（８６．３％）显著高于癌旁粘膜和正常胃粘膜（Ｐ＜０．０５和０．００５）。其定位分布有３种类型：即腺腔缘型（Ａ型）、胞膜型（Ｍ型）和胞浆型（Ｃ型）。胃非肿瘤性粘膜组织仅为Ａ型。胃癌３型兼有,高分化癌Ａ型（１８．２％）和Ｍ型（６１．４％）均显著高于低分化癌（Ｐ值均＜０．００５）;低分化癌和粘液癌Ｃ型（各占７２．０％和５３．８％）均显著高于高分化癌（２０．５％）,Ｐ＜０．００５和０．０２５。ＤＡＫＯ－Ｍ１Ｃ型和Ｍ型淋巴结转移率（分别为９７．１％和６９．２％）均显著高于Ａ型（３３．３％）者,Ｐ＜０．００５和０．０５。结果提示,ＤＡＫＯ－Ｍ１是判断胃癌分化水平、恶性程度及预测淋巴结转移的一种有用标志物     

亚麻抗锈病基因M4的特异分子标记

用520个10碱基随机引物对含有亚麻抗锈病基因M4的近等基因系材料NM4及其轮回亲本Bison进行RAPD分析,其中OPA18引物在NM4材料中稳定地扩增出特异的DNA片段。用Bison与NM4杂交产生的F2分离群体进行的遗传连锁性分析表明,RAPD标记OPA18432与M4基因紧密连锁,二者之间的遗传距离为2.1cM。将OPA18432片段回收,克隆和测序,成功地将其转化为SCAR标记。对不同抗源材料的扩增分析表明,该标记是M4基因的特异标记。目前这一标记已成功地应用于亚麻抗锈病基因M4的分子标记辅助选择育种。     

共表达PRRSV修饰的GP5与M蛋白的重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构建及其生物学特性

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)修饰的ORF5(MORF5)与ORF6基因分别克隆入笔者构建的改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia virus ankara, MVA) 转移载体pLR-gpt的两个多克隆位点中, 构建重组转移载体pLR-MORF5/ORF6。经脂质体介导, 将构建好的pLR-MORF5/ORF6 转染已感染亲本MVA 2h的BHK-21细胞单层, 用药物选择性培养基(MXHAT)在24孔板上进行连续筛选纯化, 得到带有筛选标记的重组病毒rMVAgpt-MGP5/M。将rMVAgpt-MGP5/M 感染表达Cre重组酶的BHK-21细胞(BHK-Cre), 获得删除筛选标记的重组病毒rMVA-MGP5/M。PCR证明MORF5与ORF6成功插入MVA基因组中; Western blotting与间接免疫荧光证明重组病毒能表达MGP5与M蛋白; 重组病毒的生长特性表明与亲本MVA出现病变的时间及病毒滴度基本一致。结果表明, 本研究成功构建了共表达PRRSV MGP5与M蛋白的重组MVA, 并且表达产物具有免疫原性; 外源基因的插入不影响MVA复制, 具较好的稳定性, 从而为PRRSV新型基因工程疫苗的研制奠定了良好的基础。     

外源突变基因AP1M2转化毛白杨的研究

为探究毛白杨开花调控分子机制并获得不飞絮毛白杨株系,利用农杆菌介导法将显性负突变结构基因爿Pm挖转入毛白杨中,经PCR检测,共获得阳性转化植株7株。通过RT_qPCR检测转基因植株中外源基因AP1M2表达量,发现各株系间的表达水平差异显著,最高为内参的5．41倍,最低为1．89倍。对转基因毛白杨中内源刚尸,和其他开花关键基因的表达量进行检测,发现内源AP1的表达受到抑制,表达量明显下调;其他开花关键基LFY、AP3、PI、SEP3和FTI等的表达量也有不同程度的降低,而FT2表达量并没有明显变化。这些研究结果表明转4尸m扭毛白杨中API、LFY、AP3、PI、SEP3和FT2的表达受到明显抑制．对毛白杨花发育将有一定影响。     

唐氏综合征的产前筛查

问：我妻子的产前筛查报告结果是这样的：24周岁，临床诊断：8周3天，PAPPA：138mIU／L，MOM值：0．2：Freebeta．hCG：45．70ng／mL，MOM值：1．1；21三体风险：1／170（高风险）。请问这份报告单说明什么问题？应该采取什么措施？     

几种生物的基因组分析

几种生物的基因组分析赵文会洪国藩（中国科学院国家基因研究中心,上海２００２３３）关键词基因组分析Ｅ．ｃｏｌｉＭ．ｊａｎｎａｓｃｈｉ酵母基因组研究是当今世界生物学中投资最大的两大热点领域之一（另一个是艾滋病研究）。迄今已完成多种生物的基因组测序（表１）...     

免疫固定电泳在诊断多发性骨髓瘤中的作用

目的 探讨分析免疫固定电泳在诊断多发性骨髓瘤（MML）中的作用。方法 以2014年10月至2016年10月丽水市人民医院收治的110例需进行免疫固定电泳检测的患者为研究对象,对其进行血清M蛋白和浓缩尿中M蛋白的检测,筛选出两种检测均显阳性的患者,并将检测结果与临床资料相比较,对比血清M蛋白和浓缩尿中M蛋白的检测阳性与多发性骨髓瘤之间的关系。结果 110例需进行免疫固定电泳检测的患者中,经临床资料分析,有34例患者为多发性骨髓瘤。这34例患者血清M蛋白的检测显阳性,临床诊断符合率为100.00%;25例患者浓缩尿中M蛋白的检测显阳性,临床诊断符合率为73.53%。血清检验的临床符合率较尿液检验更好,差异具有统计学意义（P＜0.05）;34例血清M蛋白的检测显阳性的患者中,IgG型21例（61.76%）,IgA型8例（23.53%）,IgM型3例（8.82%）,γ轻链型2例（5.88%）。结论 MML患者采用血清及尿液免疫固定电泳检测,血清M蛋白检测阳性率较浓缩尿中M蛋白的检测阳性率要高,血清及尿液进行的免疫固定电泳检测对MML的诊断、检测及预后判断具有重要的提示作用,临床工作者可以根据电泳图谱对MML进行分型,并制定个体化的治疗方案。     

缺苞箭竹密度对养分元素贮量、积累与分配动态的影响

研究了缺苞箭竹(Fargesiadenudate)-紫果云杉(Piceapurpurea)原始林下不同密度缺苞箭竹群落的养分元素贮量与分配动态以及养分元素在一个生长季节内的积累量。结果表明:地上、地下部分的N、P、K、Ca、Mg贮量均随着箭竹密度的增加而增大,养分元素贮量排序为:K>N>Ca>P>Mg。密度较大的箭竹群落(D1和D2)中,地上部分的N、P和K贮量大于地下部分,而密度较小的箭竹群落(D3)中P和K贮存于地下部分的比例较大,3个群落中的地下部分Ca和Mg贮量均大于地上部分,且地下部分的养分元素贮量的比例随着箭竹密度的增加而减少。养分元素的总积累量排序为:K>N>Ca>P>Mg,且地上部分和群落的总积累量随着箭竹密度的增加而增加,总积累率以D1群落最大,3个群落的养分元素积累率大小顺序为:Mg>Ca>P>N>K。地下部分(根系和鞭)养分元素贮量比例随着箭竹密度的增加而下降,而地上部分(叶、枝和竹杆)养分元素贮量比例随着箭竹密度增加而上升。密度对缺苞箭竹养分贮量、积累和分配动态有深刻影响。     

限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA, sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠“丢失”该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。