甘蔗ACC氧化酶全长cDNA的克隆及序列分析

ACC氧化酶是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。根据报道的植物ACC氧化酶基因序列设计特异引物,从甘蔗cDNA文库中克隆到一ACC氧化酶基因片段,命名为GZ-ACO,该基因长792bp,与甘蔗基因组文库中克隆的ACO基因片段仅18个碱基之差。根据该cDNA片段序列,设计两对末端扩增的特异引物,利用RACE-PCR技术,获得GZ-ACO片段的5′端和3′端序列。用VectorNTI7.0软件对三个序列进行拼接和分析,结果得到全长的甘蔗GZ-ACO氧化酶基因。GZ-ACOcDNA核苷酸序列长1307bp,具有一个972bp完整的读码框,启动子ATG位于126bp,终止子TAA位于1097bp,推导编码323个氨基酸。系统进化分析表明,GZ-ACO基因氨基酸序列与其它植物已报道的ACC氧化酶基因具有65%~86%的同源率,且与单子叶禾本科植物首先聚类,其次与单子叶芭蕉科、兰科植物聚类,最后与双子叶植物聚类,与植物形态的系统进化结果一致。该基因已在DDBJ/EMBL/GenBank基因数据库注册,注册号为AY521566。     

微嗜酸寡养单胞菌中的漆酶对黄曲霉毒素B1降解脱毒的生物活性

[目的]探究微嗜酸寡养单胞菌中的漆酶对AFB1的降解活性,并确定漆酶在菌株CW117降解代谢AFB1过程中的贡献.[方法]从微嗜酸寡养单胞菌基因组中,共筛选到两个漆酶基因lc1和lc2,并用大肠杆菌BL21外源表达蛋白rLC1和rLC2,在体外检测其对AFB1的降解活性.同时参考前人报道,研究了氧化性辅剂对漆酶AFB1...     

α1-抗胰蛋白酶——一种可抵抗SARS-CoV-2细胞侵袭的多功能蛋白的研究进展

α1-抗胰蛋白酶(α1AT)是一种由肝脏合成并分泌至外周血循环系统的多功能糖蛋白,其主要功能是中和肺部组织蛋白酶从而保障肺部不受自体蛋白酶的攻击而引发病变;此外在保持免疫平衡、控制炎症反应、抵御抗原侵袭等方面α1AT也发挥重要作用。近年来的研究发现α1AT具有良好的抗病毒功能,在抵抗包括HIV、SARS等在内的高致病病毒时, α1AT作为机体自身的天然防御分子发挥了很好的屏障作用。最新的研究显示, α1AT通过抑制受体细胞表面跨膜丝氨酸蛋白酶2的活性来降低SARS-CoV-2病毒颗粒与宿主细胞的结合作用,从而抑制SARS-CoV-2对细胞的侵袭。因此, α1AT作为极具潜力的天然蛋白质药物被用于应对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床研究和治疗当中。该文从介绍α1AT天然生理学功能入手,展开介绍其抗病毒功能,着重归纳其在抵抗SARS-CoV-2细胞侵袭方面的机理研究进展。     

基于AAVS1位点构建稳定表达Cas9蛋白的非小细胞肺癌细胞系

该研究旨在利用CRISPR/Cas9介导的同源重组技术将Cas9基因序列整合入非小细胞肺癌A549细胞基因组中的AAVS1位点,建立稳定表达Cas9蛋白的A549单克隆细胞系。该技术避免了Cas9基因随机整合进入基因组带来的潜在风险。通过PCR、Western blot、CCK-8、STR技术分别检测A549单克隆细胞系的插入位点、Cas9蛋白水平、细胞增殖能力、基因编辑能力以及细胞身份信息。上述结果显示,在单克隆细胞系A549 Cas9-copGFP-1中Cas9基因准确插入至AAVS1安全位点并高表达Cas9蛋白,细胞增殖能力未发生改变。此外,该细胞还具有良好的基因编辑能力,细胞身份信息准确无误。总之, A549 Cas9-copGFP-1细胞可用于进一步的基因编辑,为肺癌相关基因的高通量筛选和功能性研究提供一种有力工具。     

溶瘤病毒的肿瘤治疗进展

溶瘤病毒(oncolytic viruses, OVs)是一种具有发展潜力的肿瘤免疫治疗方法,是天然或经基因改造后对肿瘤具有靶向性的DNA病毒和RNA病毒。溶瘤病毒具有肿瘤靶向性、作为载体传递多种转基因表达、诱导免疫性细胞死亡和促进抗肿瘤免疫反应等优点,而且具有可耐受的安全性。该文将从溶瘤病毒的发展历程、分类、作用机制、改造策略、生物标志物和临床应用的研究现状和现存问题展开综述。     

肠道干细胞标记物的研究进展

肠道干细胞(intestinal stem cells, ISCs)除了具有自我更新能力和多能性外,还表现出活跃的增殖、信号活动以及特殊的表观遗传和代谢特征。其主要作用是维护肠道组织的稳态、修复受损的肠道黏膜和调节肠道细胞分化。目前,主要有两种ISCs,各自拥有不同的特异性标记物且具有广泛不同的生物学功能,但都与肠道疾病的发生和发展关系密切。然而, ISCs标记物的缺乏严重限制了对ISCs生物学特性的研究,阻碍了临床上ISCs及其衍生物用于治疗肠道相关疾病的研究进程。以下就近年来ISCs标记物及肠道诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs)的研究进展作一综述,旨在为临床治疗肠道疾病提供有益线索。     

MC-LR对草鱼组织显微结构及HO-1、IL-10R1基因表达的影响

该项目主要研究微囊藻毒素-LR(microcystin-LR, MC-LR)对草鱼机体的毒害作用。草鱼经腹腔注射微囊藻毒素-LR的剂量为100μg/kg, 0.5 h、1 h、3 h、6 h、12 h和24 h后对草鱼组织和血液采样,然后进行组织显微结构和基因HO-1和IL-10R1的表达分析。(1)通过光学显微镜观察,肠道组织病理变化表现为肠绒毛上皮细胞脱落,杯状细胞增多,上皮细胞的细胞核变形; 6 h实验组出现肠道充血; 12 h实验组和24 h实验组肠绒毛黏膜固有层分离,且有时间效应。(2)采用荧光定量PCR技术对HO-1和IL-10R1基因进行检测,结果显示草鱼鳃、肝脏、肠道、脾脏和心脏组织各实验组较对照组的HO-1基因表达量显著降低(P<0.05),同时草鱼脑、肝脏、肠道、脾脏组织和血液各实验组较对照组的IL-10R1基因表达量显著降低(P<0.05)。微囊藻毒素-LR导致草鱼肠道、肝脏和鱼鳃等器官的病理损伤和HO-1和IL-10R1基因表达量显著降低,可为MC-LR刺激草鱼的炎症反应与免疫反应提供相关理论依据。     

Genetic Diversity and Population Structure of the Oriental Garden Lizard,Calotes versicolor Daudin, 1802(Squamata: Agamidae) along the Mekong River in Thailand and Lao PDR

Calotes versicolor Daudin,1802,is geographically widespread along the Mekong River basin.The Mekong River is play important role as a significant natural barrier to several terrestrial animals living on different sides.This study aims to analyze the genetic diversity and population structure of C.versicolor populations collected from different sides of Mekong River using mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1(CO1)sequences.We obtained sequences of 200 individuals from 18 sampling localities from left and right sides of the Mekong River in Lao PDR and Thailand respectively.Overall,91 haplotypes were detected,which reflect high levels of genetic diversity in this species at the study areas.Haplotype network and phylogenetic analyses revealed that there were six major lineages(lineage C–lineage H)of C.versicolor populations within the Mekong River,whereas lineages A and B have previously been found from China and Vietnam.The genetic distance among C.versicolor was significantly related to spatial distance,however,the Mekong River had no significant effect on genetic distance.Our findings,together with previous studies,suggests that C.versicolor in Asia is a species complex with other cryptic lineages being likely but there is a need for further exploration.Thus,comprehensive genetic,biological and ecological studies of C.versicolor should be conducted throughout its entire distribution range.     

多巴胺D1受体在频闪光诱导性近视发生发展中作用的研究

目的 研究多巴胺D1类受体(D1DR)在频闪光诱导性近视(flickering light-induced myopia,FLM)发生中的作用,初步探讨FLM的发病机制.方法 36只2周龄豚鼠随机分成4组(n=9):对照组、频闪光(FLM)组、频闪光+溶剂(FLM+Vehicle)组、频闪光+D1DR拮抗剂(FLM+S...     

白细胞介素-6与慢性乙型病毒性肝炎进展的关系

白细胞介素-6(IL-6)是一种具有多效生物活性的炎性细胞因子,参与体内多种炎症反应介导的免疫损伤,在病毒感染性疾病及其进展中影响深远.乙型肝炎病毒(HBV)感染宿主后可引起一系列炎性免疫反应,导致乙型病毒性肝炎、肝硬化甚至肝细胞癌等多种疾病的发生.大量研究表明IL-6与乙型病毒性肝炎发生及进展密切相关.本文旨在对IL...