贵州灵芝科Ⅳ.

本文报道贵州灵芝科(Ganodermataceae)灵芝属(Ganoderma)2种,1.多分枝灵芝Ganoderma ramosissimum Zhao;2.任氏灵芝Ganoderma renii He,sP.nov.上述研究标本保藏在贵州科学院生物研究所真菌标本室(HMBAG)。     

灵芝哈茨木霉病害生防细菌的筛选及菌剂制备研究

为防治灵芝的哈茨木霉病害,对土壤细菌进行筛选,得到1株具有抑菌效果的菌株,编号为JSW-0601,初步测定了JSW-0601对哈茨木霉的抑菌效果,并与11种生防药剂进行对比,通过分子生物学方法和生理生化特性鉴定了JSW-0601的分类地位,确定了JSW-0601的发酵条件,对菌剂制备进行初步探究。细菌菌体制成的菌液对病原菌有抑制作用,其中20μL的菌液抑菌率为63. 33%,作为毒介质菌体原液的抑菌率最高可达94. 93%,2. 5%滤菌液抑菌率达30. 80%,20%灭菌液抑菌率也可达80. 20%,菌体分泌的胞外活性物质和化学物质均有较好的抑制效果。JSW-0601为短小芽胞杆菌,抑菌效果优于11种生防药剂,最佳发酵条件为0. 1%接种量、培养48 h,培养机制为麦芽糖0. 25%、蛋白胨1%、硫酸镁0. 5%,最优载体为硅藻土。筛选得到的短小芽胞杆菌对灵芝哈茨木霉病害的抑制作用较好,为灵芝木霉病害的生物防治提供科学参考,同时也为短小芽胞杆菌的应用提供了新方向。     

灵芝蛋白类活性成分的研究进展

灵芝蛋白质是除了灵芝多糖和三萜外,另一类重要的活性物质。它不仅是灵芝生命活动的重要物质而且具有独特免疫原性使其在免疫调节和抗肿瘤病等方面具显著效果。近年来,国内外在灵芝蛋白质的结构特征和生物活性等研究方面已取得显著的成效。本文综述了灵芝蛋白类活性物质的种类和特征,叙述了相关的药理功能,探讨了灵芝蛋白质研究的前景和意义。     

一种女贞叶抗冻蛋白的分离纯化

根据抗冻蛋白与冰结合的特性,利用碎冰从女贞(Ligustrum lucidum)叶提取液中分离出抗冻蛋白。结果表明,通过碎冰吸附、凝胶过滤和离子交换层析可以获得4个组分的蛋白质,其中的1个经鉴定具有热滞活性。在蛋白质浓度为5mg.mL-1时,它的热滞活性(thermal hysteresis activity,THA)值为0.678°C,对其进行全波长扫描(200-1000nm)发现在975nm处有吸收峰;该蛋白亲水性氨基酸含量较高。     

冬虫夏草与韩芝液体发酵混合培养特性研究

平板培养基上比较了冬虫夏草、韩芝及树舌的菌丝生长速度和对淀粉的利用情况,结果显示三者的生长速度分别达到1.28、0.64和0.55 cm/d,且韩芝与树舌对淀粉的利用均优于冬虫夏草;混合培养结果得出菌种的最佳菌龄比为虫草:韩芝=3 d:5 d,最佳的接种比例为2:3;正交试验混合发酵最佳的培养基配方(%):葡萄糖1.0、淀粉2.0、黄豆粉2.0、酵母粉0.5,在此条件下,菌丝生物量达到最大值1.97 g/100 mL。     

韩芝液体深层发酵培养基的优化研究

固体培养基上比较了韩芝与树舌的菌丝生长速度,二者平均分别达到0.77 cm.d-1和0.67 cm.d-1;液体培养试验了不同碳氮比、培养基组成对韩芝菌丝生长的影响,得出了菌丝生长较适宜的碳氮比范围在18~24∶1,最适宜的碳氮比在22∶1;对比试验、正交试验得出韩芝液体培养最佳的培养基配方为(g.L-1):葡萄糖10.0、玉米粉20.0、大豆粉20.0、酵母粉5.0;在此条件下,菌丝的平均产量可达23.12 g.L-1。     

紫芝超细粉挥发油成分GC-MS分析

将紫芝Ganoderma sinense(“闽紫96”,HMAS 77207,阔叶树枝桠材或边材栽培)超微粉碎加工成500目的子实体超细粉。激光粒度分析表明:紫芝超细粉的表面积到834．18m~2/kg,中位径(D50)为12．68μm。气质联用分析结果表明:从紫芝超细粉挥发油中分离到35种成分,出峰时间为7．872～30．239min,确定了其中32个成分,占相对含量的88．642％;绝大多数成分为脂肪族化合物(67．216％),主要成分(20．67％)为2,6-二叔丁基一苯酚为芳香族化合物,还检出2种杂环族化合物。     

Ganoderma lucidum polysaccharide reduces melanogenesis by inhibiting the paracrine effects of keratinocytes and fibroblasts via IL-6/STAT3/FGF2 pathway

Our previous study found that Ganoderma lucidum polysaccharide (GLP), bioactive ingredients from Ganoderma lucidum, protected fibroblasts from photoaging. However, whether GLP can affect melanogenesis in melanocytes through regulating paracrine mediators that secreted by keratinocytes and fibroblasts is unclear. We aimed to investigate the efficacy and mechanisms of action of GLP in melanogenesis by regulating paracrine effects of keratinocytes and fibroblasts. The effect of GLP on cell viability affected by GLP was measured by the 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) assay. After an immortal keratinocyte line (HaCaT) and primary fibroblasts (FB) were treated with GLP, the supernatants of HaCaT and FB cells were collected and cocultured with an immortalized melanocyte line (PIG1). The expression levels of melanogenesis-associated genes in PIG1 cells were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) and western blot analysis. Furthermore, FRS-2, ERK, JNK, and p38 phosphorylation levels were measured. Then, major melanogenic paracrine mediators in HaCaT and FB cells treated with GLP were evaluated by qRT-PCR and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In addition, the expression of IL-6 and STAT3 was examined in HaCaT and FB cells. GLP was not cytotoxic to HaCaT and FB cells. The supernatants of GLP-treated HaCaT and FB cells downregulated the expression levels of MITF, TYR, TYRP1, TYRP2, RAB27A, and FSCN1 genes and inhibited the phosphorylation of FRS-2, ERK, JNK, and p38 in PIG1 cells. GLP also decreased FGF2 secretion in HaCaT and FB cells. Moreover, GLP reduced IL-6 expression and STAT3 phosphorylation in HaCaT and FB cells. GLP reduced melanogenesis in melanocytes by inhibiting the paracrine effects of keratinocytes and fibroblasts via IL-6/STAT3/FGF2 pathway.     

灵芝UDP-葡萄糖4-差向异构酶酶学性质研究及其应用

【背景】灵芝多糖是灵芝的重要活性物质之一。UDP-葡萄糖4-差向异构酶（UDP-glucose 4-epimerase,UGE,EC 5.1.3.2）是灵芝多糖合成途径中糖供体生成的重要酶,其参与了UDP-葡萄糖与UDP-半乳糖的相互转化,与多糖中半乳糖残基含量密切相关。【目的】通过对来源于灵芝的UGE基因进行异源表达,丰富灵芝多糖糖供体合成途径重要酶的酶学特性信息,深入了解灵芝多糖代谢合成途径。【方法】以灵芝菌株（Ganoderma lingzhi） CGMCC 5.26的cDNA为模板,克隆得到UGE基因GL30389,并在Escherichia coli BL21（DE3）中诱导表达,产物纯化后进行酶学性质、酶动力学、底物专一性及转化率的研究。【结果】灵芝UGE的分子量为45 kDa。最适反应pH值为6.0,在pH 7.0—9.0范围内有较好的稳定性;最适反应温度为30℃,温度在40℃时稳定性最好。Fe²⁺和Mg²⁺对UGE有激活作用。以UDP-葡萄糖为底物时,K_m为0.824 mmol/L,V_max为769.230 μmol/（L·min）,k_cat为1.333 s^—1,k_cat/K_m为1.618 L/（mmol·s）。灵芝UGE对D-葡萄糖、半乳糖醛酸及N-乙酰葡萄糖胺有催化活性。通过优化pH、温度、底物与酶的配比、添加金属离子将转化率从16.0%提升至39.4%。【结论】灵芝UGE与植物来源的UGE酶学性质较为相似,其催化效率优于大部分细菌来源的UGE。本研究丰富了灵芝多糖糖供体合成途径重要酶的酶学特性信息,有利于深入了解灵芝多糖代谢合成途径。     

灵芝液态发酵胞内外多糖的研究进展

灵芝具有悠久的药用历史,其活性物质灵芝多糖具有广泛的药理活性,利用液态发酵技术获取灵芝多糖展现出独特优势。近年来,关于灵芝多糖液态发酵的研究报道越来越多,引起了研究者的广泛关注。本文从灵芝多糖的生物合成代谢及调控、液态发酵的培养基及工艺优化等方面对近期的研究结果进行总结,以期为灵芝液态发酵制备胞内外多糖及其产业化应用提供参考和依据。