101例肺炎死亡病例分析

目的：探讨成年肺炎死亡病例的特征,以提高救治率。方法：利用医院住院病案管理系统软件及人工收集我院2008年1月1日-2011年4月26日的全部成年肺炎死亡病例临床资料,共计101例,对其进行回顾性分析。结果：101例观察病例中男性共计71例（占70_30％）,女性共计30例（占29．70％）,大于65岁者共计95例（占94．06％）,44-58岁者共计6例（占5．9％）,平均年龄80．30岁。单侧肺部病变22例（占21．78％）,双侧肺部病变79例（占78．22％）,观察病例均伴有多种基础病及并发症,并且多数病例存在多种致病茵感染及多重耐药茵感染。结论：成年肺炎死亡的发生与患者年龄（65岁以上）、性别（男性）、双侧肺部病变、基础病及并发症、多种致病茵感染及多重耐药茵感染等因素密切相关。     

大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选

首次通过反转录-置换法和使用pUC18质粒成功构建大腹圆蛛（Araneus ventricosus)主壶腹腺（major ampullate gland)cDNA基因文库,并以鸟枪法从中筛选出具有典型重复结构的大腹圆蛛主壶腹丝蛋白cDNA基因AvF1,大小为1744bp,编码区为1572bp,编码氨基酸524个,分子量为42489.55Da,典型的重复结构为（GGP）nGGX。与现有已知的蛛丝蛋白基因中三带金蛛（Argiope trifas-ciata)鞭毛样丝基因（AtfF)有最高的同源性69.3%。大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库的构建和蛛丝蛋白新基因的克隆,为提供大腹圆蛛蛛丝蛋白基因背景和进一步研究蛛丝蛋白奠定了基础。     

标化消减杂交:提高差异表达cDNA筛选效率的新策略

在回顾分析了消减杂交技术改进历程的基础上,我们提出了“标化消碱杂交策略”,此策略的核心是“用标化cDNA制备消碱杂交反应的单链驱动子和单链示踪子,分离回收消减杂交后的单链示踪子用于制备差异表达cDNA库,并从标化cDNA库制备探讨来对差异表达cDNA库进行检测”将主要用于筛选与细胞特殊表型密切相关的（或与不同发育阶段等密切相关的）呈“全或无”差异形式表达的低丰度全长cDNA。此策略有望能较以往的消减杂交策略在降低假阳性背景、提高低丰度差异表达cDNA获得率、得到较长甚至全长差异表达cDNA等方面有较好表现,但尚待检验。     

从噬菌体显示程序中筛选抗响尾蛇毒素的组合抗体的特异性和结合亲和性

我们用 Pharmacia公司的重组噬菌体抗体系统的组合方法制出一种对响尾蛇毒素特异的、具有高亲和力的单克隆单链抗体可变区 (sc Fv)。筛选出一个高亲和力的克隆 ,编号为 A1 0 G,对其 DNA进行了测序。A1 0 G蛋白显示出高的反应特异性 ,只与响尾蛇神经毒素、concolor毒素和 Mojave毒素有密切的关系。用第二组磷脂酶 A2 s (PLA2 s)筛选 ,与 1 1种显示出交叉反应。第一组磷脂酶 A2 s (PLA2 s)在 ELISA中有交叉反应。编码A1 0 G的基因被亚克隆到一个表达载体 ,结果表达非融合蛋白 ,标记为 A1 0 GPE,复性、纯化至表面均一性。A1 0 G与完整响尾蛇毒素和响尾蛇毒素基本亚单位的解离常数分别为 7× 1 0 - 1 0 M和 6.8× 1 0 - 9M。当 A1 0 GPE与响尾蛇毒素基本亚单位或响尾蛇全毒素以摩尔比 5 :1预先孵育 ,则没有抑制磷脂酶活性现象。然而 ,表达蛋白可以在小鼠中部分中和响尾蛇毒素同系物 -Mojave毒素的致死率     

RGS蛋白在G蛋白信号转导中的作用与调节

RGS蛋白是近年来不断发现的新的蛋白家族,它们的结构中都包含一个高度保守的RGS结构域。目前从RGS结构域的结构及其同源性出发,对RGS蛋白与Gα亚单位及Gβγ二聚体的相互作用、RGS蛋白的调节活性及其动力学过程、RGS蛋白调节作用的分子机制及其生物学效应等进行了广泛探讨。研究发现,由于高度保守的RGS结构域的存在,几乎所有的RGS有GAP活性,并对G蛋白信号转导发挥负性调节作用。G蛋白信号转导是很多胞外信号引发细胞生理功能改变的共同途径,RGS蛋白的深入研究对于充分阐明该信号转导体系的构成及其调节机制具有深刻意义。     

人类免疫缺陷病毒1型耐药基因的监测

2001年12月在美国举行的第41届ICAAC年会上公布的研究结果显示,美国78％的成人人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者中存在着对一种或多种抗反转录病毒(ARV)药物耐药的病毒株。其中,对核苷类反转录酶抑制剂(NRTI)的耐药率最高,为……     

老年获得性肺炎病原菌及耐药分析

目的：了解老年人获得性肺炎的病原菌及耐药趋势。方法：对本院1999年6月－2001年6月两年间老年性获得性肺炎患者的痰标本进行细菌学分离鉴定及耐药分析。结果：老年院内感染以G杆菌为主67．19％,其次是真菌22．08及G^ 球菌10．73％。G杆菌中以大肠埃希菌（29．12％）,非发酵菌（24．88％）和肺炎克雷伯菌（20．19％）为主,在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,产超广谱β－内酰酶株（ESBLS）占49．52％,真菌中以白色假丝酵母菌（68．57％）为主;G^ 球菌中以凝固酶阴性葡萄球菌为主（87．88％）,耐苯唑西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）占63．64％。2000年6月－2001年6月所分离的细菌与上一年相比,真菌由15．43％增加到29．03％（P＜0．01）,G^＋细菌由6．17％增加到15．48％（P＜0．01）,G杆菌由78．4％下降到55．48％（P＜0．01）。所分离细菌除对亚胺培南,特治星（哌位西林／他唑巴坦）及万古霉素耐药率较低外,常用的抗生素显示较高的耐药率。结论：老年性获得性肺炎以G^- 杆菌为主,而真菌的感染也不容忽视;致病菌呈多重耐药趋势,其感染菌谱的变迁和多重耐药率的升高应该引起高度重视,合理应用抗生素应有法规制度。     

Rap信号在神经系统中的功能研究进展

小分子G蛋白Rap属于Ras家族,其结构类似于Ras,结合GTP后处于活性状态(RapGTP),结合GDP后则处于非活性状态(RapGDP)。在细胞内,Rap通过RapGTP与RapGDP之间的动态转换起到分子开关的作用,调控细胞增殖、分化、存活、粘附、迁移等生理过程。胞外信号通过特异性鸟嘌呤核苷酸交换因子(guanine nucleotide exchange factors,GEFs)调控Rap与GTP的结合,激活Rap;胞内特异性GTP酶激活蛋白(GTPase activating proteins,GAPs)促进GTP的水解,使Rap失活。活化的Rap信号通过其下游不同的信号分子调控不同的生物学功能。在神经系统中,Rap信号具有多样的生物学功能,Rap信号能促进神经元极性的建立和轴突生长,还能调节神经突生长。Rap信号能够调控神经突触结构和功能的可塑性变化。此外,也有研究报道Rap信号和神经元的迁移具有相关性。本文主要针对Rap信号在神经系统中的功能研究进展进行综述。     

miR-93通过靶定PTEN基因增加肝癌细胞对奥沙利铂的耐药性

微小RNA（miRNA）参与了肿瘤的耐药过程.本研究通过建立对奥沙利铂 (oxaliplatin,Oxa)耐药的肝癌细胞系BEL-7402/Oxa和Hep-3B/Oxa,利用miRNA芯片结合实时荧光定量PCR的方法,筛选得到数个参与肝癌细胞对奥沙利铂耐药的miRNA 分子,其中miR-93表达增加最为明显.MTT实验发现,增加肝癌细胞株中miR-93的表达可以增强其对奥沙利铂的耐药性.进一步结合生物信息学、荧光报告载体及免疫印迹实验,证实miR-93通过靶定抑癌基因PTEN增加肝癌细胞对奥沙利铂的耐药性.总之,肝癌耐药细胞系的建立及其miRNA差异表达谱的分析,以及miRNA分子对肝癌细胞发生奥沙利铂耐药的具体作用及其分子机制的研究,不仅有助于理解肝癌细胞发生耐药的分子机制,而且为探索克服肝癌对奥沙利铂耐药性的有效途径提供可靠依据.     

L-苹果酸产生菌筛选及高产突变株诱变选育

通过广泛收集和分离,获得根霉属(Rhizopus)、曲霉属(Aspergillus)及裂褶菌属(Schizophyllum)等属菌株897株。产酸指示平板上的变色圈测定结果表明,它们中间628株为产酸菌。通过纸层析对产酸菌发酵液酸谱的分析,获得129株L-苹果酸产生菌,经进一步测定发酵液中L-苹果酸的含量,筛选出以葡萄糖为原料,摇瓶发酵140小时,L-苹果酸产率48．37g／L,对糖转化率48．37×10^-2 的菌株LMO2。经初步鉴定,这一菌株为曲霉(Asper-gillus sp.)以LM02作为出发株,采用亚硝基胍、自然污染细菌、甲基磺酸乙酯及紫外线进行诱变处理,选育出葡萄糖为原料,L-苹果酸产率较高的突变抹N1-14、N1-14、NE1412、NU1416及NU1419。其中N1-14 的L-苹果酸产量最高,比出发株提高46．2×10^-2。N1-14 的菌丝生长速度快,产孢能力强,摇瓶发酵葡萄糖140小时,平均L-苹果酸产率为72．53g／L,对糖转化率53．74×10^-2。全发酵液经薄层层析测定,不含黄曲霉毒素。发酵产物分离提纯后,得到白色粉末状结晶,经纸层析、质谱及红外光谱测定,证明为L-苹果酸。