15个小苍兰品种的花粉形态研究

以15个小苍兰品种为试材,利用场发射扫描电镜（SET）对其进花粉形态观察,通过对花粉形状、大小、外壁纹饰及萌发器官等特征,分析不同品种间花粉形态之间的异同。结果表明：15个小苍兰品种的花粉均呈单粒存在且两侧对称,具远极单沟萌发孔,花粉外部形态均呈椭球形,极面观为舟形或心形,赤道面观除Castor外均为超长球形。花粉外壁纹饰均有小刺状凸起,多数品种表面有小穿孔和圆形斑纹。进一步聚类分析表明,15个小苍兰品种根据花粉形态特征可以分成3大类。本文首次报道了小苍兰的花粉形态,并且发现,不同品种间花粉形态特征具有一定差异,尤其是外壁纹饰细部特征和萌发器官的差别,体现了不同小苍兰品种间存在一定的遗传多样性和遗传分化,可为今后分析品种间亲缘关系及种质创新等提供有价值的科学依据。     

一种花生快速遗传转化方法的建立与应用

遗传转化是植物基因工程的重要手段。快速、高效地将目的基因导入植物细胞, 并缩短获得转基因后代的时间是遗传转化的关键。花生(Arachis hypogaea)是我国重要的油料及经济作物。目前花生的遗传转化体系尚未完善, 制约着花生的基因功能解析和分子育种进程。该文建立了一套快速、稳定的花生遗传转化体系。通过将农杆菌注射于花生第2茎节的切面获得转化植株, 再将阳性植株进行移栽和回土, 采摘注射点以上的荚果进行后续鉴定与分析。结果表明, 利用该方法可获得40%以上的T₀代嵌合体植株, 约5个月可收获T₀代花生种子, 其中约有9%的T₁代花生植株为非嵌合体的杂合体。针对部分转基因植株结实少的问题, 进一步提出了将快速转化体系与传统组培方法相结合的优化方案。构建的快速转化方法对大蒜(Allium sativum)、马铃薯(Solanum tuberosum)和香雪兰(Freesia refracta)的遗传转化具有潜在应用价值, 对其它植物的遗传转化也有重要参考价值。     

小苍兰试管球茎诱导及开花研究

小苍兰茎尖在含３．０ｍｇ／ＬＢＡ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基上,可诱导出许多侧芽。侧芽转移至０．５ｍｇ／ＬＩＢＡ＋０．５％活性炭的ＭＳ培养基,在１３＋２℃温度下培养１个月能诱导成小球茎。经电泳鉴定,试管球茎的可溶性蛋白质谱带与常规球茎的谱带完全相同。试管球移栽后约经７个月即可开花,其观赏性状完全稳定,花后成熟的大球达到商品球标准,可直接用于切花生产。     

利用正交设计优化小苍兰ISSR-PCR反应体系

通过L₁₆(4⁵)正交试验,研究了镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度这5个因素在4个水平上对ISSR-PCR的影响,建立了适合于小苍兰ISSR-PCR的反应体系。优化体系为：25 μL PCR反应体系中含有1×Taq酶缓冲液(10 mmol·L^-1 KCl,8 mmol·L^-1(NH₄)₂SO₄,10 mmol·L^-1 Tris·HCl,pH 9.0,0.05% NP-40),2 mmol·L^-1 MgCl₂,0.06 U·μL^-1 Taq酶,0.4 μmol·L^-1引物,4.0 ng·μL^-1模板DNA,dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.6 mmol·L^-1。利用温度梯度PCR,确定了最适宜的退火温度为51.5℃。该优化体系的建立为下一步对小苍兰进行ISSR分子标记奠定了基础。     

Volatile Compounds in the Flowers of Freesia Parental Species and Hybrids

For centuries, freesia has been one of the most important crops in the floriculture industry. Here, aqua-space samples collected from entire flowers of diploid Freesia refracta, three tetrapioid freesia cuitivars, and interspecific hybrids of three tetraploid freesia cultivars were analyzed using gas chromatograph coupled with mass selective detector, in all, 75 different compounds were identified. The compounds were mainly terpenes, hydrocarbons, alcohols, fatty acid esters and aromatic class compounds. Among these, iinalool was detected from all the sweet-scented flowers except for scentless white tetraploid F. hybrida. Stable inheritance of linalool between F. hybrida and their Ft progeny was observed. Based on the present analyses, the relationship between the aroma of freesia and iinalooi was discussed.     

6个香雪兰品种的染色体核型及聚类分析

以香雪兰（Freesia hybrida）6个品种的根尖为研究材料进行核型分析以揭示其核型特征,进一步通过聚类分析品种间的相似性并探讨可能的亲缘关系。结果表明：香雪兰6个品种均为四倍体,染色体数目都为44。6个品种的核型公式不同：‘Gold River’为2n=4x=44=33m+11sm,‘White River’为2n=4x=44=1M+34m+9sm,‘Castor’为2n=4x=44=35m+9sm,‘上农红台阁’为2n=4x=44=32m+12sm,‘Pink Passion’为2n=4x=44=38m+6sm,‘Red River’为2n=4x=44=37m+7sm。核型参数因品种而异,其中,‘Castor’在相对长度范围和臂比范围上均为最广,‘上农红台阁’核不对称系数最大。6个品种核型不对称系数为57.00%~60.07%,核型类型均为2B,进化程度中等,处于由对称至不对称的过渡阶段,其核型进化的趋势大致为：‘Pink Passion’→‘Red River’→‘Gold River’→‘White River’→‘Castor’→‘上农红台阁’。聚类结果显示,遗传距离为15时可将所有品种分为两类,第一类包含‘Gold River’‘上农红台阁’和‘Castor’; 第二类包含‘Pink Passion’‘Red River’和‘White River’,其核型参数的差异可作为香雪兰品种分类和鉴定的辅助依据,为其细胞学研究和育种实践提供理论参考。     

几种植物体细胞胚胎发生标记蛋白的研究

利用ＳＤＳ一聚丙烯酰胺凝胶电泳对西洋参（ＰａｎａｘｑｕｌｎｇｕｅｆｏｌｉｕｓＬ．）、香雪兰（Ｆｒｅｅｓｎｉｒｅ－ｆｒａＫｌａｔｔ．）、光棘豆（ＯｘｙｔｒｏｐｏｌｅｐｔｏｐｈｙｌｌａＬ．）和草木气（Ｍｅｄｌ’ｃａｇｏｓｕａａｖｅｏｌｅｎｓＬ．）４种植物的胚性、非胚性愈伤组织及胚状体的可溶性蛋白组成进行了分析。结果表明,在这几种植物的胚性愈伤组织中均存在非胚性愈伤组织中没有的特异蛋白质。在西洋参和光棘豆中,这些胚性蛋白质在胚状体中也能检测到。另外,在香雪兰和光棘豆的非胚性愈伤组织中还发现了胚性愈伤组织中没有的蛋白质成分。特异性的胚性蛋白质可以作为分子标记来鉴别潜在的胚性培养物,跟踪胚胎发育,并为进一步探讨体细胞胚胎发生的基因调控和分子机制提供基础。     

小苍兰花色色素成分及稳定性分析

以小苍兰(Freesia refracta)16个不同花色品种及后代为试验材料,对花瓣色素用特征显色反应和紫外-可见光谱扫描,分析其色素的成分和花色素苷的稳定性.结果表明,小苍兰花色的色素属于类黄酮化合物,含黄酮和花色素苷类物质,可能含有异黄酮,不含黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、查耳酮和橙酮,其中黄色系品种及后代还含有类胡萝卜素.避光下小苍兰花色素苷的稳定性要强于光照;温度对花瓣色素的稳定性有一定的影响.     

香雪兰花瓣的花色苷组成

为研究不同品种香雪兰的花色苷组成、含量及与花色表型之间的关系,阐明香雪兰花色形成机理,该研究以不同花色的香雪兰(Freesia hybrida) 11个品种为材料,采用英国皇家园艺学会比色卡(RHSCC)和色差仪进行花色描述,利用特征颜色反应初步确定色素类型,通过pH示差法测定花瓣中总花色苷的含量,进而利用UPLC-Q-TOF-MS技术分析各品种花瓣中花色苷种类和相对含量。结果表明:11个所选品种涵盖香雪兰四大色系,即白色系、黄色系、红色系、蓝紫色系;所选品种都含有黄酮类化合物,不含或含有极低量的类胡萝卜素,除‘White River’‘Fragrant Sunburst’‘Gold River’‘Tweety’外,均含有花色苷;‘Red Passion’花瓣中总花色苷含量最高,最低是‘Lovely Lavender’,其含量仅为‘Red Passion’的24%;在香雪兰花瓣中共检测出10个花色苷组分,分别为飞燕草-二葡萄糖苷、矢车菊素-二葡萄糖苷、矮牵牛素-二葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、芍药素-二葡萄糖苷、锦葵素-二葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-...     

单克隆抗体对小苍兰褪绿条纹花叶病毒及其决定簇的作用特性

采用杂交瘤技术,得到抗小苍兰褪绿色条纹花叶病毒（FCSMV）六个单克隆抗体P3、4A4,6B、,7A6,7D1和7DS。ELISA效价分别为1：1062－1：10^6。7A6攻7D1属于IgG1亚类,7D8和4A4分属IgG2a和IgG2b亚类,P3和6B1属于IgG2亚类。电镜观察单克隆抗体与病毒形成的复合物发现7D1能使病毒粒子发生严重裂断。6株单克隆抗体中P3,4A4、6B1对应于病毒外壳蛋白上的顺序决定簇。纯化的病毒外壳蛋白经酶裂解和改进的盘状电泳分离,得到八段与多克隆抗体反应的收集液。用顺序决定族的单克隆抗体检出P3对应的肽段22和4A4对应的肽段78。本文还讨论了7D1使病毒粒子发生断裂的原因和与病毒粒子表面结构的关系以及分离抗原决定族所在片段的意义。