新疆准噶尔盆地北缘晚渐新世睡鼠再研究（英文）

周氏似日本睡鼠Gliruloides zhoui是发现于新疆准噶尔盆地北缘晚渐新世铁尔斯哈巴合哺乳动物组合I带的一个化石新属种。新属似日本睡鼠Gliruloides的属征为:中等大小;颊齿咀嚼面凹;上、下颊齿通常具9条主要横脊,有时具次级附脊;上颊齿的前边附脊和后边附脊以及下颊齿的下前边附脊和下后边附脊都很发育,几乎占据了其所在齿谷的整个长度。上颊齿的横脊唇端趋于游离。M1和M2具V形或窄U形三角座,内脊不完整或近于完整,前中央脊不与内脊相连。下颊齿的下内脊通常不连续;下臼齿的下前边脊在唇端稍向后弯,但不与原尖相连。p4,m1-m3,P4,M1-M3的齿根数分别为2,2,3,3。新属与Glirulus在形态上相似,但Glirulus的上颊齿的三角座均为宽U型,具有完整的内脊,前中央脊通常与内脊相交,横脊唇端通常不游离。新属与Vasseuromys属的最主要形态差异在于上颊齿具有很发育的前边附脊和后边附脊,而后者上颊齿的前边附脊和后边附脊通常缺失或很不发育。归入该属的种还有土耳其早中新世的Vasseuromys duplex和Vasseuromys aff.V.duplex。土耳其Thrace早渐新世的Glis guerbuezi很可能是Gliruloides和Glirulus的共同祖先类型。Gliruloides可能生活于温湿的生态环境。     

ROCKⅠ／Ⅱ基因下调对血管平滑肌细胞迁移及增殖的影响

目的：探讨ROCK亚型ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞（A7r5）迁移及增殖的影响。方法：利用Western blot技术检测ROCKⅠ和ROCKⅡ蛋白在A7r5细胞中的表达水平;利用siRNA技术使ROCKⅠ和ROCKⅡ基因表达分别下调,并检测基因下调后蛋白表达水平;利用Boyden小室法,观察ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后及ROCK特异抑制剂Y-27632对PDGF诱导的A7r5细胞迁移的影响;使用MTT法检测ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响。结果：ROCKⅠ和ROCKⅡ在A7r5细胞中的蛋白表达水平不同,ROCKⅡ较ROCKⅠ的表达水平高4倍;通过对A7r5细胞进行ROCKⅠ和ROCKⅡsiRNA转染,使二者蛋白表达水平分别下调83.4％和94.7％;基因表达下调后,ROCKⅠ明显抑制了PDGF诱导的A7r5细胞的迁移,而ROCKⅡ无明显影响,Y-27632也抑制了A7r5细胞的迁移;ROCKⅠ和ROCKⅡ基因下调后对A7r5细胞生长曲线的影响无明显差别。结论：ROCKⅠ在血管平滑肌细胞迁移过程中起主导作用,ROCKⅠ和ROCKⅡ对血管平滑肌细胞的增殖作用无明显差异。     

行政干预对Ⅰ类切口围术期预防性使用抗菌药物的影响

目的:探讨行政干预对I类切口围术期预防性使用抗菌药物的影响。方法:2011年4月～6月对全院手术科室进行行政干预,具体做法:卫生行政部门与医院一把手、医院与手术科室主任、科室主任与科室执业医生分别签订目标责任状;医院配合全国抗菌药物临床应用专项整治活动方案进行全员培训,并对医师进行抗菌药物临床应用培训并考核合格后,授予其相应级别的抗菌药物处方权,明确各级医师使用抗菌药物的处方权限;由医务科牵头与院感染科、药剂科、质控科联合对I类切口手术患者预防使用抗菌药物情况进行检查,定期实施目标奖罚,责任到科室主任和临床医生。然后抽取我院2010年7月～12月(行政干预前)和2011年7月～12月(行政干预后)I类切口手术病历各210份,参考《抗菌药物临床应用指导原则》、卫办医政发[2009]38号通知对420例I类切口手术患者预防使用抗菌药物情况进行回顾性分析。结果:行政干预前(2010年7月～12月)I类切口围手术期预防性抗菌药物的使用率达83.81%(176/210),术后抗菌药物使用时间在2～7天者占69.52%,大于7天者占6.67%;行政干预后(2011年7月～12月)210例患者预防使用抗菌药物使用率为30%(63/210),显著低于未使用行政干预的Ⅰ类切口术患者(P<0.05),围术期术后抗菌药物使用时间在2～7天者占16.67%,没有1例患者用药超过7天,抗菌药物的使用时间较未使用行政干预的Ⅰ类切口术患者显著缩短(P<0.05)。结论:有效的行政干预可以强化临床医生合理应用抗菌药物的意识,提高合理用药的水平,明显降低I类切口预防性抗菌药物的使用率,缩短抗菌药物的使用疗程。     

GABA介导杏仁外侧核对皮层A Ⅰ区神经元声反应的抑制:在体微电泳研究

在SD大鼠上应用多顺利完成微电极方法,观察微电泳CABA及其受体的拮抗剂或激动剂对杏仁外侧核（LA）抑制皮层AⅠ神经元声反应效应的影响。结果显示,电泳GABA能抑制皮层AⅠ区神经元的电活动,电泳GABAA受体拮抗剂bicuculline（BIC）则能易化其反应;电刺激LA能抑制皮层AⅠ区听神经元声反应,电泳GABA产生类拟于刺激LA的抑制效应;LA对皮层AⅠ区神经的抑制效应能被BIC所翻转,而不能被什氨酸受体拮抗剂strychnine所翻转,电泳GABAB型受体例激动剂baclofen对神经元声反应无影响。上术结果表明,GABA可能是介民LA抑制皮层AⅠ区神经元声反应的最终递质,并且是通过GABAA受体作用的。     

Genome Characteristics of the Cyclophragma Undans Nucleopolyhedrovirus: A Distinct Species in Group I of <Emphasis Type="Italic">Alphabaculovirus</Emphasis>

The Cyclophragma undans nucleopolyhedrovirus (CyunNPV), a potential pest control agent, was isolated from Cyclophragma undans (Lepidoptera: Lasiocampidae), an important forest pest. In the present study, we performed detailed genome analysis of CyunNPV and compared its genome to those of other Group I alphabaculoviruses. Sequencing of the CyunNPV genome using the Roche 454 sequencing system generated 142,900 bp with a G+C content of 45%. Genome analysis predicted a total of 147 hypothetical open reading frames (ORFs) comprising 38 baculoviral core genes, 24 lepidopteran baculovirus conserved genes, nine Group I Alphabaculovirus conserved genes, 71 common genes, and five genes that are unique to CyunNPV. In addition, the genome contained 13 homologous repeated sequences (hrs). Phylogenic analysis grouped CyunNPV under a distinct branch within clade "a" of Group I in the genus Alphabaculovirus. Unlike other members of Group I, CyunNPV harbors only nine of the 11 genes previously determined to be specific to Group I viruses. Furthermore, the CyunNPV lacks the tyrosine phosphatase gene and the ac30 gene. The CyunNPV F-like protein contains two insertions of continuous polar amino acids, one at the conventional fusion peptide and a second insertion at the pre-transmembrane domain. The insertions are likely to affect the fusion function and suggest an evolutionary process that led to inactivation of the F-like protein. The above findings implied that CyunNPV is a distinct species under Group I Alphabaculovirus.     

无色杆菌蛋白酶Ⅰ突变体的结构与稳定性研究

报道了用定住诱变技术,改变无色杆菌蛋白酶Ⅰ的酶原加工位点,使其向左或向右移动,导致突变体成熟酶的肽链从N端延长或缩短若干氨基酸残基．所获突变体显示了低于野生酶的活性．突变体的园二色谱和荧光光谱研究表明,它们的结构发生了某些微小的改变．在不同的pH值、温度和不同浓度的SDS和盐酸胍条件下,也表现了低于天然酶的稳定性．在N端延长的突变体中,酶原加工位点越远离天然加工位点的突变体,显示了越低的活性和稳定性．缩短的突变体活性和稳定性最低．这些结果表明,天然成熟酶的N端可能比较靠近酶的活性中心,并参与构成活性中心附近的局部构象由此可见N端区在成熟酶的结构与功能方面的重要作用．     

The Possible Mechanism of Photoinhibition of Purified PSI Complexes

The protecting effect of histidine on the photodamage of pigments and proteins of the isolated PSⅠ particles from the chloroplast of Spinacia oleracea L. during the strong illumination (2 300 μmol·m-2·s-1) was studied by spectroscopy and SDS-PAGE. The absorbance of PSⅠ particles decreased during the strong illumination treatment, but the decrease would be slowed down in the presence of externally added histidine after 30 min illumination. The decrease of CD （circular dichroism）signal intensities of PSⅠ particles also was slowed down by the added histidine after about 10 min illumination. The retarded protecting effect of the added histidine on the photobleaching of pigments of PSⅠ complexes implied that the mechanisms of photoinhibition of isolated PSⅠ complexes are different from early stage to later stage during the strong illumination treatment. In addition, the added histidine suppressed the decrease of 77 K fluorescence yield of PSⅠ particles during the illumination. SDS-PAGE showed that the added histidine not only protected the reaction center proteins of PSⅠ particles, but also protected other subunits of PSⅠ particles from degradation.     

Comparative Study on Interaction of DNaseⅠ with Pollen Actin and Rabbit Muscle Actin

Actin purified from maize pollen grains like actin from other sources could considerably inhibit the activity of DNase Ⅰ . A linear relationship existed between inhibition and the concentration of actin. However, DNase Ⅰ was less inhibited by pollen actin than by rabbit muscle actin under the same conditions. The values of Kapp of inhibition were 1.25 μg/mL for pollen actin and 0.75 μg/mL for rabbit muscle actin. DNase Ⅰdepolymerized both pollen and rabbit muscle actin filaments. But the rate of depolymerization of pollen F-actin was higher than that of rabbit muscle F-actin under the same conditions.     

β2糖蛋白Ⅰ第五结构域及其突变体、短肽片段的原核表达及活性分析

β2糖蛋白Ⅰ(beta 2-glycoproteinⅠ,β2GPⅠ)是抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)血清中抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,a PL)的主要抗原。β2GPⅠ通过第五结构域与阴性磷脂ox LDL结合,进而被a PL识别,是APS动脉血栓发生的关键事件。该研究构建了编码β2GPⅠ第五结构域(β2GPⅠ-DⅤ)、β2GPⅠ-DⅤ突变体及β2GPⅠ-DⅤ的Phe280-Ala320片段的原核表达载体,对其进行诱导表达和纯化,解析了β2GPⅠ-DⅤ与阴性磷脂结合的分子机制,结果表明,β2GPⅠ-DⅤ中Cys281-Cys288以及Ser311-Lys317区段在空间上维持一定构型是与CL结合所必须的前提条件,而C245-C296,C288-C326两个二硫键在维持二者空间构型方面起到一定的作用。在此基础上,进一步检测了具有结合CL生物学活性的r DⅤ结合ox LDL以及APS血清中ox LDL的活性,表明r DⅤ具有与天然β2GPⅠ相一致的生物学活性。该研究获得的rβ2GPⅠ-DⅤ,以及与ox LDL结合的方法体系的建立,为APS早期实验室诊断奠定基础。     

两种等位基因特异性扩增方法在结肠癌K-ras癌基因点突变检测中的应用比较

针对传统电泳检测方法存在操作复杂、费时等缺点,提出一种用于检测K-ras癌基因点突变的实时荧光等位基因特异性扩增（Allele specific amplification,ASA）方法。该法采用突变型引物对结肠癌基因组中的K-ras基因进行等位基因特异性扩增,只有突变型样品能被顺利扩增出双链DNA产物,该产物能与双链DNA染料SYBR GreenⅠ结合,产生荧光信号从而被检测到。通过对荧光域值和溶解曲线分析来区分不同的基因突变类型。该法可以检测到野生型DNA中含量为1/1 000的突变型DNA,整个检测时间小于1 h。我们用该法检测31例结肠癌样品中K-ras基因密码子12发生的点突变,其中有15例检出为阳性。此外,还采用等位基因特异性扩增结合电泳分析对样品进行了检测,并对两种方法进行了比较。结果显示：实时荧光等位基因特异性扩增方法具有操作简便、快速、检测成本低等优点,为临床诊断基因突变引起的疾病提供了一种可行的手段。