微波在肾小球基底膜PASM染色方法中的应用改进

临床诊断肾小球疾病中,经皮肾穿刺活检(肾穿刺)是重要的检查方法之一,对于肾脏疾病的正确诊断和分类起到很重要的作用,实际应用中,除做免疫荧光抗体外,用特殊染色Gomori六胺银(PASM)方法来显示肾基底膜的改变。在光镜下用HE染色难以观察肾血管球基底膜的改变,如基底膜增厚、“钉突”、“双轨”等改变。通过PASM染色能观察到以上改变。按常规的PASM染色法较复杂,染色过程比较费时,温度和时间较难控制。为了克服这一缺点,我们利用微波炉染色取得了较好的效果,现方法介绍如下。材料和方法1·标本与切片标本来自广州军区广州总医院肾穿刺…     

Kleihauer抗酸染色法标记母血中的胎儿有核红细胞

以18例孕7~25周的孕妇外周血为材料, 经Percoll不连续密度梯度离心初步富集胎儿有核红细胞。然后用Kleihauer抗酸染色法进行标记, 结果阳性胎儿有核红细胞的胞浆呈深红色, 而母亲的有核红细胞胞浆无色。显微操作法获取单个胎儿有核红细胞, 经全基因组扩增后, 产物进行性别鉴定及STR连锁分析检测, 验证有核红细胞的来源, 并完成9例杜氏肌营养不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)的无创性产前基因诊断。应用Kleihauer抗酸染色法标记胎儿有核红细胞, 它是一种快速、简单、直接的化学染色方法, 更易于推广到临床应用。     

徐闻珊瑚礁自然保护区可培养富脂海洋微藻的生物多样性

从徐闻珊瑚礁自然保护区(20°10′–20°27′N, 109°50′–109°24′E)潮间带采集海水和泥沙样品, 用f/2-medium 培养液富集培养其中的海洋微藻, 采用基于96 孔板的“稀释分配”结合“微吸管剔除”的方法分离培养海洋微藻, 采用微藻形态学观察、18S rDNA 序列分析及其系统进化树构建的方法分析鉴定分离培养的藻株, 采用尼罗红染色法检测和分析海洋微藻细胞中的脂质。目的就是要分析研究徐闻珊瑚礁自然保护区潮间带可培养富脂海洋微藻的生物多样性, 为富脂海洋微藻的研究开发奠定基础。结果分离、培养、鉴定并储藏了118 株海洋微藻(Genbank 登录号为KU561102 ~ KU561219),含48 个种, 分布于硅藻门(Bacillariophyta)、绿藻门(Chlorophyta)和定鞭金藻门(Haptophyta) 3 个门的6 纲、22 目、24 个科、28 个属。其中, 有37 株为富脂微藻, 含22 个种, 分布于硅藻门和绿藻门2 个门的4 纲、11 目、12 个科、16 个属; 优势属为双眉藻属(Amphora), 含22 株,占分离培养藻株的18.6%; 含脂量最高的种群为辐节藻属(Stauroneis), 含Stauroneis anceps, Stauroneis gracilior, 和2 株Stauroneis kriegeri, 共4 株海洋微藻。这表明徐闻珊瑚礁自然保护区潮间带可培养的富脂海洋微藻的物种丰富多样, 可能是发掘多不饱和脂肪酸和生物柴油的理想资源。     

改良Pereira髓过氧化物酶快速染色法及应用

目的　为了使髓过氧化物酶 (MPO)染色快速准确、安全可靠 ,对Pereira碘化钾MPO染色方法做了进一步改进。方法　采用将碘化钾溶于Wright Giemsa染色液中的新配方 ,使试剂更稳定、保存时间长 ,并简化了操作、缩短了染色时间。结果　此法与Washburn联苯胺法比较 ,两者阳性率十分相近 ,差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论　改良Pereira髓过氧化物酶法阳性反应标本存放多年不褪色 ,是目前众多碘化钾法中较理想的MPO染色方法之一。     

一种新的核仁组成区胶银染色技术

核仁组成区(Nucleolar OrganizerRegions,NORs)是位于细胞核仁内的DNA 环,具有 rRNA 基因,与 rRNA 的转录活性有关、在蛋白质合成中起重要的作用。遗传学家曾利用银染技术显示染色体核仁组成区来研究各种遗传缺陷性疾病。1986年 Ploton 建立丁一科改良的一步法胶银染色技术显示核仁组成区相关蛋白(Nucleoar Organizer Region Associa-ted Protein,AgNORs),虽然现在对这些蛋白染色的性质还不清楚,但该技术提供了一种快速检测核仁结构和活性改变的有效手段,已受到病理学界的高度重视,     

细菌性阴道病与线索细胞相关性的探讨

目的了解细菌性阴道病(BacterialVaginosis,BV)与线索细胞(Cluecell)的相关性。方法采用细胞学涂片多项快速染色法,对1574例惠州市人民医院临床诊断为细菌性阴道病的患者分泌物涂片和465例正常对照的分泌物涂片,进行线索细胞的检查。结果患病组线索细胞检出率(78.7%)明显高于对照组(7.35%),P<0.01。1574例中,有278例(17.7%)合并霉菌感染;54例(3.4%)合并纤毛菌感染;3例(0.2%)合并霉菌及滴虫感染。结论线索细胞与细菌性阴道病之间有密切的联系,线索细胞是细菌性阴道病致病的主要原因。     

利用改进的荧光染色法对宫颈涂片脱落细胞学诊断的探讨

吖啶橙（ａｃｒｉｄｉｎｅｏｒａｎｇｅ,简称ＡＯ）荧光染色法能显示细胞和病原微生物的形态结构及微生物的大小和分布,又能观察细胞内两种核酸（ＤＮＡ和ＲＮＡ）的含量变化,从而可以清楚地了解细胞的增生状态。根据细胞的形态学和细胞化学两方面的变化进行脱落细胞学观察,有利于较早期地发现癌细胞。本文应甩改进的ＡＯ荧光染色法对２０Ｄ００例宫颈涂片进行了脱落细胞学诊断,并对天津市各种妇科疾病所占的百分率进行了统计。该染色法染色结果稳定可靠、速度快、图象鲜明。     

检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的3种染色方法比较

用考马斯亮蓝染色、银染色、铜染色等 3种方法对同一种蛋白质染色的灵敏度、快速性进行比较 ,得出 3种蛋白质染色方法的优缺点 ,为蛋白质电泳染色合理选用不同方法提供依据     

一种快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌活菌率的方法

目的研究"美蓝-(碱性)藏红O"双染色法用于快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌(group A Neisseria meningitidis,以下简称A群脑膜炎球菌)活菌率的可行性。方法制备A群脑膜炎球菌悬液,取菌悬液双染色法染色,用光学显微镜观察,计算活菌率。将菌悬液进行10倍系列稀释,各菌液分别用平板涂布法接种至10%羊血普通琼脂平皿,于CO2环境下、35~37℃培养12~20 h,计算菌悬液活菌率。比较两种方法测定8批A群脑膜炎球菌所测得的活菌率,并进行相关性和线性回归分析。结果 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法与平板涂布法所测得的活菌率结果差异无统计学意义(P>0.05);两种方法所测得的活菌率具有显著的直线回归关系(P<0.01,n=8),相关系数r=0.984,其回归方程为y=0.919x+1.661(R2=0.967)。结论 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法检测时间短、判定结果直观、操作简单、计数结果准确,可用于A群脑膜炎球菌活菌率的快速测定。     

大鼠垂体远侧部内分泌细胞的四重免疫组织化学染色方法

本文介绍一种显示大鼠垂体远侧部内分泌细胞的四重免疫组织化学染色方法。此法以PAP 法为基础,结合 DAB 银加强法和间接免疫金标记技术。方法比较简单,所需试剂容易得到。