免疫酶染色法对羊肚菌菌丝特异性靶位的初步定位与分析

为了解羊肚菌(Morchella esculenta)菌丝抗原物质的识别特征及其在菌丝上的分布,利用免疫酶染色法(Immunoenzyme assay,IEA)对两株抗羊肚菌单克隆抗体(W8C9,C6A8)在羊肚菌菌丝上对应的特异性结合靶点进行定位研究。初步确定了两株单克隆抗体对应的羊肚菌菌丝抗原在菌丝上的位置,并确定了W8C9、C6A8和兔多克隆抗体稀释后适合工作的体积分数分别为5.0%、4.5%、4.0%。     

微波在肾小球基底膜PASM染色方法中的应用改进

临床诊断肾小球疾病中,经皮肾穿刺活检(肾穿刺)是重要的检查方法之一,对于肾脏疾病的正确诊断和分类起到很重要的作用,实际应用中,除做免疫荧光抗体外,用特殊染色Gomori六胺银(PASM)方法来显示肾基底膜的改变。在光镜下用HE染色难以观察肾血管球基底膜的改变,如基底膜增厚、“钉突”、“双轨”等改变。通过PASM染色能观察到以上改变。按常规的PASM染色法较复杂,染色过程比较费时,温度和时间较难控制。为了克服这一缺点,我们利用微波炉染色取得了较好的效果,现方法介绍如下。材料和方法1·标本与切片标本来自广州军区广州总医院肾穿刺…     

荧光染色法与KOH法在皮肤真菌检查中的效果比较

目的探讨真菌荧光法在皮肤浅部真菌筛查的敏感性。方法收集皮肤科门诊疑似真菌感染的患者标本,同时用KOH湿片法和真菌荧光染色法进行检测,并对检验结果进行对比。结果 1 209例患者中真菌荧光染色法阳性的阳性率为42.76%,KOH湿片法的阳性率为24.81%,结果差异有统计学意义(χ^2=87.094,P<0.05)。荧光染色法和KOH法在患者不同部位的阳性率:头面部为55.59%、7.90%,体股部为46.93%、30.06%,手足部为27.37%、26.25%,外阴部为31.85%、14.07%,指甲(趾甲)部为51.64%、48.36%;在不同疾病中的阳性率:马拉色毛囊炎为77.00%、8.50%,手足癣为48.04%、46.08%,体癣为50.31%、33.44%,甲癣为51.64%、48.36%,花斑癣为66.67%、48.00%,湿疹为10.24%、5.42%,皮炎为48.11%、9.43%。结论荧光染色法是一种简单、快速、准确的真菌镜检方法,值得在临床上推广使用。其总体的阳性率比KOH湿片法高,毛囊虫、疥疮等真菌荧光染色法在镜下更容易辨认。头面部、外阴等油脂分泌旺盛的部位以及马拉色毛囊炎、湿疹和皮炎等疾病推荐使用荧光染色法来排除是否有真菌的感染。     

曼地亚红豆杉‘Hicksii’花粉活力检测条件优化和适宜诸藏温度分析

采用单因素实验设计对适宜于曼地亚红豆杉‘Hicksii’(Taxus media‘Hicksii')花粉活力检测的TTC染色法和离体培养法的实验条件进行了选择,并采用优化条件研究了在25℃～-196℃条件下储藏13周花粉活力的变化.结果表明:采用TTC染色法测定的花粉活力均高于离体培养法.在TTC染色法的3个影响因素(染液pH、TTC浓度和染色温度)中,染液pH对检测结果有极显著影响,而染色温度和TTC浓度则无显著影响,但温度对染色速率有影响.在离体培养法的3个影响因素(培养基中蔗糖添加量、H3BO3和Ca(NO3)2浓度及培养温度)中,蔗糖添加量对检测结果有极显著影响,在含质量体积分数15％蔗糖的培养基上花粉活力最高,而在含质量体积分数20％和25％蔗糖的培养基上花粉均不能萌发;在含100和200 mg ·L-1H3BO3的培养基中添加200 mg·L-1Ca(NO3)2均能显著提高花粉活力;培养温度对花粉萌发速率有影响但对花粉活力没有明显影响.TTC染色法的最优检测条件为:用5.0g·L-1TTC染液(pH 7.0)在35℃下染色2.0h;离体培养法的最优检测条件为:用含质量体积分数15％蔗糖、100 mg·L-1H3BO3和200 mg·L-1Ca(NO3)2的培养基暗培养4d.在25℃、4℃、0℃、-20℃、-80℃和-196℃条件下储藏13周,‘Hicksii'花粉活力和保持时间有明显差异,其中,于-80℃和-196℃储藏3d 花粉就丧失活力;于25℃和-20℃储藏7周、4 ℃储藏10周,花粉仍有一定的活力;而在0℃条件下花粉活力最高,且储藏11周花粉仍有活力.推测曼地亚红豆杉‘Hicksii’花粉对低温的抗性较差,0℃为其适宜的储藏温度.     

In vitro cultivation and differentiation of fetal liver stem cells from mice

During embryonic development, pluripotent endoderm tissue in the developing foregut may adopt pancreatic fate or hepatic fate depending on the activation of key developmental regulators. Transdifferentiation occurs between hepatocytes and pancreatic cells under specific conditions. Hepatocytes and pancreatic cells have the common endodermal progenitor cells. In this study we isolated hepatic stem/progenitor cells from embryonic day (ED) 12-14 Kun-Ming mice with fluorescence-activated cell sorting (FACS). The cells were cultured under specific conditions. The cultured cells deploy dithizone staining and immunocytochemical staining at the 15th, 30th and 40th day after isolation. The results indicated the presence of insulin-producing cells. When the insulin-producing cells were transplanted into alloxaninduced diabetic mice, the nonfasting blood glucose level was reduced. These results suggested that fetal liver stem/progenitor cells could be converted into insulin-producing cells under specific culture conditions. Fetal liver stem/progenitor cells could become the potential source of insulin-producing cells for successful cell transplantation therapy strategies of diabetes.     

乙醇对超氧化物歧化酶活性邻联〔二〕茴香胺染色法的影响

超氧化物歧化酶(SOD)活性染色法有硝基四氮唑蓝染色法(又称负染法)和邻联[二]茴香胺染色法(又称正染法)两种,后者是由 Misra 在邻联[二]茴香胺 SOD 活力测定法的基础上建立的。虽然该法具有许多优点,但是普遍认为其染色效果较难掌握,故应用不及负染法广泛,迄今我们仅见一篇应用报道。通     

实验动物全心脏组织制片法和联合染色技术的应用

实验动物全心脏组织制片法和联合染色技术的应用凡平,詹洲,龚志锦（第二军医大学长海医院心血管内科,上海２００４３３）（第二军医大学病理解剖学教研室,上海２００４３３）由于科研工作的需要,我们对动物全心脏组织进行了整体切片,按照动物模型的设计,对肌纤维,...     

一种快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌活菌率的方法

目的研究"美蓝-(碱性)藏红O"双染色法用于快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌(group A Neisseria meningitidis,以下简称A群脑膜炎球菌)活菌率的可行性。方法制备A群脑膜炎球菌悬液,取菌悬液双染色法染色,用光学显微镜观察,计算活菌率。将菌悬液进行10倍系列稀释,各菌液分别用平板涂布法接种至10%羊血普通琼脂平皿,于CO2环境下、35~37℃培养12~20 h,计算菌悬液活菌率。比较两种方法测定8批A群脑膜炎球菌所测得的活菌率,并进行相关性和线性回归分析。结果 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法与平板涂布法所测得的活菌率结果差异无统计学意义(P>0.05);两种方法所测得的活菌率具有显著的直线回归关系(P<0.01,n=8),相关系数r=0.984,其回归方程为y=0.919x+1.661(R2=0.967)。结论 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法检测时间短、判定结果直观、操作简单、计数结果准确,可用于A群脑膜炎球菌活菌率的快速测定。     

结晶紫染色法显示弹力纤维的应用

病理诊断常用 Comori醛复红 ,Weigert来复红 ,Verhochff法 Unna地衣红对弹力纤维[1] 进行特殊染色来观察显示皮肤、肺、血管组织中弹力纤维的增生、变性、散乱、断裂 ,其染色结果可呈紫色、兰黑色、褐色 ,但复染苏木素定位胞核和 VG显示胶原纤维染色后 ,对比不鲜明 ,经尝试用结晶紫改良 Weigert染色法后 ,弹力纤维呈绿色 ,胶原纤维红色 ,肌肉组织及背景黄色 ,对比鲜明 ,色彩艳丽、清晰 ,收到了理想效果。材料和方法1 .材料1 .1　标本来源 :本室活检和尸检正常或病变的心肌、皮肤、肺组织 ,经福尔马林固定 ,常规石蜡切片 5 μm。1 .2　染…