体外培养的人脐动脉平滑肌细胞可自发成骨细胞分化并钙化

研究脐动脉来源的平滑肌细胞在体外培养时是否会自发成骨细胞分化,以深入了解该细胞的生物学特点.采用MTT法研究了脐动脉平滑肌细胞的生长曲线:用形态学方法观察了脐动脉平滑肌细胞自发细胞结节的形成过程;用Hoechst 33258染色法及TUNEL染色法研究了细胞结节中的凋亡现象;采用免疫组化染色法研究了细胞结节中碱性磷酸酶的表达.采用茜素红S染色及透射电镜研究了脐动脉平滑肌细胞的自发钙化.研究发现,体外培养的脐动脉平滑肌细胞传代后约7天细胞即可汇合,汇合后的细胞表现为典型的"峰、谷"样生长状态,随着培养时间的延长.在"峰"形生长区域,细胞聚集生长,自发形成细胞结节,经4-5周培养,细胞结节不断增大并钙化,免疫组化发现结节中有大量碱性磷酸酶表达.同时,在结节形成过程中伴随有大量平滑肌细胞凋亡.我们的研究表明,体外培养的脐动脉来源的平滑肌细胞同主动脉来源的平滑肌细胞一样可以自发成骨细胞分化.而平滑肌细胞凋亡可能参与了该过程.     

神经细胞尼氏体和神经髓鞘的双重组合染色法与应用

探讨了显示实验动物脊髓组织中的神经尼氏体和神经髓鞘等组织成分的双重组合染色法,通过分别选用孔雀石绿(Malachite green)和橙黄G、磷钨酸(Orange G,Phosphotungstic acid)组合染色(简称MG-OP法)。已能够显示狗脊髓神经尼氏体呈绿色,细胞核呈黄色。神经纤维髓鞘轴突呈黄色,神经膜和结缔组织纤维呈绿色,背景呈淡黄色。MG-OP法克服了原法成分单一,色彩效果差,所建立的双重组合染色法,对比清晰,色彩鲜艳,方法简便的较好染色方法。     

Hansson染色法检测小鼠附睾上皮细胞碳酸酐酶的活性

碳酸酐酶（Carbonic Anhydrase,CA）是一种含锌的金属酶,可参与体内CO2和离子转运以及调节酸碱平衡。本文以改良的Hansson法检测CA在雄性小鼠附睾管上皮细胞的分布,为深入研究CA表达及功能提供可行的形态学技术方法。迅速分离ICR雄性小鼠附睾,制成厚度为5μm的冰冻切片。     

血涂片制作的几点体会

制作方法：血涂片Wright’s染色法。①采血、制血膜、水平放置血膜片晾干。②血膜片固定于甲醇2-3min,取出晾干。③用蜡笔在血膜片两端划一染色区,避免染色时染液外溢。④往血膜片滴加瑞氏染液（瑞氏染料0．1g＋甲醇60ml）,数十秒钟后,再加一倍于染液的蒸馏水,染色5-8min。     

显示AgNOR的改良染色效应在实验动物肿瘤中的应用

本文报道的ＡｇＮＯＲ组化反应，是我们经过反复实验，得新建立的染色逍度，染色时间和温度的系列程序，其结果表明不所显示ＡｇＮＯＲ成分的对比清晰度较强，而适用于实验动物肿瘤组织的形态学观察，图象分析系统的定量研究和诊断的价值。     

小肠腺三色染色法

我们采用三色染色的方法对小肠肠腺细胞进行染色,杯状细胞、潘氏细胞、胞质和肠腺基膜呈现三种不同的颜色。细胞形态清晰,对比鲜艳,收到了理想效果。材料和方法1·材料人小肠为手术切除新鲜标本。10%甲醛固定24-48h,常规脱水,石蜡包埋。2·方法石蜡切片厚4-6μm,切片脱蜡,蒸馏水洗2m in,复合染液染3-5m in,70%乙醇分色,蒸馏水洗1m in,阿利新蓝染5m in,蒸馏水轻洗;0·2%光绿复染胞质、肠腺基膜20s;70%盐酸乙醇分色;梯度乙醇脱水;二甲苯透明;中性树胶封固。3·染液配制(1)复合染液:1%伊红(1g伊红,70%乙醇100m l)40m l,2%偶氮桃红(2g偶氮桃红甲…     

一种改良的肌细胞骨架染色方法

为了观察肌细胞骨架,对传统考马斯亮蓝染色法进行改良,并与免疫荧光染色法进行了比较。培养的血管平滑肌细胞先用多聚甲醛预固定后再进行考马斯亮蓝染色,可使细胞骨架非常清晰的显色,解决了传统考马斯亮蓝染色易使肌细胞变形、脱片的问题,其效果与免疫荧光染色相近。因此,多聚甲醛预固定．考马斯亮蓝染色法是一种适于肌细胞骨架染色的简便方法。     

免疫酶双重染色法显示再生神经中的神经生长因子与睫状节神经营养因子

本研究以成人正中神经切割伤后２～３个月的神经干为材料,冰冻切片,用免疫双重染色技术显示了神经生长因子与睫状节神经营养（诱向）因子在再生的周围神经组织中的表达与分布。神经生长因子选用ＡＰＡＡＰ法．其阳性产物呈红色;睫状节神经营养（诱向）因子选用ＡＢＣ系统,４氯－１－萘酚显色,阳性产物为褐色。光镜下观察：神经生长因子的阳性反应产物出现在正中神经切割伤后再生的神经纤维中,高倍镜下可见其阳性产物分布在轴索,而在雪旺氏细胞中没能见到呈红色的阳性反应产物;睫状节神经营养（诱向）因子分布在一些细胞体积大、核大呈增生活跃状态的雪旺氏细胞中。红与褐双色反应产物色调清晰,效果较好。研究结果提示：睫状节神经营养（诱向）因子与神经生长因子在人周围神经再生过程中起着十分重要的作用。     

利用RNA特异性荧光显示沙眼衣原体包涵体

沙眼衣原体是一种严格局限于细胞内繁殖的病原体 ,其组成成分为 RNA,在细胞内繁殖形成大小不等的膜包被的圆形小体 (包涵体 )。利用改进的AO( acridine orange)荧光染色法可快速检测位于上皮细胞内桔黄 -桔红色荧光的圆形衣原体包涵体。为检测衣原体感染提供了一种简便、快速的染色技术。衣原体是介于病毒和细菌之间、一种严格位于细胞内繁殖的病原体 ,它的组成成分为 RNA。目前多用衣原体单克隆抗体免疫荧光直接染色法检测 [1,2 ] 。本文利用改进的 AO荧光细胞化学染色法 ,快速显示了细胞内繁殖的衣原体包涵体。荧光颜色鲜明 ,图像清晰…     

光学显微镜下细菌芽孢染色方法的探讨

由于细菌芽孢对水溶性染料具有较强的抗性,造成芽孢的染色较困难。加热、酸水解、机械摩擦等措施均可以提高芽孢的染色性能,对这些处理方法的优缺点进行分析,并对常规使用的Moeller法进行了改进,提出了一种更适合于微生物学实验课堂教学的细菌芽孢鉴别染色方法。