跖肌肌球蛋白腺苷三磷酸酶与琥珀酸脱氢酶染色的相关性探讨

研究大鼠、家兔和人跖肌的肌纤维型构成比例与分布。应用肌球蛋白腺苷三磷酸酶(ATP酶)和琥珀酸脱氢酶(SDH酶)染色法,观察比较各型肌纤维的组织化学特性。结果表明：肌球蛋白ATP酶染色,大鼠、家兔和人跖肌的肌纤维可分成I型、ⅡA型、ⅡB型肌纤维,横切面呈多边形或椭圆形,分别约占25％、35％和40％;琥珀酸脱氢酶染色,肌纤维呈蔚蓝色,以镶嵌交叉排列,可分为中染S0、深染FOG和浅染FG三型,分别约占25％、30％和45％,种系间无显著性差异。ATP酶活性反应肌纤维收缩的生理特性,而SDH活性反应肌纤维的代谢特征,两种分型的方法有所差异。     

避免Golgi银染标本表层产生铬银沉淀的一个改进方法

经典的Golgi镀银染色法是神经组织研究和教学的重要技术。与其它几种银染技术相比,Golgi镀银染色法操作相对简便,能同时显示神经元与胶质细胞的整体形态,图像对比清晰,耐长久保存。但美中不足的是,标本表层易产生浓黑的铬银沉淀,影响某些重要结构的观察。     

不同贮藏温度下大别山五针松花粉活力的变化

大别山五针松( Pinus dabeshanensis C. Y. Cheng et Y. W. Law)为松科( Pinaceae)松属( Pinus Linn.)植物,自然种群数量极少,目前仅发现在安徽省岳西县大王沟海拔900~1300 m阴坡和半阴坡有相对集中的分布,种群规模计200余株,且多为成年个体,林下幼苗极少,自然更新困难,为中国特有珍稀树种之一[1]。大别山五针松常在每年3月份至4月份形成花芽,5月中下旬花粉成熟并散发,花粉具气囊,此时雌球花张开接受传粉,球果翌年9月成熟[2]。据作者近年的调查,大别山五针松种子败育率较高,且种子质量较低,这也是该种类濒危的重要原因之一。     

尼罗红染色法筛选产油酵母及定量检测胞内油脂含量的研究

【目的】建立产油酵母筛选以及胞内油脂含量测定的简便方法。【方法】利用尼罗红与胞内油脂成分结合后在紫外光照射下发出荧光且荧光强弱与油脂含量相关的原理。通过在添加尼罗红的培养基中培养酵母,并观察菌落荧光的方法对385株深海酵母进行产油脂菌株筛选,利用26S rDNA D1/D2区序列分析方法对筛选获得的产油酵母菌株进行鉴定,并以其中的一株高产油脂酵母(2A00015)为试验菌株,建立了一套尼罗红染色快速测定油脂含量的方法。【结果】获得22株产油酵母,其中油脂含量最高可达62.9%,经分子鉴定后显示这22株酵母分别属于(Candida viswanathii)、近平滑假丝酵母(Candidaparapsilosis)、粘质红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyceshansenii)、季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)以及Rhodosporidium paludigenum酵母。尼罗红染色快速测定油脂含量方法的最佳检测条件为:菌悬液OD600小于1.2,尼罗红浓度0.5 mg/L,染色时间5 min,激发波长488 nm,发射波长570 nm。该测定方法得到相对荧光强度与称重法得到油脂含量呈正相关性,R2=0.9637。     

银染RD-PCR方法分离基因片段

从正常培养的SH-SY5Y细胞中提取总RNA,经oligo(dT)纤维素柱纯化分离出mRNA,然后以oligo(dT18)为锚定引物反转录生成单链cDNA再以此为模板合成DNA的第二条链;将双链DNA经Sau3AI酶切之后,接上接头,经通用引物和选择性引物进行扩增;采用5%非变性PAGE胶电泳分离后,用银染的方法显示DNA条带;在直视下回收DNA带,经过扩增后克隆入pMD18-T载体中并鉴定。结果建立了非放射性同位素的银染RD-PCR方法,用于分离基因片段。     

过碘酸雪夫氏反应和阿利辛兰的双重染色法

过碘酸雪夫氏反应（PAS）主要应用于检测糖原,中性粘多糖,粘蛋白,糖脂。而阿利辛兰（AB）是一种水溶性的多价碱性染料,在3％的乙酸作为溶剂时（pH2．5）,能与硫酸、羧酸及其盐类的酸性粘多糖（PAS反应为阴性）形成盐键,从而染成蓝色,如软骨中的硫酸软骨素为阳性。     

显示粘蛋白、弹力蛋白和胶原蛋白的复合染色法及其应用

在人体和实验动物体中 ,各种组织形态学的有形蛋白质分布较广 ,为了能够同时观察组织中的多种蛋白成分 ,我们分别选用染色剂对组织进行反应 ,实验结果证明Ａｌｃｉａｎｂｌｕｅ (阿尔辛蓝 )、Ｒｅｓｏｒ ｅｉｎＦｕｃｈｉｎ (间苯二酚 ,复红 )和ＰｏｎｃｅａｕＳＰｉｃｒｉｃａｃｉｄ (丽春红 ,苦味酸 ) ,进行组合后 ,能较好显示组织中的粘蛋白、弹力蛋白和胶原蛋白的多种结构成分 ,其色彩鲜艳 ,对比清晰 ,现报告情况如下。1 材料和方法1 1　材料来源　组织来源于本室人体和实验动物组织 ,选用 15 %中性甲醛固定液 ,能够使组织固定效果较好[…     

丽春红2R—亮绿染色法在显示神经髓鞘中的应用

任何因素所致的神经损伤 ,均可导致髓鞘的变性、髓鞘的脱失程度。常规髓鞘染色多采用传统的苏木素及锇酸染色法。苏木素法染色时间过长 (约 2 4h) ,染色步骤复杂 ,温度需控制在 5 0～ 5 5℃ ,分化时由于分化液作用速度较快 ,不便于掌握 ,易造成染色失败 ;而锇酸价格昂贵 ,浸透性差。这样将使神经组织的病理诊断及研究受到很大影响。为此 ,我们根据神经髓鞘的组织结构特点及染色原理 ,采用丽春红 2 R-亮绿组织化学染色方法 ,收到了满意的效果。材料和方法1.标本来源 :活检、尸检及动物正常或病变的脑组织、脊髓和周围神经组织 ,均经福尔马林…     

免疫金银染色鉴定斑点热群立克次体方法的建立

本文将免疫金银染色技术应用于斑点热群立克次体的鉴定,建立了方法,对4株斑点热立克次体和1株Q热立克次体的鉴定获得了初步结果,并与免疫酶标染色法进行了比较。结果表明,免疫金银染色法的特异性同免疫酶标染色法,可将不同种斑点热立克次体区分开;而前者的效价一般高于后者2—8倍。文中还讨论了洗涤、显色、衬染等条件对结果的影响。