假孕大鼠黄体萎缩过程中凋亡相关基因Fas/FasL, Bax/Bcl-2和Caspase-3的表达

以促性腺激素诱导的假孕大鼠为模型, 用免疫组织化学、原位杂交、蛋白质印迹(Western blotting)和原位末端标记(TUNEL)方法研究了细胞凋亡相关分子Fas/FasL, Bax/Bcl-2 和Caspase-3在不同时期黄体中的表达. 结果显示: 排卵后第8天前黄体内没有凋亡信号, 第14天开始出现凋亡信号, 持续到第21天; Fas 在黄体中的各个时期都有表达, 随黄体发育其表达水平增加. FasL 在黄体各个时期都有表达, 第14天明显上升, 到第21天达到高峰; Bcl-2 随黄体的形成、维持和萎缩过程其表达由强到弱, 到第21天基本不表达; 而Bax 的表达正相反, 排卵后第2天几乎不表达, 第8天表达明显增加, 到第21天表达最高; Caspase-3持续表达于各期黄体中, 并随黄体的发育其表达由弱到强, 第2天表达最低, 到第21天表达最高. 结果提示, 大鼠黄体萎缩后期发生细胞凋亡.     

血管钠肽抑制低氧刺激心脏成纤维细胞增殖的机制研究

目的：研究血管钠肽（VNP）抑制低氧刺激的心脏成纤维细胞增殖的机制。方法：发离、培养乳鼠心脏成纤维细胞,随机分为四组：对照组、低氧组、低氧＋VNP组和低氧＋8－Bromo-cGMP组。以MTT法观察各组细胞的生长情况,分别采用放射免疫和免疫组化的方法研究了VNP对细胞内cGMP水平和增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。结果：低氧24h可以使培养的乳鼠心脏成纤维细胞MTT A490nm值显著升高（P＜0．05vs对照组）,VNP（10^-7mol/L和8－Bromo-cGMP(10^-3mol/L)均可以显著降低低氧刺激的心脏成纤维细胞MTT A490nm值（P＜0．05vs低氧组）;对照组和低氧组细胞内cGMP水平无显著差异,而VNP（10^-7mol/L）能升高细胞内cGMP水平（P＜0．05vs对照组、低氧组）;低氧组PCNA的表达显著强于对照组（P＜0．05vs对照组）,VNP（10^-7mol/L可以使低氧刺激的心脏成纤维细胞PCNA表达减弱（P＜0．05vs低氧组）。结论：VNP抑制低氧刺激的心脏成纤维细胞增殖与升高细胞内cGMP水平、减弱PCNA的表达有关。     

小鼠肝炎病毒抗体检测试剂盒的标准化研究

目的筛选适合制备检测试剂盒的抗原组合。方法用 ＥＬＩＳＡ方法,将５株小鼠肝炎病毒（ＭＨＶ）抗原分别组合作为包被抗原,研究ＭＨＶ抗原不同组合与标准毒株抗体的反应性,分析ＭＨＶ各毒株间的差别,进一步比较不同组台抗原的灵敏性、特异性。结果通过对１９９７～１９９９年送检２３８只普通级实验小鼠检测,结果表明,ＭＨＶ的感染率虽有下降趋势,但感染率仍然很高（５９％～８７％）。结论我国分离的ＭＨＶ－ＨＵ７９株,在本次研究中表明能够用于ＭＨＶ抗体检测试剂盒。     

Inducible resistance to Fas—mediated apoptosis in B cells

Apoptosis produced in B cells through Fas(APO-1,CD95) triggering is regulated by signals derived from other surface receptors:CD40 engagement produces upregulation of Fas expression and marked susceptibility to Fas-induced cell death,whereas antigen receptor engagement,or IL-4R engagement,inhibits Fas killing and in so doing induces a state of Fas-resistance,even in otherwise sensitive,CD40-stimulated targets.Surface immunoglobulin and IL-4R utilize at least partially distinct path ways to produce Fas-resistance that differentially depend on PKC and STAT6,respectively.Further,surface immunoglobulin signaling for inducible Fas-resistance bypasses Btk,requires NF-κB,and entails new macromolecular synthesis.Terminal effectors of B cell Fas-resistance include the known anti-apoptotic gene products,Bcl-XL and FLIP,and a novel anti-apoptotic gene that encodes FAIM (Fas Apoptosis Inhibitory Molecule).faim was identified by differential display and exists in two alternatively spliced forms;faim-S is broadly expressed,but faim-L expression is tissue-specific.The FAIM sequence is highly evolu tionarily conserved,suggesting an important role for this molecule throughout phylogeny.Inducible resistance to Fas killing is hypothesized to protect foreign antigen-specific B cells during potentially hazardous interactions with FasL-bearing T cells,whereas autoreactive B cells fail to become Fas-resistant and are deleted via Fas-dependent cytotoxicity.Inadvertent or aberrant acquisition of Fas-resistance may permit autoreactive B cells to escape Fas deletion,and malignant lymphocytes to impede anti-tumor immunity.     

戊型肝炎病毒（HEV）合成肽及基因重组抗的免疫反应性研究

用ＯＲＦ２、ＯＲＦ３合成肽抗原（１－１０号）及基因工程重组的ＯＲＦ２抗原（１和２号）分别建立了酶联免疫方法（ＥＩＡ）,检测６０份戊型肝炎病人血清中ＨＥＶＩｇＧ及ＩｇＭ１０个合成肽抗原及２人重组抗原,均和ＨＥＶ阳性血清发生特异反应,但阳性率和反应强度差别很大。以Ｒｅｌ（ＯＲＦ２,４０２－６６０）检测的抗体阳性率最高,为９６．７％;Ｓｐ６（ＯＲＦ３,８８－１２３）次之,为９３．３％（５６／６０）;以上     

新型戊型肝炎诊断试剂盒的研制及其应用

用ＨＥＶＯＲＦ３合成肽及ＯＲＦ２重组抗原研制成新型ＨＥＶＥＩＡ诊断试剂盒。与ＧｅｎｌａｂｓＨＥＶＥＩＡ检测比较,灵敏度和特异性均达１００％（６０／６０）。三批试剂精密性测定均＜１０％。该试剂盒置４℃８个月或３７℃４ｄ保持稳定。检测不同肝炎患者ＨＥＶ抗体,发现急性非甲非乙非丙肝炎中有６３．２％,甲肝有１３．４％,乙肝有８．３％,丙肝有６．６％,正常人群为２．９％。所研制的戊型肝炎诊断试剂盒,灵敏度高,特异性强,精密性好,稳定性合格。适用于戊型肝炎诊断及戊肝病毒感染的流行病学调查     

非小细胞肺癌中检测肿瘤新生血管的方法学探讨

为了探讨Ⅷ因子相关抗原（Ｆ８ＲＡ／ｖＷＦ）显示肿瘤新生血管的可靠性及方法学。我们对８５例非小细胞肺癌（ｎｏｎｓｍａｌｃｅｌｌｕｎｇｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＮＳＣＬＣ）的石蜡组织切片进行Ｆ８ＲＡ／ｖＷＦ免疫组化染色,结果显示：Ｆ８ＲＡ／ｖＷＦ免疫组化清楚地选择性地显示血管内皮细胞,肿瘤细胞和其它正常组织不着色,肿瘤内有高密度微血管区。微血管数目均值为７１±３９,Ⅰ期ＮＳＣＬＣ微血管数目均数为６５２±３４８,腺癌为７６６±３９２。本结果与其他研究结果比较：Ｆ８ＲＡ／ｖＷＦ免疫组化显示肿瘤新生血管有一定的可靠性,但必须建立标准的免疫组化技术和重复性好的估计微血管密度的方法     

超声联合CEA和CA15-3检测对乳腺癌的诊断价值

目的:研究彩色多普勒超声联合癌胚抗原(CEA)和糖链抗原15-3(CA15-3)检测在乳腺癌诊断中的价值。方法:选取我院2010年2月~2011年1月的98例乳腺肿块患者,患者均行彩色多普勒超声检查,采用化学发光免疫法检测血清CEA、CA-153水平,并结合常规活检和术后诊断进行统计学分析。对比三者联合检测与单一检测的敏感性、准确性。结果:彩色多普勒超声、血清CEA、CA15-3检查及三者联合检查诊断乳腺癌的敏感性、准确性分别为86.11%、30.56%、47.22%、97.22%和88.78%、73.47%、77.55%、94.90%,联合检查的准确性、敏感性高于单一检查,差异有统计学意义(P0.05)。结论:彩色多普勒超声检测方法联合CEA、CA15-3检查可提升乳腺癌诊断的准确性和敏感性,降低漏诊率。     

血清CA199、CYFR21-1、CEA、NSE水平与肺癌的相关性研究

目的：分析血清CA199、CYFR21-1、CEA、NSE 水平检测在肺癌诊断及疗效评估中的临床价值,探讨其与肺癌的相关性。方 法：采用化学发光免疫法检测78 例肺癌患者、50 例肺部良性疾病及50 例健康体检者血清CA199、CYFR21-1、CEA、NSE 水平,比 较治疗前后肺癌患者肿瘤标志物水平的变化。结果：肺癌组血清CA199、CYFR21-1、CEA、NSE 水平较对照组、肺良性疾病组均显 著升高(P<0.05);Ⅲ-Ⅳ期肺癌患者各肿瘤标志物水平均较Ⅰ-Ⅱ期患者明显升高（P<0.05）;四项联合检测的敏感性为79.5 %,明显 高于CA199、CYFR21-1、CEA、NSE 任一单项肿瘤标志物的敏感性（P<0.05）;随着疗效的下降,血清CA199、CYFR21-1、CEA、NSE 水平逐渐升高（P<0.05）。结论：肺癌患者血清CA199、CYFR21-1、CEA、NSE 水平呈高表达状态,且其表达水平与肺癌病情程度密 切相关,联合检测有助于提高肺癌诊断的敏感度及指导治疗方案选择。     

大鼠骨髓间充质干细胞抵抗人血清介导的异种体液免疫杀伤作用及其机制

目的：研究大鼠骨髓间充干细胞（rBMSC）抵抗人血清介导的异种体液性杀伤的作用及其主要机制。方法：分离培养SD 大 鼠BMSC,将第4 代的rBMSC 作为实验材料,以大鼠淋巴细胞（rLC）作为对照。采用流式细胞技术,检查两种细胞异种抗原alpha-Gal 的表达情况,体积分数20%正常人血清对两种细胞的杀伤作用、两种细胞分别与正常人血清中天然抗体IgM 和IgG的结合情况, 以及与正常人血清作用后补体C3c、C4c、C5b-9 在两种细胞上的沉积情况。结果：成功分离和培养rBMSC。相对于rLC,rBMSC 对 人血清介导的异种体液性杀伤具有明显的抵抗作用（P＜0.01）;rBMSC 上alpha-Gal的表达显著低于rLC（P＜0.05）;rBMSC 与人血清 中IgG和IgM的结合量显著低于rLC（P＜0.01）;与正常人血清作用后,rLC 可见显著的C3c、C4c 和C5b-9 沉积,但rBMSC仅有 较少C3c 和C4c 沉积,两种细胞间比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）。结论：rBMSC 能明显抵抗人血清介导的异种体液免疫杀 伤作用,其机制可能与rBMSC 低表达异种抗原琢-Gal及抑制了补体攻膜复合物形成有关。