达氏鲟gpr54基因的克隆及Kisspeptin注射对其表达的影响

G蛋白偶联受体54(GPR54, G protein-coupled receptor 54)是kisspeptin (Kiss)的受体蛋白。Kisspeptin/GPR54系统通过调节促性腺激素释放激素(GnRH)的活性来参与鱼类生殖调控。为了研究Kisspeptin/GPR54系统对达氏鲟(Acipenser dabryanus)GnRH的调控功能, 克隆得到达氏鲟2个gpr54基因的全长cDNA序列, 命名为dsgpr54-1及dsgpr54-2, 分别编码379和368个氨基酸。氨基酸序列比对及进化树分析表明, 达氏鲟Gpr54与四足动物Gpr54序列一致性较高, 亲缘关系较近。荧光定量PCR研究发现, dsgpr54-1的转录本在精巢、卵巢、下丘脑、垂体、中脑及端脑等组织中均有表达, 且在下丘脑中转录水平最高; 而dsgpr54-2仅在脑组织中转录, 且在垂体、中脑及下丘脑中表达丰度均较高。为了研究Gpr54是否可以与其配体Kisspeptin结合调控下丘脑中gnrh基因的表达, 分别合成了达氏鲟Kiss-1和Kiss-2的核心十肽(10 nmol/L、1000 nmol/L), 腹腔注射到9月龄达氏鲟。结果表明, 不同浓度Kiss-1、Kiss-2注射均引起gpr54基因表达量升高, 并且10 nmol/L Kiss-2注射能够显著促进dsgpr54-2的表达(P<0.05)。另外, 不同浓度Kiss-1注射均造成了gnrh转录水平的下降; 而10 nmol/L Kiss-2注射使得gnrh1表达量上升, 而gnrh2的表达量下降, 1000 nmol/L Kiss-2注射则引起gnrh1表达量的下降, gnrh2的表达量没有显著变化。上述研究结果表明, 达氏鲟gpr54基因均能与其配体kiss-1、kiss-2相结合, 但表现出一定的受体-配体选择性差异。Kiss-1、Kiss-2通过激活Gpr54的活性, 调控下丘脑中gnrh基因的表达, 且其调控功能存在差异。     

解脂耶氏酵母细胞表面展示乳糖水解酶高效水解乳糖

乳糖是婴幼儿获取能量的重要碳源之一,但乳糖需要在乳糖酶的作用下水解成半乳糖与葡萄糖后才能被吸收。缺少乳糖分解酶的婴幼儿在摄入含乳糖的食品后,未被消化的乳糖会直接进入大肠,刺激大肠蠕动加快,造成一系列不适应症状即乳糖不耐症,我国属于乳糖不耐症高发国家。因此,解决乳糖的体外水解问题对减轻该症状有重要的意义。研究通过将β-半乳糖苷酶(也称为乳糖水解酶)表面展示在食品安全微生物解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)细胞表面,通过培养获得该酵母,然后直接利用酵母细胞来水解乳糖生成半乳糖与葡萄糖。采用该工程酵母细胞(HCY10),能在24小时内完全水解50g/L的乳糖,生成半乳糖与葡萄糖。该方法具有高效、简便的优点,能为乳糖的高效水解提供一条新的途径。     

酶解-凝胶色谱法制备志贺氏菌脂多糖

应用核酸酶及蛋白酶K降解作初提,经凝胶色谱纯化的程序提取了较高纯度的志贺氏菌脂多糖,产率为5.28％。并初建以254nm/425nm波长用于监测脂多糖的新方法。     

链霉菌属菌株AS4.693和AS4.702的分类学研究

链霉菌属“Setae”种群原为北里孢菌属Kitasatosporia (Omura,1982)。1992年,Wellington根据16S rRNA序列分析结果将其并入链霉菌属,并建立“Setae”种群。通过对保藏的链霉菌AS 4.693、AS 4.702进行的形态学、细胞化学、分子遗传分类研究结果表明,它们与链霉菌属“Setae”种群中的典型种——西唐链霉菌Streptomyces setae(JCM3304’)具有相似性。它们的rDNA相似性高达100％,证明它们应归属于同一种群。AS.4.693定名为西唐链霉菌不规则新亚种Streptomyces setae subsp.irregularis nov.,AS 4.702定名为西唐链霉菌波曲弗氏新亚种Streptomyces setae subsp.flexuofradiae nov.。     

猫后内侧外上雪氏区视神经元最优方向的组织

以不同角度插入微电极,定量分析了猫后内侧上雪氏区（ＰＭＬＳ区）细胞对运动光棒方向偏好的组织特征。结果显示：垂直于皮层表面相继记录的细胞,最优方向倾向于相似,其变化率显著低于电极平行或倾斜于皮层表面的测量值。提示该区细胞对运动刺激的方向选择性以垂直于皮层表面的“功能柱”的形式组织起来。在柱内最优方向基本保持不变     

微生物絮凝剂产生菌的筛选和发酵条件研究

设计了微生物絮凝剂产生菌菌种筛选模型,并从土壤和活性污泥中筛选到５１株絮凝剂产生菌,经复筛获得两株絮凝活性较高的菌株,分别定名为Ｎｏｃａｒｄｉａ,ＪＩＭ－８９和ＪＩＭ－１２７。对两株菌的发酵条件,特别是培养基组成,进行了初步研究。两株菌所产生的絮凝剂,对大肠杆菌悬液２０ｍｉｎ的絮凝活性在１０００ｕ／ｍｌ,最高可达１２４８ｕ／ｍｌ。     

乳鼠外周神经雪旺氏细胞的体外培养和纯化的研究

本文取５～７天ＳＤ新生大鼠坐骨神经剪碎,用０．２５％胰蛋白酶及０．０３％胶原酶在３７℃消化４５分钟,吹打分散后接种于培养瓶。培养基为含１０％胎牛血清的Ｆ１０。接种后４８小时,加入阿糖胞苷（Ａｒａ－ｃ,Ｓｉｇｍａ）１０－５ｍｏｌ／Ｌ处理,４８小时后换每毫升含神经生长因子（ＮＧＦ）１００μｇ的培养液,刺激雪旺氏细胞（ＳＣ）生长５～７天。此时根据成纤维细胞去除的情况,可再次加入Ａｒａ－Ｃ１～２天或转为无血清培养基一周。这种抗有丝分裂法结合无血清培养法,既能有效去除成纤维细胞,又能减少对ＳＣ的损伤,获得的ＳＣ纯净度可达９８％。     

我与金丝猴的故事

湖北的西北部有一处山川交错、峰岭连绵的山群,相传上古的神农氏就是在这里遍尝百草、教民农耕、采药为民治病,中国农业、医药由他开始,后人纪念他将山群取名为神农架。1982年,湖北省人民政府批准建立神农架自然保护区;1986年7月,国务院批准神农架自然保护区为国家级森林和野生动物类型自然     

自然造就的神奇之地

神农架因为华夏始祖炎帝神农氏在这里搭架采药而得名，它位于湖北省的西北部，如一叶翡翠镶嵌在华中大地，是长江和汉水的分水岭，也是秦岭和大巴山的交汇地。它地跨东经109&#176;56’-110&#176;58：北纬31&#176;15’-31&#176;75：总面积3253km^2，辖4镇4乡、1个林业管理局（国家森林公园）和1个国家级自然保护区，     

夸娥氏加快基因破译步伐——复旦大学发现解读基因的高效新方法

在中国传统寓言故事《愚公移山》中有一个夸娥氏,他是中国古代传说中的大力神。故事里说,玉皇大帝被愚公的精神所感动,于是派夸娥氏的两个儿子把王屋山、太行山搬到了别的地方。如今这位大力士又被中国科学家"请"进了基因研究领域,有望一显身手。2005年7月25日,复旦大学的研究人员宣布,他们将一种源于飞