杜仲次生木质部导管分子分化中的程序性死亡

运用原位末端标记法,证明了杜仲（ＥｕｃｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓＯｌｉｖ．）次生木质部的导管分子分化过程是程序性死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ,ＰＣＤ）过程。它包括一系列的物质合成和细胞结构的解体和自溶：细胞核逐步变得极不规则,染色质高度凝集,有些细胞核的核周腔膨大,核周腔内存在着包裹有核物质的内膜凸起,最后,核膜消失,核解体。细胞核是ＰＣＤ中最后消失的细胞器之一。线粒体有两种解体方式,一种为线粒体内部结构紊乱,嵴极不清晰,线粒体皱缩变形;另一种为线粒体出现一些电子密度低的透明区,进而裂开。内质网囊泡化,相邻的内质网槽库之间互相连接,形成分隔。内质网和液泡共同行使溶酶体功能,吞噬各种细胞器残体。解体后的物质可能有两种去向,一是通过纹孔运输到邻近的细胞中,二是转化成构建自身次生壁的物质     

杜仲叶多糖的提取分离、抗补体活性及结构研究

经石油醚脱脂、除胶后,采用热水提取、分步醇沉工艺获得杜仲叶水溶性多糖PsEUL1、PsEUL2、PsEUL3,分别经S-8大孔树脂脱色,Sevag法脱蛋白及透析,其中PsEUL1经DEAE-52纤维素柱层析分离得多糖组分PsEUL11、PsEUL12、PsEUL13,抗补体活性实验表明,其中有多个组分有不同程度的抗补体活性,并呈一定的剂量效应关系。活性多糖PsEUL13经硫酸-咔唑反应及气相色谱法测定,单糖组成为:L-鼠李糖、D-岩藻糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡糖糖、D-半乳糖、糖醛酸,含量比为11.8∶1.6∶37.7∶4.2∶10.7∶12.8∶21.2。     

杜仲MVA和MEP途径相关基因的亚细胞定位与表达分析

通过对杜仲基因组分析,筛选并克隆出MVA途径和MEP途径的相关基因全长（EuDXR,EuMCT,EuCMK,EuMDS,EuACOT,EuHMGS和EuHMGR）,并通过生物信息学方法分析其结构特征,结果表明上述基因与其他已知物种相应基因的相似度达73%~85%。通过构建亚细胞定位表达载体,并瞬时转化烟草下表皮细胞后激光共聚焦显微镜下观察显示,EuDXR,EuMCT,EuCMK,EuMDS基因编码蛋白定位于叶绿体,EuACOT和EuHMGR基因编码蛋白定位于内质网,EuHMGS基因编码蛋白定位于细胞质膜。利用转录组测序技术分析上述基因的时空表达特性表明,MEP途径相关基因在杜仲叶片中大量表达,而MVA途径相关基因在杜仲幼果中大量表达,且杜仲幼果比叶片中的橡胶含量高,因此,推断MVA途径在杜仲橡胶合成中占主导作用。     

杜仲含胶细胞的形态学研究

通过变性处理、整体透明及离析等方法的综合运用,可见杜仲体内含胶细胞是一种细长、两端膨大的单细胞,含胶细胞的分枝比较常见,大多为二叉状分枝,罕见三叉状分枝。整体透明后可见含胶细胞在叶片和果皮中的分布状况,同时对含胶细胞的形态学指标进行了测量。     

Development and characterization of microsatellite markers in Eucommia ulmoides Oliver (Eucommiaceae)

Twenty‐three microsatellite markers were developed from an AC‐enriched genomic library of Eucommia ulmoides, an economically important tree species for both herbal medicine and organic chemical industry in China. Nineteen microsatellite loci were found polymorphic by testing 36 individuals from 10 populations, with two to 14 alleles per locus. The expected heterozygosity ranged from 0.054 to 0.874. This set of microsatellite markers has provided a useful tool for the ongoing efforts in studying population genetic structure of E. ulmoides.     

杜仲脂氧合酶基因家族全基因组鉴定及其表达特性研究

LOX （脂氧合酶）是动、植物中普遍存在的一种氧合酶,在植物的生长发育和逆境胁迫中发挥重要作用。本研究在杜仲基因组范围内,利用生物信息学方法对LOX基因家族进行全面鉴定,并分析了其基因结构、定位及其所编码蛋白质的理化性质、结构特征、分类和功能等。结果显示：杜仲LOX基因家族有23条LOX基因序列,分别定位于细胞质或叶绿体中,分为9-LOX和13-LOX两个亚家族,其中9-LOX类型仅包含一个,13-LOX类型包含22个;23个LOX基因非平均分布于12条scaffolds上,一些基因发生串联分布;RNA-Seq表达结果显示6个13-LOX类型基因在杜仲叶、果、树皮和种仁中几乎没有表达,而其他17个LOX基因表达具有组织和时空表达特异性。研究结果为揭示杜仲LOX基因家族成员的功能提供重要线索,为进一步研究LOX基因家族提供理论基础。     

一株具有特异AFLP指纹图谱的杜仲古树

杜仲(Eucomm ia ulm oidesO liver)是原产于我国的传统药用植物,虽然目前杜仲被广泛栽培,但野生杜仲已非常稀少,几乎难以见到。作者在利用AFLP分子标记技术研究杜仲的遗传多样性和居群遗传结构时,发现一株采自神农架自然保护区的树龄200多年的雄性杜仲古树(编号为SNJ5)的AFLP指纹图谱与其它582株树龄为10~52年的栽培杜仲的指纹图谱有显著的不同。在总计为191条多态带中,有44条为高频率显性等位基因带(h ighfrequency dom inant allele bands,HFDAB,即583个个体中只有1~3个个体缺乏的带)。SNJ5缺乏23条HFDAB,其中有12条HFDAB是SNJ5单独缺乏的,与其他582个个体差异显著(p<0.05);另外,SNJ5还具有一条特有带(E ACG/M CTG引物组合的217 bp带)。据此推测这一杜仲古树是原始野生植株,是近年来众多学者认为野生杜仲灭绝后发现的非常重要的种质资源,应加以大力保护。     

杜仲剥皮再生过程中可溶性蛋白和过氧化物酶含量及分布的变化

过氧化物酶在植物的损伤愈合中起着重要作用.我们采用生物化学分析和组织定位技术,确定了杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)剥皮再生过程中形成层区域过氧化物酶的分布和活性变化.剥皮后第4天至第21天,剥皮植株过氧化物酶含量大幅度增加(与对照比,增加了30～40倍),在整个剥皮再生过程中(从第0天至第63天),过氧化物酶在细胞分裂活跃的形成层和木栓形成层细胞中分布较少.而在愈伤组织、类皮层、成熟韧皮部和成熟木质部中分布较多.过氧化物酶在形成层及其两侧呈梯度分布,形成层中最少,在两侧的韧皮部和木质部中依次递增.其等电聚焦电泳显示两条酶带:POD Ⅰ和PODⅡ.前者只在木质部中分布,可能与木质部的分化有关;后者只在再生的组织中分布,可能与树皮再生过程有关.     

杜仲休眠枝条中多糖颗粒变化的超微结构研究

在对杜仲（Ｅｕｃｏｍｍｉａ ｕｌｍｏｉｄｅｓ Ｏｌｉｖ．）形成层休眠期枝条的超微结构研究中发现,在筛管分子的筛板附近有一种复合球形体。细胞化学研究证明,这是一种多糖颗粒,但不同于枝条其他薄壁细胞中的多糖颗粒,而与细胞壁中的多糖相似。这种复合球形体只出现于形成层生理休眠期的筛分子中,而在被动休眠期和活动的筛分子中则看不到。