从滑桃树种壳中分离到具抗细菌活性的新木脂素

从滑桃树(Trewia nudiflora L.)的种壳中分离到5个木脂素,其中4个是新木脂素,它们的结构分别鉴定为:9'-nethyl americanol A(1)、9'-nethyl isoamericanol A(2)、9'-nethyl americanol A(3)、9'-nethyl americanol A(4)和americanin(5);并制备了化合物5的两个乙酰化产物3,4-diacetyl americanin(5a)和3,4,9-triacetyl americanin(5b).以羧苄青霉素钠盐、硫酸链霉素和利福平为阳性对照,对这7个化合物进行了抗细菌的活性检测:化合物4和5对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和革兰氏阴性菌结核分枝杆菌(Mycobacterium tubercrlosis)有明显的抑制菌作用,其中化合物4对两种菌的最低抑制浓度均为40μg/Ml,化合物5对两种菌的最低抑制浓度为100μg/Ml,但是化合物5的两个乙酰化产物在每纸片200μg的剂量下没有表现出抑菌活性.     

鼻咽癌相关基因NGX6对鼻咽癌细胞周期的影响

为了探讨鼻咽癌（NPC）候选抑瘤基因NGX6对NPC细胞的细胞周期进程及细胞周期素的影响,阐明它的作用机制,通过建立稳定表达NGX6的鼻咽癌HNE1细胞株,采用细胞免疫组织化学,流式细胞仪检测与分析细胞周期及细胞周期素的改变,用western blot验证它对细胞周期的影响。结果显示稳定表达NGX6的HNE1细胞较对照组细胞周期中G0/G1期比值明显增加,而S期比例减少。细胞凋亡率无明显变化。流式细胞仪检测发现cyclinD1、A和E的表达明显减少,以cyclinD1的改变最为明显。Western blot检测也发现cyclinD1的表达明显下调。以上结果说明NGX6主要通过下调cyclinD1的表达,延缓细胞周期的G1→S的进程,从而抑制NPC细胞的过度增殖。     

抗微生物肽——颗粒溶解素的研究进展

颗粒溶解素是新近发现的一种毒性分子,具有广谱的抗病原微生物及杀伤肿瘤细胞作用,其作用机制涉及神经酰氨和caspase依赖和非依赖途径,并与其二级结构及所带正电荷氨基酸相关,由于其广谱的抗病原微生物作用及对正常宿主细胞的低毒性,所以它在消除耐药性病原微生物方面是一种很有吸引力的生物制剂,已成为抗微生物肽研究的一个新热点。     

小泡巨鼠对森林种子选择和贮藏的观察

小泡巨鼠是四川省都江堰林区一种占优势的鼠种,取食多种林木种子和果实,可能影响这些树种的更新。于2001年秋季,调查了小泡巨鼠对栓皮栎、袍树、栲树、石栎、青冈和油茶等6种重要林木种子的选择和贮藏,并初步探讨了其对森林更新的影响。结果表明,小泡巨鼠对上述6种林木种子有很强的选择性,种子的营养价值和单宁含量是影响其选择和贮藏的主要因素。小泡巨鼠喜好取食和贮藏单宁含量较低的栲树、油茶和石栎种子,而不喜好取食和贮藏单宁含量较高的袍树、青冈和栓皮栎种子。小泡巨鼠在围栏内分散贮藏了部分种子(特别是石栎和油茶种子),且绝大部分贮藏点仅有1粒种子。小泡巨鼠对种子的选择和贮藏可能对有关林木的更新产生积极影响。     

P—选择素凝集素—EGF功能域的克隆、表达及其单克隆抗体制备

制备特异性抗人P 选择素的凝集素 表皮生长因子 (L EGF)功能域的单克隆抗体。利用特异引物 ,通过RT PCR从外周血血小板中扩增出人P 选择素的L EGF功能域基因 ,将其克隆至pET42b( )载体中 ,测序验证后转染大肠杆菌BL2 1,经诱导表达了C端融合 6×His的蛋白质。融合蛋白质经分离纯化后 ,免疫Balb/c小鼠 ,应用杂交瘤技术 ,通过间接ELISA筛选阳性克隆。获得 3株可稳定分泌抗L EGF功能域单抗的杂交瘤细胞株 (B10、F3和H5 )。其亚型分别为IgG2 、IgG1和IgG3;轻链均为κ型。所获的单抗对LPS刺激活化的人脐静脉内皮细胞均有特异性结合反应 ,并可在体外阻断经凝血酶激活的血小板与中性粒细胞间的粘附。表明所获的单抗可特异性识别结合天然P 选择素 ,具有体外抗活化血小板与中性粒细胞粘附的功能 ,为进一步应用此单抗进行P 选择素结构和功能及抗粘附治疗研究提供了实验基础。     

黄河裸裂尻鱼肌肉生长抑制素基因克隆及表达分析

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)属于转化生长因子β(TGF-β)超家族中的一个成员,是骨骼肌生长发育的负调控因子。该文以黄河裸裂尻鱼肌肉总RNA为模板,采用RT-PCT、5’-RACE和3’-RACE法获得MSTN基因全长cDNA序列为2180bp,包含长为1128bp的开放阅读框,编码375个氨基酸。以肌肉总DNA为模板,通过PCR法进一步获得了MSTN基因的2个内含子序列,分析表明,黄河裸裂尻鱼MSTN基因与其他脊椎动物具有相似的基因结构(包括3个外显子和2个内含子)。黄河裸裂尻鱼MSTN具有脊椎动物MSTN的共同序列特征,含有1个蛋白酶水解位点RXXR和8个位于TGF-β功能区域保守的半胱氨酸残基。氨基酸序列同源性分析表明,黄河裸裂尻鱼MSTN序列与其他鲤科鱼类MSTN具有较高的同源性;而与哺乳动物和禽类的MSTN同源性较低。系统发育分析表明,黄河裸裂尻鱼MSTN与其他鲤科鱼类聚于同一进化支。RT-PCR分析表明,该基因在黄河裸裂尻鱼9个被检组织中均有表达,但在心、肾、肠、精巢中表达量较高。Real-TimePCR分析显示,MSTN基因在胚胎中的相对表达量,随胚胎发育阶段的不同而有所差异,暗示MSTN的功能可能并不局限在对肌肉生长发育的负调控作用,可能还有其他功能。     

城市绿化竹种综合选择

针对城市绿化材料选择的需求,对福建华安竹种园79个丛生竹和121散混生竹分别测定分析,运用集对分析方法对竹子生态适应性、观赏性和放氧量等方面13个指标进行综合评价选择,结果表明:花竹、小叶琴丝竹、黄竹、糯竹、乡土竹、泰竹、青皮竹等为城市绿化优良丛生竹种;实心竹、衢县苦竹、黄槽毛竹、毛竹、鸟哺鸡竹、高节竹、红哺鸡竹、毛环水竹为城市绿化优良散混生竹种.     

高脂饲料诱导的肥胖大鼠网膜素水平的实验研究

人群调查发现肥胖人群网膜素水平较正常人群低,而正常及肥胖大鼠血清网膜素水平及其基因表达情况尚不清楚.将SD大鼠随机分为正常组(n=10)和高脂组(n=30),分别喂养普通饲料和高脂饲料.6 w后从高脂组选取体重增长最快的20只,再从中随机抽取10只继续喂养高脂饲料,12 w后两组各剩9只,采用全自动生化仪ADVIA2400测定血糖及血脂、ELISA检测血清胰岛素及网膜素水平、RT-PCR检测网膜脂肪组织网膜素mRNA表达水平.结果显示高脂组大鼠体重、体重增加值、肥胖指数、低密度脂蛋白、胰岛素、血清网膜素水平及网膜脂肪组织网膜素mRNA表达水平均高于正常组(P<0.05).首次发现肥胖大鼠血清网膜素水平及网膜脂肪组织中网膜素mRNA表达水平较正常大鼠显著增高,与人群调查结果不一致.     

蟋蟀精子表面LCA及ConA结合糖复合物的分布变化

LCA and ConA-binding glycoconjugates on cricket (Teleogryllus emma) sperm surface were detected with fluorescence microscope after FITC labelling for better understanding of the distribution of glycoconjugates during spermatogenesis and spermiogenesis. FITC-LCA and FITC-ConA were bound on the spermatocytes, and their distribution changes in the process of spermiogenesis were observed .In the testis sperm, FITC-LCA and FITC-ConA were mainly bound on the head and neck region. That is different from the mark pattern of spermatophore sperm, in which the nucleus, neck region and front of the tail showed obvious fluorescence mark, especially the acrosome complex and neck region exhibited stronger mark. The mark patterns of FITC-LCA and FITC-ConA were similar,though the former was distinctly clearer than the latter. But a little difference still exists in both of them. For example in the ninth stage of spermatid, FITC-LCA mark is located on the spermatid head and neck region, and FITC-ConA mark on the spermatid head, neck and front of the tail region. When fixed germ cells were treated with PBS instead of lectin solution, or fixed cells were incubated with lectin solution, which have been treated with 0.1 mol/L specific sugar inhibitor, i.e.α-D-mannose for FITC-LCA and FITC-ConA, and α-D-glucose for FITC-ConA, no mark was observed on the cells. Those results indicate that FITC-LCA conjugated glycoconjugates has the α-D- mannose residue, and FITC-ConA conjugated glycoconjugates has the α-D-mannose and α-D-glucose residue. The investigations show that the changes in glycoconjugates distribution of cricket sperm is similar to those of other insects and mammals. The evidence exhibit that a common rule of the glycoconjugates distribution on the sperm surface is followed by most of animal sperm which may relate to the function of sperm physiology.     

整合载体与选择载体共转化酵母菌的研究

以酿酒酵母菌株H158为例,研究了带有rDNA的多拷贝整合载体pMIRY2与选择载体pFAKnaMX4的共转化率,得到了共转化过程中两种载体的最佳比率为3-4：1,得到的共转化子在完全培养基中连续传代培养5d即可得到去除G418抗性标记基因的转化子,转化子的稳定性达到90%以上,实验表明该系统适合于外源基因在酵母中的稳定表达。