African trypanosomiasis: sensitive and rapid detection of the sub-genus Trypanozoon by loop-mediated isothermal amplification (LAMP) of parasite DNA

Control of human African trypanosomiasis (HAT) is dependent on accurate diagnosis and treatment of infected patients. However, sensitivities of tests in routine use are unsatisfactory, due to the characteristically low parasitaemias in naturally infected individuals. We have identified a conserved sequence in the repetitive insertion mobile element (RIME) of the sub-genus Trypanozoon and used it to design primers for a highly specific loop-mediated isothermal amplification (LAMP) test. The test was used to analyse Trypanozoon isolates and clinical samples from HAT patients. The RIME LAMP assay was performed at 62 degrees C using real-time PCR and a water bath. DNA amplification was detectable within 25min. All positive samples detected by gel electrophoresis or in real-time using SYTO-9 fluorescence dye could also be detected visually by addition of SYBR Green I to the product. The amplicon was unequivocally confirmed through restriction enzyme NdeI digestion, analysis of melt curves and sequencing. The analytical sensitivity of the RIME LAMP assay was equivalent to 0.001 trypanosomes/ml while that of classical PCR tests ranged from 0.1 to 1000 trypanosomes/ml. LAMP detected all 75 Trypanozoon isolates while TBR1 and two primers (specific for sub-genus Trypanozoon) showed a sensitivity of 86.9%. The SRA gene PCR detected 21 out of 40 Trypanosoma brucei rhodesiense isolates while Trypanosoma gambiense-specific glycoprotein primers (TgsGP) detected 11 out of 13 T. b. gambiense isolates. Using clinical samples, the LAMP test detected parasite DNA in 18 out of 20 samples which included using supernatant prepared from boiled blood, CSF and direct native serum. The sensitivity and reproducibility of the LAMP assay coupled with the ability to detect the results visually without the need for sophisticated equipment indicate that the technique has strong potential for detection of HAT in clinical settings. Since the LAMP test shows a high tolerance to different biological substances, determination of the appropriate protocols for processing the template to make it a user-friendly technique, prior to large scale evaluation, is needed.     

原发性肠系膜肿瘤的诊断与治疗

目的:探讨原发性肠系膜肿瘤的诊断及治疗方法。方法:对各种类型的原发性肠系膜肿瘤的临床表现、术前检查及诊断、治疗等进行对比分析。结果:原发性肠系膜肿瘤临床表现多样、复杂,缺乏特异性诊断依据,但在B超引导下细针穿刺等有助于其诊断。实性肿瘤多为恶性,手术切除率低。囊性肿瘤多为良性,手术切除率高。结论:手术是治疗本病的唯一有效手段。     

原发性腹膜后肿瘤46例诊疗分析

目的：总结并探讨原发性腹膜后肿瘤（PRPT）的诊断及治疗方法。方法：回顾并分析2004年1月至2009年12月收治的46例腹膜后肿瘤患者的临床资料及随访结果。结果：良性肿瘤17例,完整切除15例,部分切除2例,复发4例,均再次手术;恶性肿瘤29例,完整切除10例,部分切除15例,活检2例,复发6例,再次手术4例。随访时间0.5至5年,良性肿瘤死于其他疾病3例,死于原发性腹膜后肿瘤1例;恶性肿瘤死亡22例,其中1年内死亡8例,3年内死亡12例,5年内死亡2例。结论：对原发性腹膜后肿瘤,B超、CT及MRI检查是目前诊断PRPT方便、有效的诊断手段,手术治疗是治疗PRPT的首选治疗方式,完整切除肿瘤是影响PRPT治疗效果及其预后的重要因素。对于复发病例应选择再次手术治疗。     

下肢动脉硬化闭塞症的诊断方法

近些年下肢动脉硬化闭塞症(LEASD)在国内外发病率均明显上升。其诊断方法很多,包括动脉造影、彩色超声多普勒、核磁共振血管造影、计算机断层血管造影和多功能周围血管检查等。动脉造影做为诊断动脉病变的金标准,因其价格相对昂贵,技术复杂,在临床应用上有一定的局限性;彩色多普勒超声操作简便,无创伤、可重复,临床应用较多,但不能直观的提供病变血管的形态;新近发展的核磁共振血管造影和计算机断层血管造影无创伤、可重复、分辨率高,且可直观的提供病变血管的形态,发展前景广阔;PVL作为一种无损伤血管检查,可进行多普勒血流图形描记和节段性测压,在判断下肢动脉狭窄闭塞性病变方面与彩色超声相关性好,准确性高,可在LEASD病人的门诊初步筛选、病情估计和随访等方面推广应用。     

嫌色性肾细胞癌17例临床病理学分析

目的探讨嫌色性肾细胞癌的临床病理特征、诊断与鉴别诊断要点。方法对17例嫌色性肾细胞癌进行组织形态学、免疫组化染色及Hale’s胶样铁染色观察,结合文献对其临床表现、病理形态特点及鉴别诊断进行探讨。结果嫌色性肾细胞癌17例,大体肿瘤直径3-10.5cm。镜下肿瘤由嫌色细胞和嗜酸细胞构成,呈片状、梁状和腺泡状分布。嫌色细胞体积较大,多角形,胞膜清晰,胞质半透明细网状,胞核皱缩,可见核沟及核异型,核仁不明显;而嗜酸细胞胞质嗜酸,可见明显的核周空晕。免疫组化:EMA 100%阳性,CD10 52.9%阳性,Vimentin阴性,CK7 88.2%阳性,P504S29.4%阳性,CD11794.1%阳性。Hale’s胶样铁染色100%阳性。17例中12例随访6个月到3年,仅1例在术后15个月发现肝脏转移,其余均未发现复发及转移。结论嫌色性肾细胞癌是一种少见的肾肿瘤,恶性程度相对较低,预后良好。掌握该肿瘤独特的病理学特征,对鉴别其他肾上皮性肿瘤有重要帮助。     

抗—HEV的临床意义

为了探索散发性戊型肝炎抗体的临床意义.采用ELISA方法检测.结果为102份抗-HEV阳性血清中抗-HEV·IgM+72份(占70.6%)、IgG+21份(占20.6%)、双阳性9份(占8.8%);IgM阳性与急性期病程和ALT异常呈现正相关.认为抗-HEV·IgM/IgG临床判断IgM为诊断标志、IgG为感染标志;疫区急性期内再感染可能性极少;城市散发戊肝食源性感染是主要传播方式之一;提示应加强饮食服务卫生管理.     

孕妇UtA与胎儿UmA和MCA测量在胎儿宫内窘迫诊断中的价值

目的:探讨胎儿大脑中动脉(Middle cerebral artery,MCA)与脐动脉(umbilical artery,UmA)和孕妇子宫动脉(uterine artery,UtA)测量诊断胎儿宫内窘迫的临床价值。方法:将我院自2017年1月至2019年1月间收治的孕晚期发生胎儿宫内窘迫的孕妇80例作为研究组,选择同期入院各项指标正常的健康孕妇78例作为对照组,对比观察两组胎儿MCA与UmA和孕妇UtA预测胎儿窘迫的价值及胎儿MCA与UmA与新生儿Apgar评分的相关性。结果:研究组孕妇UtA血流参数脐血流搏动指数(pulsatility index,PI)、脐血流阻力指数(resistance index,RI)和收缩/舒张比(systole/diastole ratios,S/D)指标水平均明显高于对照组,研究组胎儿MCA血流参数PI、S/D均明显低于对照组,研究组患儿UmA的血流参数PI和S/D高于对照组(P<0.05),RI比较差异无统计学意义(P>0.05);研究组新生儿Apgar评分≤7分的比例为40.00%,明显高于对照组15.38%。研究组UmA-PI、UmA-RI和UmA-S/D随着Apgar评分的降低呈现升高的趋势,MCA-PI、MCA-S/D和MCA-S/D随着Apgar评分的降低呈现逐渐减低的趋势。UtA血流参数联合MCA血流参数诊断胎儿宫内窘迫的敏感度为97.50%,特异性为96.25%,均明显高于各项参数单独诊断在的敏感度和特异性(P<0.05)。结论:临床可利用孕晚期孕妇UtA、胎儿UmA和MCA的血流动力学参数改变来预测胎儿宫内窘迫发生的几率,根据胎儿UmA和MCA的血流指标随着Apgar评分的变化趋势,可指导临床早期干预,降低胎儿出生缺陷和死亡率,临床价值较高,可推广使用。     

脑室—腹腔分流术后感染26例诊治分析

目的探讨脑室—腹腔分流术后感染的早期诊断和治疗原则。方法回顾性分析26例脑室—腹腔分流术后感染病例的诊断和治疗办法,所有病例均进行血液和脑脊液的培养及影像学检查。结果 2例死于感染并发症,2例感染复发,21例患者重新安装分流装置,3例病情较轻的患者经分流泵及鞘内给药后痊愈。结论脑室—腹腔分流术后的早期诊断非常重要,一些非特异性的症状和体征需引起重视。对于感染的病例,及时移除分流装置,同时行脑室外引流冲洗和脑室内注药,当脑脊液达到无菌状态后重新植入分流装置是行之有效的办法。结果表明抗感染应首选万古霉素、第三代头孢菌素或改为美罗培南,待获得培养结果后根据药敏试验针对性用药。脑脊液培养以金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌多见,经治疗再次培养结果均为阴性。     

咀嚼肌痉挛

咀嚼肌痉挛是一种临床罕见疾病,表现为单侧嚼肌突发阵发性、不自主地抽搐发作。伴或不伴有单侧面萎缩或局部硬皮病,其发病机制至今尚不明确,国内外报道极少,目前为止,仅26例具有肌电图支持的病例报道。文章复习了相关文献,对其病因、发病机制、诊断原则、治疗方法等作了系统综述。     

中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室

血液肿瘤即造血系统的恶性肿瘤,是一种严重危害公共健康的疾病。目前,血液肿瘤诊断治疗的最理想方法就是分子特异性诊断和靶向治疗,但该方法面临的最大困难就是分子靶点的选择。噬菌体展示技术是近十年发展起来的一种新的生物学技术,具有高通量筛选、模拟天然表位、易于纯化、将蛋白功能与编码基因相统一等优点,广泛应用于功能性蛋白质和多肽的筛选、蛋白质间的识别与相互作用、抗原表位的鉴定、基因工程抗体的筛选等多个分子生物学领域,非常适于理想靶点的选择。目前,噬菌体文库技术在血液肿瘤诊治中的应用主要集中在噬菌体抗体文库和噬菌体随机肽库上。本文就噬菌体展示技术在血液肿瘤诊断治疗中的研究成果做一总结分析,并对该技术在这一领域的应用前景进行展望。