全文获取类型
收费全文 | 7548篇 |
免费 | 277篇 |
国内免费 | 2993篇 |
出版年
2024年 | 35篇 |
2023年 | 112篇 |
2022年 | 165篇 |
2021年 | 180篇 |
2020年 | 155篇 |
2019年 | 150篇 |
2018年 | 119篇 |
2017年 | 163篇 |
2016年 | 172篇 |
2015年 | 225篇 |
2014年 | 449篇 |
2013年 | 378篇 |
2012年 | 378篇 |
2011年 | 440篇 |
2010年 | 394篇 |
2009年 | 465篇 |
2008年 | 575篇 |
2007年 | 470篇 |
2006年 | 498篇 |
2005年 | 511篇 |
2004年 | 503篇 |
2003年 | 436篇 |
2002年 | 454篇 |
2001年 | 414篇 |
2000年 | 381篇 |
1999年 | 337篇 |
1998年 | 273篇 |
1997年 | 245篇 |
1996年 | 231篇 |
1995年 | 196篇 |
1994年 | 205篇 |
1993年 | 166篇 |
1992年 | 142篇 |
1991年 | 151篇 |
1990年 | 161篇 |
1989年 | 152篇 |
1988年 | 52篇 |
1987年 | 60篇 |
1986年 | 63篇 |
1985年 | 70篇 |
1984年 | 45篇 |
1983年 | 19篇 |
1982年 | 13篇 |
1981年 | 12篇 |
1980年 | 2篇 |
1963年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
71.
This paper describes an approach to seek for mouse c-Myc/Myn proteins-bound specific sequences among genomic DNA.cDNA fragment of myn gene was obtained through RT-PCR technique from RNA of NIH3T3 cells.DNA fragments encoding BR/HLH/LZ structure of Myc and Myn proteins were cloned in frame into pGEX-2T vector respectively.Fusion GST-Myc and GST-Myn synthesized in E.coli hosts showed affinity to CACGTG E-box DNA and subsequently interacted with genomic fragments prepared through whole-genome-PCR.A PCR-assisted procedure which combines protein-DNA interaction and affinity chromatography was designed to enrich Myc/Myn bound DNA.At least two genomic DNA fragments obtained exhibit specifical binding capacity to Myc/Myn complex but not to GST alone.Significance of the work and of the technique itself as well asidentification of the DNAs are discussed. 相似文献
72.
以小鼠为主要实验对象建立的转基因动物遗传病模型,结合同源重组技术和YAC大片段基因分离,克隆技术,将为基因调控研究和基因治疗研究带来光明前景。 相似文献
73.
74.
75.
狂犬病毒G蛋白和N蛋白在痘苗病毒天坛株中共同表达 总被引:6,自引:0,他引:6
本文构建了一个能同时表达狂犬病毒糖蛋白(G)和核蛋白(N)两种蛋白的重组组痘苗病毒。用Southern blot和免疫荧光等方法证明G和N基因已重组到痘苗病毒TK基因区,而且能良好地表达。并证明该重组病毒在小鼠中具有良好的免疫效果。 相似文献
76.
酪氨酸羟化酶基因载体-pCMVTH 质粒的构建及在大鼠骨骼肌内的表达 总被引:4,自引:0,他引:4
为用转基因方法治疗巴金森氏病大鼠模型,本研究采用分子克隆技术,将合成多巴胺的关键酶-酪氨酸羟化酶(TH)的基因,克隆进入以巨细胞病毒CMV为启动子的载体质粒内,经限制性内切酶定位分析证实该重组的DNA质粒的可靠性。携带TH基因的PCMVTH质粒以LIPO-FECTIN介导,在培养的原代骨骼肌细胞中高效表达。本研究为进一步用转基因的细胞植入脑内以治疗巴金森氏病打下一定基础。 相似文献
77.
PCR技术用于HBV DNA检测的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
杨振 《微生物学免疫学进展》1995,23(4):231-234
PCR技术自八十年代在美国问世以来,已成功地用于多种病原体的检测,八十年代末在美国成功的利用此技术对HBV DNA进行了检测,我国在九十年代初也世开始了这方面的工作,并取得了成功,本文综合介绍国内外这方面的工作,并对一些具体的PCR方法进行了详细的介绍,并对利用PCR技术检测HBV DNA时因实验设计及操作误差造成的负面影响进行了讨论。 相似文献
78.
PCR法快速检测临床标本中结核杆菌DNA 总被引:2,自引:0,他引:2
应用聚合酶链反应(PCR)快速检测临床标本(脑脊液、胸水、腹水、血、痰液)中的结核杆菌DNA,特异性扩增片段123bp,为结核杆菌的特异性重复序列IS6110部分基因。PCR检测人型结核杆菌的敏感性达10fgDNA。临床标本的PCR检测阳性率(23.3%)明显高于抗酸染色涂片(2.9%)和细菌培养(5.7%)的阳性率(P〈0.05)。通过设立对照系统及对扩增产物酶切分析,表明该法无假阴性结果(特异 相似文献
79.
重组水蛭素HV2的稳定性 总被引:3,自引:0,他引:3
重组水蛭素HV2是凝血酶的特异性抑制剂,是一种非常稳定的蛋白质。温度的升高(100℃水浴)和pH(1─13)的改变不影响其活力,在某些变性剂(8mol/L尿素、1%SDS和6mol/L盐酸胍)存在的条件下也非常稳定,0.1mol/L的DTT在70℃时使其部分失活,只有pH和温度同时升高其活力才开始下降,pH13、80℃处理15min即完全失活,氨基酸组成和活性分析发现失活样品的Cys和Lys被破坏。重组水蛭素HV2含有一个结构紧密的N端核心区和一个无序的C端尾部。其N端的3个Lys-Xaa键均不被胰蛋白酶水解;胃蛋白酶及糜蛋白酶消化后,分离所得片段,氨基酸组成分析发现N端核心区依然保持很高的抗凝血酶活性,继续消化24h,核心区不被进一步降解。 相似文献
80.
黄河清 《中国生物化学与分子生物学报》1995,11(4):465-469
在紫外可见光谱区内,固氮酶铁钼辅基〔(Mo_2Fe_(12)S_(12))4-〕均无特征吸收峰,不含高柠檬酸盐。含双钼的铁硫簇〔(Mo_2Fe_(6~12)S_(6~12))~(1~4)-〕的电荷数、颜色与该金属簇中的亚铁量成对应关系,并都有较高的生物重组活性. 相似文献