建兰水晶艺叶片的超微结构和转录组学分析

水晶艺建兰(Cymbidium ensifolium)因其叶片上呈现出白色透明状,犹如水晶而得名,观赏价值高,但是其形成机理不明确。该研究以建兰‘铁骨水晶’为试验材料,通过对水晶叶片和绿色叶片进行显微结构和超微结构观察,并结合转录组测序等方法,探索建兰水晶艺叶片形成的原因。结果表明:(1)建兰‘铁骨水晶’水晶叶片比绿色叶片薄,叶肉细胞数量减少,形状不规则,且叶绿体含量少;水晶叶片的表皮气孔数量较绿色叶片显著减少;水晶叶片的叶肉细胞中叶绿体结构发育不良,叶绿体双膜和类囊体膜模糊,细胞中存在着大量的嗜锇颗粒。(2)转录组数据分析显示,水晶叶片中与光合作用-天线蛋白、光合作用等代谢途径相关的基因表达量显著下降,而与色素合成代谢途径相关的基因表达量上升。研究推测,建兰水晶艺叶形成的原因可能是由于与光合作用相关的基因表达量降低,导致叶绿体发育不良,叶绿素合成受阻,从而形成白色透明状叶片。     

蕙兰根部内生细菌多样性及季节动态变化

为了研究蕙兰（Cymbidium faberi）根部内生细菌群落结构在不同季节里的变化,于不同季节从蕙兰根部分离出内生细菌207株,采用核糖体DNA扩增片段限制性分析（ARDRA）研究了蕙兰根部内生细菌群落组成的季节动态变化。将内生细菌纯培养物扩增近全长的16SrDNA,并用ARDRA对所分离的菌株进行分型,根据酶切图谱的差异,将其分成25个ARDRA型,并选取代表性菌株进行16SrDNA序列测定。结果表明,分离出来的内生细菌分为9个属,包括芽孢杆菌属（Bacillus）、伯克氏属（Burkholderia）、类芽孢杆菌属（Paenibacillus）、假单胞属（Pseudomonas）、微杆菌属（Microbacterium）、根瘤菌属（Rhizobium）、Lysinibacillus、Cohnella和短杆菌属（Bre—vibacterium）,其中优势种群为Bacillus,次优势种群为Paenibacillus和Burkholderia。秋季分离出的内生细菌种类最多,夏季分离出的种类最少。在不同季节蕙兰内生细菌群落结构差异极显著（P〈O．001）,但在不同季节里蕙兰根部内生细菌优势种群没有差异。     

齿瓣石斛化学成分的研究

通过硅胶、Sephadex LH-20反复柱层析、纯化,从齿瓣石斛的茎中分离得到7个化合物,利用理化性质和波谱分析分别鉴定为新甘草苷(1)、3,5-二羟基黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷(2)、芦丁(3)、芹菜素-7-O-芸香糖苷(4)、芹菜素-7-O-葡萄糖苷(5)、β-胡萝卜苷(6)和β-谷甾醇(7)。以上化合物均为首次从齿瓣石斛中分离得到。     

莲瓣兰DALP遗传多样性研究

采用DALP(Direct amplification of length polymorphism)检测莲瓣兰5个居群的遗传结构.5个引物组合共检测到103个多态位点.和其它具有相似生活史(多年生草本、以动物为媒介的杂交、种子随风散布)的物种相比,莲瓣兰原变种水平(PPB=88.18％,A=1.8818,Ae=1.4880,H=0.2911,I=0.4412)和物种水平(PPB=93.64％,A=1.9364,Ae=1.5262,H=0.3129,I=0.4732)均具有较高的遗传多样性;各居群间(Gst=0.3292)存在较大的遗传分化.基因流的估计值(Nm=1.0186)表明莲瓣兰物种水平上各居群间每代有1.0186个移居个体.地理隔离和选择压力可能是造成莲瓣兰居群间基因流动受到限制的原因.在这些研究的基础上,探讨了野生莲瓣兰资源的保护问题.     

低温胁迫对建兰叶片内源多胺含量的影响

以素心建兰为材料,研究低温胁迫(5℃)对建兰内源多胺含量的影响。结果表明,在低温胁迫下建兰生长期的叶片多胺(PAs)总量和亚精胺(Spd)、腐胺(Put)含量都表现为先升后降的变化,精胺(Spm)含量则是下降然后上升最后稳定在比原来含量更高的水平上,说明有可能在低温胁迫下建兰通过调节内源多胺的总量和不同多胺种类的比例来抵御低温对生理的破坏作用;开花期的建兰叶片因受低温胁迫的影响未能合成足够的亚精胺(Spd),从而抑制了建兰的开花。     

野生碧玉兰组培快繁技术

以云南野生碧玉兰（Cymbidium lowianum）种子无菌萌发的试管苗为试验材料,进行其丛生芽诱导增殖、生根的组培快繁技术体系研究。结果表明：适宜的增殖培养基配方为1/2MS＋6-BA 2.0 mg/L＋KT 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖率可达300%;生根培养基的配方为1/2MS＋NAA 1.5 mg/L＋6-BA 0.3 mg/L,其根数多,健壮。     

不同培养基和激素水平对大花蕙兰原球茎诱导的影响

以添加1.5%活性碳及3%的蔗糖的花宝1号和MS培养基为基础,加入不同浓度的BA和IBA,用外植体诱导的第1代组培苗基部以下连根1.1～1.2 cm为材料诱导原球茎.结果表明,花宝1号培养基优于MS培养基,BA1 mg/L IBA0.1 mg/L最合适,诱导率可达90.1%;光照以10 h/d左右为宜,培养温度以25～27℃最佳,其诱导率最高,生长状况最好.     

兰属中若干分类群的订正

基于对许多活植物的观察,对兰科中兰属的若干种类进行了分类学考订,结果承认菅草兰Cymbidium　tortisepalum与峨眉春蕙C. omeiense为独立的种,将春剑C. longibracteatum移至菅草兰之下作为变种,送春C. szechuanicum移至莎叶兰C. cyperifolium之下作为变种。由于春剑、峨眉春蕙和送春的模式标本及引证标本已在30多年前全部丢失,本文指定了新模式。     

少叶硬叶兰, 中国兰科一新种

对云南兰科新种少叶硬叶兰作了描述和绘图,并讨论了该种与其近缘种纹瓣兰的异同。     

纹瓣兰的无菌播种与试管成苗

纹瓣兰作为一种野生的兰花资源有其重要的保护及保存意义,本试验以纹瓣兰的种子作为外植体对其进行无菌播种,并成功诱导出再生植株.试验结果表明,在添加椰子水和6-BA的1/2MS培养基中纹瓣兰的种子可以在较短的时间内形成原球茎,其中以添加6-BA 2.0 mg/L+10%椰子水诱导效果最佳.添加6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L的1/2MS培养基最有利于纹瓣兰芽的分化,在分化培养50 d时其分化率可达到100%,且芽生长健壮.当生根培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L时,纹瓣兰的生根率达95%;生根培养30 d后移栽,幼苗成活率达90%以上.