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81.
82.
乙型肝炎病毒的流行对人们的生命健康造成了极大的威胁, 而有效准确的诊断和预防性疫苗是阻止其流行的主要手段, 乙肝表面抗原是诊断试剂和疫苗的主要成分。本试验在构建稳定表达HBsAg的毕赤酵母菌株后, 对其发酵条件进行了研究。采用摇瓶分批培养方法, 探讨了不同培养基、溶解氧、诱导物甲醇的浓度以及pH值等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响。在10 L发酵罐上采用分批补料培养的方法研究了进行扩大培养生产重组HBsAg。结果表明, FBS无机盐合成培养基是理想的工业发酵培养基, 溶解氧对菌体的生长与表达有显著的影响, 甲醇诱导最佳终浓度为1% (V/V), 发酵的最适pH值为5.4~6.0。发酵罐放大培养后, ELISA和 SDS-PAGE分析表明重组HBsAg获得了高效表达, 最终菌体生物量达到310 OD600, 表达量达到27 mg/L。电子显微镜观察表达重组乙肝抗原可以自组装为22 nm类病毒颗粒, 为HBV的新一代早期血清学诊断和疫苗的大规模生产提供了一定的参考。 相似文献
83.
海藻酸钠明胶协同固定化的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究不同因素对固定化微胶囊的影响以及不同物质向微胶囊扩散的规律。方法:采用海藻酸钠与明胶协同固定化制备微胶囊,考察了海藻酸钠、明胶浓度等因子对微胶囊直径与机械强度的影响,以及牛血清蛋白与葡萄糖向微胶囊扩散的状况,并利用非稳态传递模型计算了这两种物质在微胶囊中的有效扩散系数。结果:随着海藻酸钠质量浓度的升高,微胶囊的直径与机械强度逐渐增大。制备的最优条件是CaCl2浓度为10%,滴定速度为180滴/min,最优浸泡时间为30min。在此条件下,葡萄糖与牛血清蛋白的有效扩散系数分别为4.63×10-5cm2/min、1.01×10-7cm2/min。结论:海藻酸钠明胶协同固定化制备的微胶囊作为一种生物载体,非常适合细胞或酶的固定化。 相似文献
84.
Aslı Kurnaz Muazzez Gezelge Aybaba Hançerlioğulları M. Atıf Çetiner Şeref Turhan 《人类与生态风险评估》2016,22(6):1375-1385
The activity concentrations of radionuclides in grape molasses soil samples collected from Zile (Tokat) plain in the Central Black Sea region of Turkey were measured by using gamma spectrometer with a NaI(Tl) detector. Also, the concentrations of 222Rn in soil samples and air were estimated essentially taking the activity concentrations of 226Ra measured in soil samples. Grape molasses soil samples with calcium carbonate content are used for sedimentation for making molasses in this region. The average activity concentrations of 232Th, 226Ra, 40K, and 137Cs were found as 62 ± 2, 68 ± 3, 479 ± 35, and 8.0 ± 0.3 Bq kg?1, respectively. The average concentrations of 222Rn in soil samples and air were estimated to be 50 kBq m?3 and 144 Bq m?3. From the activity concentrations, absorbed gamma dose rate in outdoor air (D), annual effective dose from external exposure (EE), annual effective dose from inhalation of radon (EI), and excess lifetime cancer risk (ELCR) were estimated in order to assess radiological risks. The average values of D, EE, EI, and ELCR were found to be 90 nGy h?1, 110 μSv y?1, 1360 μSv y?1, and 4 × 10?4, respectively. 相似文献
85.
经SephadexG-50和SP-SephadexC-25两次柱层析,从河南淅川马氏钳蝎毒素中分得一种碱性神经毒素BmKMI8.等电聚焦和SDS电泳显示单一组分,其pI为9.1,Mr为7100.毒性测试结果表明,该组分对小白鼠有较强的毒性,对昆虫也有一定的毒性,已获得该毒素的两种晶型的大单晶,并测定其空间群为P2_12_12_1,晶胞参数为:BmKMI8-A:a=36.7,b=26.6,c=52.0,BmKMI8-B:a=36.64A,b=37.31,c=37.95,已收集了BmKMI8-B分辨率为1.74的X射线单晶衍射数据。 相似文献
86.
87.
目的 测定人工饲养条件下安徽野生和自繁恒河猴的血液生化指标,并比较分析两种来源的恒河猴,雌、雄猴间以及感染BV阳性与阴性恒河猴生化指标的差异性.方法采用全自动生化分析仪对安徽野生和自繁恒河猴的14个血液生化指标进行测定,并用统计学方法比较了相同性别的野生猴与自繁猴以及感染BV阳性与阴性恒河猴血液生化值的差异性.结果 野生猴与自繁猴雄性的生化指标普遍高于雌性,野生猴碱性磷酸酶、甘油三脂和谷氨酰基转移酶雌雄间差异显著;自繁猴碱性磷酸酶、白蛋白、血清Ca、甘油三脂、肌酐和谷氨酰基转移酶雌雄间差异有显著性.除谷草转氨酶、尿素氮和血清总胆固醇外,感染BV阳性较感染BV阴性的恒河猴所得生化指标高.结论 野生猴与自繁猴,雌雄间猴以及感染BV阳性与阴性猴的血液生化指标有一定的差异性. 相似文献
88.
摘要 目的:探讨上皮性卵巢癌组织中转导素?茁1X连锁受体蛋白1( TBL1XR1)和无机焦磷酸酶(PPAl)的表达及二者与临床病例参数和患者预后的关系。方法:收集2011年2月至2015年4月入住我院的并进行手术切除的88例上皮性卵巢癌患者的组织样本,采用免疫组化的方法检测88例组织样本和相对应的癌旁组织中TBL1XR1和PPAl的表达情况,同时分析TBL1XR1和PPAl表达情况与上皮性卵巢癌患者临床病理参数之间的关系;随访至2019年9月,绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析TBL1XR1和PPAl表达与上皮性卵巢癌患者预后的关系。结果:上皮性卵巢癌组织中TBL1XR1高表达率为48.86%(43/88),TBL1XR1的表达与FIGO分期、病理分级和淋巴结转移相关(P<0.05);Kaplan-Meier分析结果显示上皮性卵巢癌组织中TBL1XR1高表达的患者具有相对较差的预后。PPAl在上皮性卵巢癌组织中高表达率为40.91%(36/88),同样的PPAl的表达与病理分级、淋巴结转移和FIGO分期相关(P<0.05);Kaplan-Meier结果分析表明PPAl高表达的患者具有相对较短的预后生存期。结论:上皮性卵巢癌组织样本中TBL1XR1和PPAl均存在表达,并且二者的表达情况与上皮性卵巢癌患者的预后生存紧密相关,TBL1XR1和PPAl的过表达可能是上皮性卵巢癌患者的不利预后因素,或可作为上皮性卵巢癌患者潜在的预后生物标志物。 相似文献
89.
90.
Gasparian ME Ostapchenko VG Dolgikh DA Kirpichnikov MP 《Biochemistry. Biokhimii?a》2006,71(2):113-119
The synthetic gene encoding human enteropeptidase light chain (L-HEP) was cloned into plasmid pET-32a downstream from the gene of fusion partner thioredoxin immediately after the DNA sequence encoding the enteropeptidase recognition site. The fusion protein thioredoxin (Trx)/L-HEP was expressed in Escherichia coli BL21(DE3). Autocatalytic cleavage of the fusion protein and activation of recombinant L-HEP were achieved by solubilization of inclusion bodies and refolding of Trx/L-HEP fusion protein. The kinetic parameters of human and bovine enteropeptidases in the presence of different concentrations of Ca2+ and Na+ for cleavage of the specific substrate GD4K-na and nonspecific substrates such as small ester Z-Lys-SBzl and chromogenic substrates Z-Ala-X-Arg-pNA have been comparatively analyzed. It is demonstrated that positively charged ions increased the Michaelis constant (Km) for cleavage of specific substrate GD4K-na, while the catalytic constant (k(cat)) remained practically unchanged. L-HEP demonstrated secondary specificity to the chromogenic substrate Z-Ala-Phe-Arg-pNA with k(cat)/Km 260 mM(-1) x sec(-1). Enzymatic activity of L-HEP was suppressed by inhibitors of trypsin-like and cysteine (E-64), but not metallo-, amino-, or chymotrypsin-like proteinases. L-HEP was active over a broad range of pH (6-9) with optimum activity at pH 7.5, and it demonstrated high stability to different denaturing agents. 相似文献