全文获取类型
收费全文 | 1325篇 |
免费 | 18篇 |
国内免费 | 46篇 |
出版年
2023年 | 5篇 |
2022年 | 10篇 |
2021年 | 14篇 |
2020年 | 13篇 |
2019年 | 23篇 |
2018年 | 17篇 |
2017年 | 15篇 |
2016年 | 22篇 |
2015年 | 20篇 |
2014年 | 57篇 |
2013年 | 73篇 |
2012年 | 62篇 |
2011年 | 93篇 |
2010年 | 55篇 |
2009年 | 85篇 |
2008年 | 64篇 |
2007年 | 64篇 |
2006年 | 44篇 |
2005年 | 41篇 |
2004年 | 37篇 |
2003年 | 37篇 |
2002年 | 24篇 |
2001年 | 9篇 |
2000年 | 17篇 |
1999年 | 7篇 |
1998年 | 12篇 |
1997年 | 16篇 |
1996年 | 13篇 |
1995年 | 28篇 |
1994年 | 34篇 |
1993年 | 27篇 |
1992年 | 25篇 |
1991年 | 29篇 |
1990年 | 17篇 |
1989年 | 11篇 |
1988年 | 18篇 |
1987年 | 20篇 |
1986年 | 14篇 |
1985年 | 26篇 |
1984年 | 39篇 |
1983年 | 40篇 |
1982年 | 47篇 |
1981年 | 24篇 |
1980年 | 9篇 |
1979年 | 13篇 |
1978年 | 3篇 |
1977年 | 4篇 |
1975年 | 2篇 |
1974年 | 4篇 |
1970年 | 2篇 |
排序方式: 共有1389条查询结果,搜索用时 15 毫秒
81.
牛病毒性腹泻病毒的成熟和释放 总被引:5,自引:0,他引:5
试验中用电镜观察了牛病毒性腹泻病毒OregonC24V株在感染新生牛睾丸细胞中的形态发生。成熟的病毒颗粒是直径约为50nm的球形颗粒,内含直径约为30nm的核心。病毒在宿主细胞的胞质内复制,通过糙面内质网膜出芽成熟。病毒可以通过外排或在细胞死亡后含有病毒颗粒的空泡崩溃而释放到胞外。 相似文献
82.
目的制备乳腺生物反应器所必需的乳腺特异性表达的调控序列,并验证其指导外源基因表达的能力.方法用PCR法从奶牛染色体上分5段扩增出了全长8.2Kb的牛β-乳球蛋白基因,包括1.8Kb的5′侧翼区、1.7Kb的3′侧翼区及4.7Kb的gDNA区.扩增出的各片段克隆到T-载体上,酶切鉴定及序列分析均证实了所扩增片段的正确性.将五个片段与荧光素酶cDNA拼接成荧光素酶瞬时表达载体并在小鼠乳腺中瞬时表达.结果注射荧光素酶瞬时表达载体的小鼠乳汁中明显测出了荧光素酶活性.结论所克隆的牛β-乳球蛋白基因表达调控序列能够指导外源基因在小鼠乳腺中表达. 相似文献
83.
84.
Purification of a Ciliary Neurotrophic Factor from Bovine Heart 总被引:4,自引:0,他引:4
A neurotrophic factor that promotes the survival of cholinergic parasympathetic ciliary neurons has been purified approximately 20,000-fold from bovine cardiac tissue under nondenaturing conditions using heparin-affinity chromatography. Up to 22 micrograms of purified factor having a specific activity of 4 X 10(5) trophic units/mg can be obtained from 250 g of heart muscle. Sodium dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamide gels of the purified material show a broad band that is sometimes resolvable into a closely spaced pair of bands of 22 and 23 kilodaltons. Partially purified factor can be resolved into two peaks of activity (pI 5.6 and 5.0) by high-resolution anion-exchange chromatography and chromatofocusing, although these procedures have not proved useful as purification methods because of the large losses of activity incurred. It is likely that these two peaks represent the two bands seen on SDS-polyacrylamide gels. The bovine cardiac factor(s) differs from similar factors purified from chick optic tissues and pig brain in that it is irreversibly denatured by SDS. 相似文献
85.
牛病毒性腹泻——粘膜病是世界性广泛流行的奶牛和肉牛的传染病。其病原为牛病毒性腹泻病毒(BVDV),属于披膜病毒科的瘟病毒属,它的许多生物学特性至今还不很清楚。本试验建立了12株分泌抗BVDV的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,并结合免疫转移电泳法和放射免疫沉淀法,初步研究了BVDV的多肽。 相似文献
86.
Enhancement of maternal recognition of pregnancy with parthenogenetic embryos in bovine embryo transfer 总被引:1,自引:0,他引:1
Hiroki Hirayama Satoru Moriyasu Soichi Kageyama Ken Sawai Hitomi Takahashi Masaya Geshi Takashi Fujii Takeshi Koyama Keisuke Koyama Akio Miyamoto Motozumi Matsui Akira Minamihashi 《Theriogenology》2014
This study was performed to elucidate the changes in IFNT messenger RNA (mRNA) levels in in vivo–fertilized and parthenogenetic bovine embryos and their interferon-τ (IFNT) secretion amounts during the elongation phase. We assessed the induction capability of maternal recognition of pregnancy by parthenogenetic embryos and attempted cotransfer of in vivo–fertilized and parthenogenetic embryos. The expression level of IFNT mRNA in in vivo–fertilized embryos peaked on Day 18 after estrus, and the highest amount of uterine IFNT was observed on Day 20. Transfer of 10 parthenogenetic embryos produced a detectable amount of uterine IFNT. Transfer of one or three parthenogenetic embryos inhibited luteolysis. An increase in ISG15 mRNA levels in peripheral granulocytes was induced by the transfer of three parthenogenetic embryos. Cotransfer of three parthenogenetic embryos significantly improved the pregnancy rate on Day 40 in code 3 in vivo–fertilized embryos compared with single transfer without parthenogenetic embryos (65% vs. 35%). However, the pregnancy rate on Day 90 (35%) in cotransfer of code 3 in vivo–fertilized embryos did not differ from that upon single transfer (29%), because the cotransfer group had a higher incidence of pregnancy loss than with single transfer (47% vs. 17%) after Day 40. Cotransfer did not affect the pregnancy rate of code 2 in vivo–fertilized embryos. The incidence of pregnancy loss was higher in cotransfer of code 2 in vivo–fertilized embryos than in single transfer (30% vs. 7%). In conclusion, parthenogenetic embryos in the elongation phase secreted IFNT, enabling induction of maternal recognition of pregnancy. The present study revealed that enhancement of the maternal recognition of pregnancy using parthenogenetic embryos promoted the viability of poor-quality embryos until Day 40 of gestation. However, the incidence of pregnancy loss increased after Day 40 in the cotransfer of parthenogenetic embryos. A technique for promoting the full-term survival of poor-quality embryos is needed. 相似文献
87.
88.
利用人摄金蛋白(METALLOTHIONEIN)启动子和牛乳突瘤病毒在哺乳动物细胞中表达乙型肝炎表面抗原 总被引:1,自引:0,他引:1
用人Metallothioenin-Ⅱ启动子、乙型肝炎表面抗原基因,SV40早期基因的编接位点和多聚A位点构成了表达组件,然后插入到经改造过的BpV-1质粒中。所得质粒pdMTsAg-5转染小鼠C127细胞得到转化克隆。Ausria Ⅱ检测证明13株中有12株能产生HBsAg。对其中一株进行HBsAg收率观察,隔天收获为292.6~525.8μg/升,每天收获为200.9~369.0μg/升,可连续收获60天以上。经重金属离子诱导后,收率增至583~854.4μg/升。培养液经超滤浓缩和两次密梯离心后,可集中为一个狭窄的峰,顶峰的Ausria Ⅱ cpm为1.05×10~7,密度为1.20g/ml。 相似文献
89.
我们用双抗体免疫沉淀法,从牛垂体多聚核糖体中分离出牛生长激素特异多聚核糖体,由此多聚核糖体纯化的牛生长激素Poly(A)~+RNA,可以在麦胚体外翻译系统中和兔网织红细胞体外翻译系统中促进~(14)C-亮氨酸的参入。合成的含~(14)-亮氨酸的翻译产物中有91%可以被牛生长激素抗体沉淀。用SDS-11%PAGE对翻译产物进行鉴定表明,翻译产物在25KD处呈一条放射自显影带,与报导的牛生长激素前体分子量相吻合。 相似文献
90.
兰州百合精细胞表膜上存在被牛精子抗体识别的抗原决定簇 总被引:1,自引:0,他引:1
以兔抗牛精子 Ig G为一抗 ,对植物精细胞蛋白进行 Western blot分析 ,发现兰州百合 (Liliumdavidii Duch.)精细胞和生殖细胞中各有一分子量为 64k D的蛋白显示阳性反应 ;在玉米 (Zea mays)精细胞蛋白中也发现了阳性反应条带 ,其分子量为 65 k D和 2 2 k D;而兰州百合花丝、花药壁和玉米黄化苗的蛋白中均没有阳性条带。用兔抗牛精子 Ig G对兰州百合精细胞进行间接免疫荧光标记 ,结果表明在兰州百合精细胞表面 ,有兔抗牛精子 Ig G的识别位点。根据以上结果 ,作者认为植物精细胞中有与动物精子相同或相似的抗原决定簇 ,它 (们 )主要分布于精细胞表膜上 ,并为精细胞所特有 相似文献