伦敦白胶和茶：一种既快又安全的用于透射电子显微镜的细菌样品制备方法

【目的】检测乌龙茶提取物是否可作为电子染色剂取代醋酸双氧铀用于细菌细胞染色,使其能在透射电子显微镜下进行观察。【方法】利用伦敦白胶对细菌样品(大肠杆菌和金黄色葡萄球菌)进行胶块的制备,再在复染铅与不复染铅这两种情况下对超薄切片样品进行3种不同染色剂的电子染色,之后在透射电子显微镜下观察比较其不同之处。这3种不同的染色剂分别是醋酸双氧铀、0.05%乌龙茶提取物以及0.1%乌龙茶提取物。首先将带有超薄切片样品的铜网悬浮于不同的待比较染液中10?15 min,若需进一步用柠檬酸铅复染,则将经3次蒸馏水冲洗过后的铜网再次悬浮于柠檬酸铅染液中8?10 min。【结果】复染铅的情况下,在透射电子显微镜下无论是大肠杆菌还是金黄色葡萄球菌,利用3种电子染色剂进行染色的结果均非常相似。【结论】实验结果表明,在观察细菌结构中,乌龙茶提取物可以替代醋酸双氧铀进行透射电子显微镜样品的电子染色。     

卷曲乳杆菌对三种结肠上皮细胞的粘附性

目的 研究卷曲乳杆菌对3种结肠上皮细胞（SW480细胞、SW620细胞、LOVO细胞）的粘附性。方法 将处于对数生长期的卷曲乳杆菌A7分别与SW480细胞、SW620细胞、LOVO细胞进行体外粘附试验,革兰染色后显微镜观察卷曲乳杆菌A7对3种结肠上皮细胞的粘附结果并计数。结果 卷曲乳杆菌A7对3种结肠上皮细胞的粘附均具有显著性,其中对于SW480细胞和LOVO细胞的粘附性明显高于SW620细胞。结论 卷曲乳杆菌A7对SW480细胞、SW620细胞、LOVO细胞均具有较强的粘附性,提示该菌株有望成为肠道益生菌的新成员。     

恢复阴道微生态对复发性老年性细菌性阴道病的疗效观察

目的 探讨用乳酸菌阴道胶囊恢复阴道微生态对提高复发性老年性细菌性阴道病的治愈率,降低复发率的临床疗效观察。方法 120例复发性老年性细菌性阴道病患者随机分成两组,对照组60例,研究组60例。对照组使用甲硝唑联合雌三醇乳膏,连续使用7 d;研究组是在对照组基础上再连续使用乳酸菌阴道胶囊和雌三醇乳膏10 d,停药后一周进行妇科检查及阴道分泌物复查,并对两组症状改善情况进行比较,停药后第1、2、3个月各随访一次,比较两组复发情况。结果 研究组患者临床症状改善情况明显好于对照组,差异有统计学意义（Ps<0.05）。研究组治疗后第1、2、3个月复发率分别为0.00%,5.00%,5.00%,对照组第1、2、3个月复发率分别为11.67%,20.00%,25.00%。研究组复发率明显低于对照组,两组比较Ps<0.05,差异有统计学意义。结论 在复发性老年性细菌性阴道病治疗中给予乳酸菌阴道胶囊恢复阴道微生态,可明显提高治愈率,降低复发率。     

降胆固醇乳酸菌的筛选和分析比较

目的 比较7株乳酸菌各项生理特性,筛选高效、安全降解胆固醇的益生菌株,为后期开发应用奠定基础。方法 对选定菌株依次进行体外降胆固醇、胆盐水解酶（BSH）活力、人工胃肠液及胆盐耐受性、细胞粘附性能的测定和比较,并分析抗生素耐药性和抑制病原菌活性,最后利用16S rRNA基因测序确定细菌种属。结果 不同菌株各项生理指标存在差异。其中菌株ZL-2、JQI-7和PC-26的BSH酶活分别为0.010、0.015和0.030 U,可高效清除体外胆固醇,3株菌体外降解胆固醇率在58%以上;并且耐酸、耐胆盐,具备较好的HT-29细胞粘附性,不存在抗生素耐药性,可有效抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌生长。结论 菌株ZL-2、JQI-7和PC-26满足降胆固醇益生菌株的生物学特性,可用于进一步研究和开发。     

抗生素使用整治后尿路感染病原菌分布及药敏结果分析

目的 调查尿路感染患者尿液标本中病原菌的分布及其耐药状况分析,以促进临床合理选择抗生素,降低细菌的耐药率。方法 回顾性分析2010年至2014年门诊及住院患者9 674例尿液培养阳性标本,采用WHONET5.6软件对药敏结果进行统计分析。结果 9 674株细菌中,检出率排在前5位的分别是大肠埃希菌（32.63%）、粪肠球菌（10.56%）、肺炎克雷伯菌（8.75%）、热带念珠菌（6.63%）、奇异变形杆菌（5.82%）。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星有较高的敏感率;粪肠球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺的平均耐药率分别为5.1%、4.6%、4.6%,且耐药率有下降的趋势（P<0.05）;热带念珠菌对5-氟胞嘧啶和两性霉素B的平均耐药率为3.4%、2.2%,对5-氟胞嘧啶的耐药率有下降趋势（P<0.05）,对两性霉素B的耐药率有升高趋势（P<0.05）。结论 5年间尿路感染病原菌以革兰阴性菌为主,经过整治后大部分抗菌药物的耐药率有下降趋势。     

肺部菌群研究的方法学进展

菌群在促进人类健康方面发挥着重要的作用,而人体菌群紊乱可导致或加剧多种疾病。由于肺部菌群和肺部病变在空间上重叠,二者可能存在更紧密的联系。有研究者以肺部菌群为切入点,探索肺部疾病和健康的关系。但目前关于肺部菌群的检测技术和送检样本类型等实验实施过程中涉及的方法学问题尚未达成共识,样本污染问题在收集和测序过程中出现的频率越来越高,降低了研究的科学性和说服力。因此,为使研究者了解肺部菌群研究的方法学进展,避免陷入实验设计和方法选择的误区,本文就该领域的主要研究技术和影响肺部菌群检测结果的因素作一综述。

     

基于高通量测序技术对山羊盲肠细菌多样性的分析

【背景】由于反刍动物特殊的生理结构,以往研究者主要集中对其瘤胃微生物的结构与组成进行了大量研究,严重忽略了盲肠微生物在营养物质消化和肠道健康方面发挥的重要作用。【目的】采用高通量测序技术分析山羊盲肠细菌的多样性及菌群结构。【方法】选用12只10月龄健康母羊,其平均体重为20.70±1.60kg,饲喂20d后,采集每只山羊的盲肠内容物,提取微生物总DNA,用细菌通用引物对细菌16S rRNA基因的高可变区进行PCR扩增,利用Illumina MiSeq平台对扩增子进行高通量测序,并用QIIME等软件对测序序列进行生物信息学分析。【结果】山羊盲肠微生物测序共获得813 496条有效序列与6 883个OTU,并且稀释曲线和Coverage指数反映此次测序结果比较全面的覆盖了山羊盲肠微生物群落。α多样性和β多样性分析表明,山羊个体之间盲肠微生物的多样性存在差异。在门水平,各样品的优势菌门均为厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes);属水平,核心菌群由梭菌属(Clostridium)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)和6个未分类的细菌组成。PICRUSt基因预测表明,山羊盲肠微生物以代谢功能为主,主要包括:碳水化合物代谢、氨基酸代谢、能量代谢和脂质代谢等。【结论】山羊盲肠与瘤胃细菌的多样性存在显著差异,与粪便微生物组成相似;与单胃动物相比,两者盲肠微生物的组成既有共性,也存在差异。     

青少年痤疮面部皮肤微生物群落结构变化

【背景】青少年痤疮是一种最常见的慢性炎症性损容性皮肤病,与痤疮丙酸杆菌的异常增殖有关。【目的】探究痤疮皮损区与附近无明显皮损区微生物组成与健康对照的差异,为从微生态角度防治痤疮提供理论基础。【方法】利用细菌16S rRNA基因V1-V2区和真菌TIS1高通量测序技术分析北京地区16岁青少年面部痤疮皮肤细菌和真菌群落结构,将痤疮皮损区与附近无明显皮损区微生物组成与健康组进行比较,寻找差异菌群。【结果】痤疮患者面部皮损区与附近无明显皮损区细菌多样性(Shannon指数)较健康对照组显著性降低(P0.001),主要与丙酸杆菌(痤疮丙酸杆菌)和葡萄球菌(表皮葡萄球菌PM221)显著性上升相关,而痤疮皮损区与附近未明显皮损区细菌组成无显著性差异。痤疮患者皮损区与附近无明显皮损区较健康对照组真菌丰富度(Chao1指数)显著性上升(P0.05),与限制性马拉色菌的显著上升相关。【结论】面部皮肤微生物变化与青少年痤疮的发生相关。本研究为从微生物角度防治痤疮提供理论依据。     

环境中生物膜的菌群结构与污染物降解特性

生物膜是细菌最常见的生长方式。结构有序、功能分化的生物膜群落为内部细菌提供在不利环境中生存的庇护,其环境功效也日益受到关注。本文综述了多种环境中微生物与不同材料表面相互作用、进而发展为生物膜的机制;介绍了环境工程领域中生物膜的先锋菌种和菌群结构动态变化;介绍了生物膜在污染环境中的抗逆与降解特性。     

Autolysins are direct involved in the bactericidal effect caused by penicillin in wild type and in tolerant pneumococci

The two pneumococcal autolytic enzymes (an N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase and an endo-beta-1,4-N-acetylglucosaminidase) are directly involved in the penicillin-induced killing of Streptococcus pneumoniae. The activity of these lytic enzymes was efficiently controlled in tolerant mutants under physiological conditions.