麦红吸浆虫唾腺EST-SSRs的信息分析及分子标记筛选

昆虫EST资源库的扩充为开发新的分子标记提供了宝贵的资源。本研究对NCBI的EST数据库中来源于麦红吸浆虫Sitodiplosis mosellana唾腺的1 217条EST序列进行了unigene组装、 SSR信息分析和EST-SSR分子标记筛选。结果表明： 在1 047个unigenes中共找到141个SSR位点, 分布于106个（10.12%）unigenes中, 平均每3.49 kb出现一个SSR位点。在1~6碱基重复基元中, 1~3碱基是主要重复类型, 占总SSR的97.16%以上。A/T（31.21%）, AC/GT（15.60%）和AAC/GTT（9.22%）分别是单、 双和三碱基中占优势的重复基元类型。利用Primer Premier 5.0软件对查找的EST SSRs进行引物设计, 并以麦红吸浆虫基因组DNA为模板, 对从中选出的26对SSR引物进行多态性检测。结果有20对（76.92%）引物能扩增出清晰的目的条带, 并且其中9对（45%）引物表现出多态性。多态性分析结果表明, 从9对EST-SSR引物中, 共检测到51个等位基因, 平均每个位点含有等位基因数为5.67, 平均期望杂合度为0.65, 平均多态信息含量为0.60。本研究能够为今后麦红吸浆虫的种群遗传结构与遗传多样性研究提供帮助。     

鲫幼鱼耳石荧光标记效果

为确认茜素络合物对鲫（Carassius auratus）耳石进行有效标记的可行性,以便为鲫甚至其他鲤科鱼类标志放流技术的开发及效果评估提供一定的借鉴,本研究以孵出后90 d的鲫幼鱼为研究对象,设置单一浓度（100 mg/L）的茜素络合物浸泡标记5 d,分析茜素络合物在耳石上的沉积情况以及不同耳石在不同后续饲养天数的动态变化。结果表明,矢耳石、微耳石和星耳石上在可见光、绿色和蓝色激发光下都检测到了良好的茜素络合物标记环,标记率和存活率均为100%。但不同耳石的茜素络合物标记效果不同,荧光下,星耳石的标记效果最显著,微耳石次之;可见光下,微耳石的标记效果最好,星耳石次之。随着后续饲养天数的延长,可见光下标记逐渐减弱,至20 d时基本消失,而在绿色和蓝色激光下标记环荧光强度无减弱迹象,能长久保持,且在蓝色激发光下标记环更易被观测到。上述结果结合鲫生长、存活和行为正常等情况综合显示,在100 mg/L茜素络合物溶液中浸泡标记鲫幼鱼5 d,其耳石可以获得满意的标记效果。     

花椰菜与黑芥种间体细胞杂种的获得和鉴定

利用非对称体细胞杂交技术,获得芸薹属花椰菜（Brassica oleracea var．botrytis）与黑芥（B．nigra）的种间杂种,实现了野生种质抗病基因向甘蓝类蔬菜作物的渗透。以具有良好再生能力的花椰菜下胚轴原生质体作为融合受体,具有抗黑腐、黑胫和根肿病优良性状的黑芥叶肉原生质体作为融合供体,用不同强度的UV射线处理后,利用PEG方法诱导供、受体原生质体融合。培养后获得170棵再生植株。选取来自40个不同愈伤组织的40棵单株进行形态学观察及RAPD和SRAP分子标记检测,结果表明其中30棵为体细胞杂种。染色体计数显示,约23％杂种植株的染色体数目小于供、受体染色体数之和。用流式细胞仪测定DNA含量显示,杂种植株DNA含量是受体的2—4倍,20％杂种植株DNA含量小于供、受体之和。     

草棉同源多倍体后代筛选及性状鉴定

多倍化是物种形成及植物育种的重要途径。以实验室前期合成的草棉同源多倍体后代S₁为材料,对其进行流式细胞术、形态学、细胞学和SRAP分子标记鉴定。流式细胞倍性鉴定表明,以二倍体的荧光峰值作为参照,8株后代中有5株三倍体和3株四倍体。形态学鉴定表明,二倍体表现为株高、茎细、叶薄、叶片较小、叶色翠绿、花朵较小,三倍体和四倍体则表现为植株矮小、茎秆粗壮、叶片增厚和皱缩、叶片较大、叶色浓绿、花朵较大。细胞学鉴定表明,随着倍性的增加,气孔密度呈下降趋势,而气孔长度、叶绿体数和花粉粒直径均呈上升趋势;二、三和四倍体草棉在花粉母细胞减数分裂过程中均出现正常和异常行为,包括单分体(0.17%,2.50%和2.17%)、二分体(0.33%,0.67%和0)、三分体(4.17%,10.00%和2.33%)、正常四分体(94.83%,54.00%和73.67%)、异常四分体(0.17%,0.33%和0.83%)和多分体(0.33%,32.50%和21.00%);异常多分体均不能形成正常花粉粒,所以三者的正常花粉粒所占比例分别为95.33%、58.83%和77.67%。SRAP分子标记鉴定...     

用中性红标记酵母原生质体初探

用２％蜗牛酶处理酵母细胞６０分钟,啤酒酵母Ｙ２９的原生质体形成率为９０％,再生率为９．５％;糖化酵母ＩＢ的原生质体形成率为８６％,再生率为１２％。用５００ｐｐｍ中性红染液对Ｙ２９菌株的整细胞和原生质体染色１５分钟,细胞的着色率为８４％,存活率为１２％,而原生质体的着色率为７５％,再生率为６．４％,经染色后的原生质体体积缩小,在交变电场中排队所需的场强电降低。     

基于多尺度标记优化分水岭方法的油茶冠幅提取

针对尺度对地物空间结构的限制以及传统分水岭分割易产生树冠过分割等问题,选择长沙县明月村油茶基地为研究区,提出一种基于多尺度标记优化分水岭分割油茶树冠的方法.首先使用高分辨率无人机影像采集图像,分析影像特征,构建油茶分类体系,提取油茶林分布区域.其次,运用多尺度区域迭代增长方法提取树冠标记,将标记应用于多阈值尺度的分水岭...     

钙调蛋白的自旋共振研究:拮抗剂和它的相互作用

利用碘乙酰胺氮氧自由基标记钙调蛋白研究了它与三氟拉嗪(TFP)、酸枣仁皂甙A(JuA)的相互作用。结果表明,每分子CaM分别至少可以结合两分子的TFP及JuA,它们的作用影响了CaM上的Met残基(主要是71,72和76)的环境,使反应自由基运动自由度的旋转相关时间τR值下降。据τR变化的趋势,推测TFP和JuA都是通过疏水作用结合到CaM上的疏水沟区,但两者的结合位点可能不同。     

利用分子标记定位农垦58S的光敏核不育基因

对农垦５８Ｓ（Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａｓｐ．ｊａｐｏｎｉｃａ）／大黑矮生标记基因系ＦＬ２组合组建可育集团和不育集团,并以亲本为对照进行了ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ和双引物ＲＡＰＤ分析,结果第１２染色体上的一个单拷贝标记Ｇ２１４０与光敏核不育基因连锁遗传,二者间的遗传图距为１４．１ｃＭ（ｃｅｎｔｉｍｏｒｇａｎ）。在筛选过的１０４０个随机单引物和１９０个双引物中,仅引物ＯＰＡＵ１０扩增出与光敏核不育基因连锁的１．５ｋｂＤＮＡ片段,回收、克隆该ＤＮＡ片段并制备探针,将其转换成共显性的ＲＦＬＰ标记并命名为ＯＰＡＵ１０１５００。分离群体连锁分析表明该标记与标记Ｇ２１４０紧密连锁,将农垦５８Ｓ的一对光敏核不育基因定位于第１２染色体上。     

与葡萄抗霜霉病基因紧密连锁的分子遗传标记

以种间杂交组合88-110［83-4-96（毛葡萄,抗霜霉病）×粉红玫瑰（欧洲葡萄,感霜霉病）］的F     

多基因抗性的QTL作图及其在作物持久性抗病育种上的应用

QTL作图已成为解析生物复杂性状遗传基础和基因座之间互作机制的一种有效的研究工具。多基因抗性没有明显的生理小种特异性,一般表现为数量性状。多基因抗性的QTL作图在植物持久性抗病育种中有重要的应用价值,有助于分离到广谱性抗病基因。从作图群体(F1、F2、DH、RIL、BIL和NIL)构建、抗性表型测定和标记辅助育种等方面论述了多基因抗性QTL作图的最新研究进展。