柯萨奇病毒B3型3D蛋白抗体的制备

肠道病毒3D蛋白是其RNA聚合酶。柯萨奇病毒B3型(coxsackievirus B3,CVB3)主要感染心脏,其3D蛋白在心肌表达中的时序和分布尚不清楚。本研究将通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的CVB 3D片段插入pET28a(＋)的表达框,获得pET28a(＋)-3D重组质粒。异丙基 β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导pET28a(＋)-3D表达3D-His蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后,切胶,获得3D-His蛋白。3D-His蛋白加佐剂免疫新西兰大白兔制备3D蛋白多克隆抗体,蛋白免疫印迹法检测抗体效价及特异性。结果显示,本研究获得了高效价且特异性好的抗CVB3 3D蛋白抗体,可用于CVB3 3D蛋白功能的后续研究。     

水稻Argonaute 2蛋白的原核表达与多克隆抗体制备

为了制备水稻Argonaute 2(AGO2)的多克隆抗体,该研究采用RT-PCR扩增OsAGO2蛋白165~401aa片段和440~570aa片段的编码序列,并构建了2个原核表达载体。诱导表达重组蛋白后注射家兔,制备了相应的多克隆抗体,最后利用Western blot初步分析水稻AGO2蛋白的表达模式。结果表明:成功构建2个表达载体,通过诱导获得了分子量约为30kD和23kD的重组蛋白。其中,以440~570aa片段为抗原所制备的多克隆抗体免疫印记效果较好。Western blot表明在水稻花药、愈伤组织及小穗中检测到OsAGO2表达。该研究为进一步深入探讨水稻OsAGO2基因的特性与功能奠定了基础。     

EikoBeal实时焚光定量PCR检测系统

<正>PikoReal实时荧光定量PCR检测系统硬件组合优越,光路设计稳定,反应速度超快,节省试剂和能源,是集高性能和低消耗于一身的新一代荧光定量PCR系统。从常规的病原体诊断到博大精深的基因组学研究,在呈现给您精确数据的同时,PikoReal让您的实验快速,省钱,安静无声。     

肺炎支原体肺炎患儿血清维生素A和维生素E营养状况

目的：探讨与研究肺炎支原体肺炎患儿机体维生素A和维生素E营养状况水平和临床意义。方法：选择就诊于我院的肺炎支原体肺炎患儿共100例作为观察组,同期就诊于我院的非肺炎支原体肺炎患儿为对照组,分析比较两组患儿的维生素A和维生素E营养状况及临床治疗指标。结果：观察组患儿出现维生素A和维生素E缺乏情况明显高于对照组比率,患儿血清维生素A和维生素E显著低于对照组,差异显著（P＜0.05）;观察组患儿的咳嗽消失时间、平均住院时长和住院费用显著高于对照组,观察组CRP水平明显高于对照组（P＜0.05）;观察组组内分析,维生素A、维生素E缺乏患儿的咳嗽消失时间、平均住院时长和住院费用明显高于对照组,CRP水平高于对照组（P＜0.05）。结论：肺炎支原体肺炎患儿血清维生素A和维生素E水平多处于缺乏状况,可引起临床住院时间延长和费用增加,临床应注意监测以促进患儿康复。     

MALDI-TOF质谱法检测单核苷酸多态性

随着基因数据的增加 ,使全面深入了解个体和群体间基因组的变异或多态性已成为可能。单核苷酸多态性 (ｓｉｎｇｌｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ,ＳＮＰ)指ＤＮＡ序列中单个核苷酸的变异引起的多态 ,它占已知多态性的80 %。据估计 ,人类基因组中每 1 0 0 0个核苷酸就有一个ＳＮＰ ,人类 30亿碱基中共有 30 0万以上的ＳＮＰ ,其中约有 2 0万存在于编码区 ,称作ｃＳＮＰ(ｃｏｄｉｎｇＳＮＰ)。ＳＮＰ研究具有重要意义 :第一 ,存在于蛋白质编码区的ｃＳＮＰ可能与人类遗传疾病有关 ,对这些ＳＮＰ等位基因的检测有助于找到致…     

植物表达载体pKC—3的构建及大分子DNA连接策略

以根癌农杆菌双元载体ｐＣＡＭＢＬＡ１３００为基础,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂－Ⅱ基因（ＰⅡ）、苏云金杆菌毒蛋白基因（Ｂ．ｔ ｃｒｙＩ（Ａ））及雪花莲外源凝集素基因（ＧＮＡ）的完整表达片段,构建了抗多种稻田害虫的表达载体ｐＫＣ－３,将其导入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４,可进一步用于水稻抗虫基因转化的研究。载体构建进程采用多次的大分子ＤＮＡ片段连接,总结出了一套适合大片段连接转化的可行策略。     

三个新2,2—二甲基苯并二氢吡喃类化合物的分离与鉴定

从中药三叉苦(Evodia lepta(Spreng.)Merr.)的地上部分分离鉴定了4个化合物。通过光谱解析和结构沟通的方法确定了它们的结构。其中3个为新化合物,依次命名为leptin A(Ⅰ)、leptin B(Ⅱ)和leptin C(Ⅲ)。另外一个已知化合物为异吴茱萸酮酚(Ⅳ)。     

A型肉毒毒素联合眼袋整形术对眼周皮肤松弛患者的疗效观察

目的:探讨A型肉毒毒素联合眼袋整形术对眼周皮肤松弛患者的治疗效果和对患者满意度的影响,为临床提供参考。方法:选取2015年6月至2016年6月间因眼周皮肤松弛来我院治疗的患者60例。患者根据自身意愿选择治疗方式,按其选择的治疗方式分组为对照组(n=28)和治疗组(n=32)。对照组采用单纯眼袋整形术进行治疗,治疗组采用A型肉毒毒素联合眼袋整形术治疗。治疗后对两组患者均随访6个月。观察记录患者手术后鱼尾纹的改善效果、眼袋减轻的情况和眼周皮肤光泽的改善效果。观察患者并发症的发生情况。随访结束时采用自制的满意度调查问卷对患者满意度进行调查。结果:经过治疗,治疗组鱼尾纹改善率为100.00%,明显高于对照组的60.71%;治疗组眼袋改善率为96.88%,明显高于对照组的32.14%;治疗组皮肤光泽改善率为87.50%,明显高于对照组的53.57%,差异均具有统计学意义(均P0.05)。治疗后,两组患者切口红肿、少量分泌物、小血肿的发生率比较无明显差异(P0.05),治疗组术眼红肿与外眦部切口瘀痕发生率明显少于对照组(P0.05)。治疗组总满意率为93.75%(30/32),明显高于对照组的67.86%(19/28),差异具有统计学意义(P0.05)。结论:A型肉毒毒素与眼袋整形术联合应用在眼周皮肤松弛的治疗上有较好的疗效和安全性,能明显降低患者术眼红肿与外眦部切口瘀痕的发生,并提高患者满意率,值得在临床上推广应用。     

人类免疫缺陷病毒潜伏库定量检测技术的研究进展

以静息CD4~+T细胞为主的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)潜伏库的清除已成为治愈HIV-1感染的主要障碍,人们迫切需要建立一种高通量、可靠的、高灵敏度的方法来定量检测病毒潜伏库的真实大小。本文就目前关于HIV潜伏库的多种定量检测方法进行综述。