~（60）Co－γ射线诱变柠檬酸产生菌黑曲霉Co9－6的研究

本试验采用￣（６０）Ｃｏ－γ射线对柠檬酸产生菌黑曲霉Ｃｏ９－６进行辐射,经两次处理后选育出Ｌ１２１７和Ｌ８０１两株优良柠檬酸产生菌。中试结果表明菌株Ｌ１２１７较Ｌ８０１更优：产酸率较菌株Ｃｏ９－６提高１７．６％、发酵周期缩短１３．４％、对糖转化率提高１３．３％。     

通过染色体外同源重组建立乳腺中表达外源基因的转基因小鼠

为研究染色体外重组方法在创建转基因动物中的应用,选取牛asl酪蛋白基因的5′及3′侧翼区和氯霉素乙酰化酶编码区,构建了两个具有3 kb相互重叠的融合基因.将这两个DNA片段末端脱磷酸后,以摩尔比1:1的比例混合,通过显微注射导入小鼠受精原核,最后获得了11个品系的转基因小鼠.对其中10个品系的小鼠的整合分析表明,所注射的两个DNA片段均发生了染色体外同源重组,而且除了 1个品系的小鼠丢失了大约1kb的序列外,其余品系小鼠的重组产物与预想的结构符合.在当代和后代的转基因小鼠乳汁中均可测到氯霉素乙酰化酶的活性.这表明融合基因在转基因小鼠乳腺中得到表达和分泌,也说明显微共注射两个相互重叠的基因片段是建立转基因动物的一个可行途径.     

胸腺瘤组织Slug、TdT、SOX9蛋白表达与临床病理特征及预后的关系分析

摘要 目的：分析锌指转录因子（Slug）、末端脱氧核糖核苷酸转移酶（TdT）、Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9（SOX9）蛋白表达与胸腺瘤患者临床病理特征及预后的关系。方法：选择2016年5月至2018年11月在本院接受手术切除的113例胸腺瘤组织及癌旁组织,利用免疫组织化学法测定Slug、TdT、SOX9蛋白阳性表达,分析Slug、TdT、SOX9蛋白表达与胸腺瘤患者临床病理特征、预后的关系。结果：胸腺瘤组织Slug、TdT、SOX9蛋白阳性表达率均高于癌旁组织（P＜0.05）;胸腺瘤组织Slug、TdT、SOX9蛋白阳性表达在患者年龄、性别、肿瘤直径、是否合并重症肌无力、是否伴有大血管侵犯方面比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;胸腺瘤组织Slug、TdT、SOX9蛋白阳性表达在Masaoka-Koga分期、WHO分型方面比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;胸腺瘤组织Slug、TdT、SOX9蛋白阳性表达与Masaoka-Koga分期、WHO分型呈正相关（P＜0.05）;113例胸腺瘤患者随访5年总生存率为81.42%（92/113）,Slug阳性组5年生存率低于Slug阴性组（70.18% VS 92.86%）,TdT阳性组5年生存率低于TdT阴性组（79.790% VS 89.57%）,SOX9阳性组5年生存率低于SOX9阴性组（79.35% VS 90.48%）（χ²=9.669、9.515、17.008,P＜0.05）;Cox比例风险回归模型分析发现,Masaoka-Koga分期（Ⅲ期/Ⅳ期）、WHO分型（B2/B3）、Slug蛋白阳性表达、TdT蛋白阳性表达、SOX9蛋白阳性表达是影响胸腺瘤患者预后的独立危险因素（HR:3.518、2.921、4.536、1.402、2.921,P＜0.05）。结论：胸腺瘤组织Slug、TdT、SOX9呈高表达,三者蛋白表达与患者Masaoka-Koga分期、WHO分型有关,且是影响胸腺瘤患者5年生存率的独立危险因素。     

去泛素化酶USP29调控CBX6蛋白质稳定性

多梳家族(polycomb group,PcG)是一类控制细胞命运和胚胎发育的转录抑制因子,主要以转录抑制复合物(polycomb repressive complex,PRC)的形式发挥功能.染色体盒蛋白质同源物6(chromobox protein homolog 6,CBX6)是PRC1的核心蛋白质亚基之一,在基...     

CD38基因敲除的淋巴瘤细胞株构建

摘要 目的：构建Luc⁺CD38^-的Raji细胞株,并进行功能的初步验证,为后期探索淋巴瘤细胞CD38位点免疫逃逸现象奠定基础。方法：通过CRISPR-cas9技术和PiggyBac(PB)转座子系统,对Luc⁺Raji细胞的CD38基因位点进行敲除,构建Luc⁺CD38^-Raji细胞株,使用流式细胞术检测与Luc⁺CD38^-Raji细胞株以1：1的比例共孵育CD19 CAR-T和CD38 CAR-T以及未转导的原始T细胞表面活化因子CD69的表达水平,荧光素酶检测法检测上述几组效应细胞对Luc⁺CD38^-Raji细胞株的杀伤效率。结果：成功构建Luc⁺CD38^-Raji细胞,激活实验结果显示,CD19 CAR-T与CD38 CAR-T均可以被Luc⁺Raji细胞激活。而Luc⁺CD38^-Raji19号单克隆细胞由于缺失CD38的表达,仅能够激活CD19 CAR-T。杀伤实验结果显示,两种CAR-T细胞均能够对Luc⁺Raji细胞进行杀伤,而CD38 CAR-T对Luc⁺CD38^-Raji19号单克隆细胞的杀伤效率与原始的T细胞相似。结论：成功构建了Luc⁺CD38^-Raji细胞株,为后期探索淋巴瘤CD38位点免疫逃逸现象奠定基础。     

转基因动物技术的研究进展

转基因动物是其基因组内稳定整合了所导入的外源基因的动物。目前转基因实验动物体系的研究,主要集中在导入方法和提高整合和表达效率两个方面。本文对这两个方面的进展作一综述。 Abstract：Transgenic animals are those whose genome have foreign genes integrated. Nowadays, researches concentrated in the ways of gene transfer and of improving efficiency of integration and expression.The paper has con cluded these two aspects.