羰基化蛋白质组学研究规律运动调控大鼠脑纹状体细胞凋亡的作用与适应性机制

为研究探讨规律运动对老年大鼠纹状体蛋白质氧化应激与细胞凋亡的影响,通过差异羰基化蛋白质组学特征分析,筛选靶标蛋白质并阐明其作用机制.将24只健康雄性23月龄老年大鼠随机分为静息组(Con-SED)和规律运动组(Aero-EXE).采用运动强度相当于最大摄氧量(VO2max)60％～65％逐渐递增到70％ ～75％的10...     

右美托咪定上调HIF-1α抑制NLRP3炎性体的激活减轻糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤

摘要 目的：探讨右美托咪定（DEX）对糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能分子机制。方法：将60只8周龄的SPF级C57BL小鼠高脂喂养6周,第7周通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）45 mg/kg/天,1次/天,连续5天,建立2型糖尿病模型,建模后采用随机数字表法分为假手术组（sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）抑制剂2ME2组（2ME2组）、DEX组、DEX+2ME2组（DM组）,每组12只。假手术组仅切开皮肤后缝合,其余四组开胸结扎冠状动脉左前降支,缺血60 min后松开结扎线结,再灌注120 min建立缺血再灌注损伤模型。于再灌注120 min时抽取小鼠腹主动脉血,ELISA检测血清肌钙蛋白I（cTnI）、白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度,随后处死小鼠,分离左心室,HE染色观察心肌组织形态结构,Western blot检测HIF-1α、nod样受体蛋白3（NLRP3）的表达量,再灌注24 h时超声心动图评估心功能。结果：与sham组相比,I/R组、2ME2组、DEX组、DM组cTnI、IL-1β,TNF-α浓度明显升高,心肌组织结构紊乱,心肌纤维断裂增加,心肌细胞明显肿胀,炎性细胞浸润增加,心肌组织NLRP3表达量显著增加,每搏量（SV）、射血分数（EF）%、短轴缩短率（FS）%明显下降（P＜0.05）;与I/R组相比,DEX组、DM组HIF-1α表达量明显增加,NLRP3表达明显降低,cTnI、IL-1β,TNF-α浓度明显下降,心肌组织结构明显改善,炎性细胞浸润明显减少,SV,EF、FS明显升高（P＜0.05）;与DEX组相比,DM组HIF-1α表达量明显降低,NLRP3表达量明显增加,cTnI、IL-1β、TNF-α浓度明显增加,心肌组织结构紊乱,心肌纤维断裂增加,心肌细胞明显肿胀,炎性细胞浸润增加,SV,EF、FS明显降低（P＜0.05）。结论：DEX可能通过上调心肌组织HIF-1α的表达,抑制NLRP3炎性体的激活,减轻心脏炎症反应,改善糖尿病小鼠心肌缺血再灌注损伤。     

茵陈五苓散联合利拉鲁肽对肥胖型2型糖尿病患者糖脂代谢、胰岛素敏感性和氧化应激的影响

摘要 目的：探讨茵陈五苓散联合利拉鲁肽对肥胖型2型糖尿病（T2DM）患者糖脂代谢、胰岛素敏感性和氧化应激的影响。方法：选取2021年12月~2022年12月期间广州中医药大学附属佛山中医院收治的160例痰湿内蕴型肥胖T2DM患者。根据随机数字表法将患者分为对照组（利拉鲁肽治疗,80例）和研究组（茵陈五苓散联合利拉鲁肽治疗,80例）。对比两组疗效、糖脂代谢指标、肥胖相关指标、胰岛素敏感性、氧化应激和不良反应发生情况。结果：与对照组相比,研究组的临床总有效率更高（P<0.05）。研究组治疗后体质量指数（BMI）、空腹血糖（FBG）、腰臀比（WHR）、餐后2 h血糖（2hPG）、丙二醛（MDA）、糖化血红蛋白（HbAlc）、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、总胆固醇（TC）、黄嘌呤氧化酶（XO）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）较对照组低（P<0.05）。治疗后研究组稳态模型胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、超氧化物歧化酶（SOD）高于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比未见差异（P>0.05）。结论：茵陈五苓散联合利拉鲁肽治疗肥胖型T2DM患者疗效确切,可调节糖脂代谢水平,降低胰岛素敏感性,减轻氧化应激,且具有一定安全性,值得临床借鉴应用。     

胃饥饿素对哮喘大鼠气道组织损伤、血清Th1/Th2细胞因子以及TLR4/NF-κB信号通路的影响

摘要 目的：探讨胃饥饿素介导Toll样受体4（TLR4）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路对哮喘模型大鼠的气道组织损伤和血清Th1/Th2细胞因子的影响机制。方法：选择健康Wistar雄性大鼠平均7周龄（体重平均220 g）共40只,随机分为4组,每组10只,分别为对照组、模型组、胃饥饿素低浓度组（1 μmol/L）和高浓度组（5 μmol/L）。除了对照组,其他三组复制急性哮喘模型,胃饥饿素低浓度组和高浓度组腹腔注射10 mL/kg胃饥饿素,对照组和模型组注射等量生理盐水。造模结束24 h 后评估各组大鼠的哮喘症状评分,检测血清中性粒细胞与淋巴细胞百分比,计算中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）,ELISA法检测血清IgE、Th1型细胞因子IFN-γ和Th2 型细胞因子 IL-4,计算IFN-γ/IL-4,HE染色肺组织计算气道壁厚度和气管平滑肌厚度,评估气道损伤程度,Western blot法检测肺组织TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量。结果：与对照组相比,模型组大鼠哮喘症状评分、淋巴细胞百分比、IgE、IL-4、气道壁厚度和气管平滑肌厚度、TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量均显著增加,而NLR、IFN-γ和IFN-γ/IL-4显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,胃饥饿素低浓度组和高浓度组大鼠哮喘症状评分、淋巴细胞百分比、IgE、IL-4、气道壁厚度和气管平滑肌厚度、TLR4和NF-κB p65蛋白相对表达量明显降低,而NLR、IFN-γ和IFN-γ/IL-4明显升高（P＜0.05）。与低浓度组相比,高浓度组上述指标也存在显著差异（P＜0.05）。结论：胃饥饿素可能通过抑制TLR4/ NF-κB信号通路活性,进而改善哮喘症状,降低炎症反应,调节Th1/Th2平衡,减轻气道组织损伤,且表现出一定的浓度依赖性。胃饥饿素有望成为临床干预哮喘的新途径。     

TMED10对骨关节炎中TGF-β/Smads信号通路的影响

摘要 目的：探究跨膜P24转运蛋白10（TMED10）对骨关节炎中转化生长因子-β（TGF-β）/Smads信号通路的影响。方法：将大鼠软骨细胞分为Control组、IL-1β组、NC-sh+IL-1β组、TMED10-sh+IL-1β组、NC-OE+IL-1β组和TMED10-OE+IL-1β组。Control组和IL-1β组细胞不进行转染处理,NC-sh+IL-1β组、TMED10-sh+IL-1β组、NC-OE+IL-1β组和TMED10-OE+IL-1β组细胞分别转染NC-sh、TMED10-sh、NC-OE和TMED10-OE。转染后,除Control组之外,其他组软骨细胞均用白介素-1β（IL-1β）（10 ng/mL）处理24 h模拟OA软骨细胞的病理微环境。通过MTT法检测细胞增殖,通过TUNEL法检测细胞凋亡。采用前交叉韧带切断加内侧半月板部分切除法建立OA大鼠模型,将OA大鼠分为OA组、OA+NC-sh组和OA+TMED10-sh组（n=12）,Sham组（n=12）大鼠进行假手术操作。Sham组和OA组大鼠关节腔内注射40 μL生理盐水,OA+NC-sh组和OA+TMED10-sh组大鼠关节腔内分别注射40 μL的NC-sh和TMED10-sh（滴度为1×10⁹ TU/mL）,每周注射1次,共4周。采用番红O/固绿染色法评价膝关节软骨形态,采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡。采用RT-qPCR检测软骨细胞和大鼠关节软骨中TMED10的mRNA水平,采用Western blot检测软骨细胞和大鼠关节软骨中TMED10、TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Collagen II和MMP-13的蛋白表达水平。结果：与Control组比较,IL-1β组TUNEL阳性率、TMED10 mRNA和TMED10、MMP-13蛋白水平均升高（P<0.05）,相对细胞活力以及TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II的蛋白水平均降低（P<0.05）。与IL-1β组和NC-sh+IL-1β组比较,TMED10-sh+IL-1β组TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平和TMED10、MMP-13的蛋白水平均降低（P<0.05）,相对细胞活力以及TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II的蛋白水平均升高（P<0.05）。与IL-1β组和NC-OE+IL-1β组比较,TMED10-OE+IL-1β组TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平和TMED10、MMP-13的蛋白水平均升高（P<0.05）,相对细胞活力以及TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II的蛋白水平均降低（P<0.05）。与Sham组比较,OA组大鼠的OARSI评分、TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平以及TMED10和MMP-13的蛋白水平均升高（P<0.05）,TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II蛋白水平均降低（P<0.05）。与OA组和OA+NC-sh组比较,OA+TMED10-sh组大鼠的OARSI评分、TUNEL阳性率、TMED10 mRNA水平以及TMED10和MMP-13的蛋白水平均降低（P<0.05）,TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3和Collagen II蛋白水平均升高（P<0.05）。结论：本研究表明TMED10可能通过抑制TGF-β/Smads信号通路导致软骨细胞丢失和软骨退变,TMED10/TGF-β/Smads信号通路可能是治疗OA的新靶标。     

血管生成素样蛋白4和Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6与急性呼吸窘迫综合征严重程度的关系及对预后的评估效能研究

摘要 目的：分析血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)和Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6(KL-6)与急性呼吸窘迫综合征严重程度的关系及对预后的评估效能。方法：选择我院自2020年1月至2022年12月收治的120例急性呼吸窘迫综合征患者作为研究对象（观察组）,根据氧合指数（PaO₂/FiO₂）分为轻度组、中度组和重度组;另选120例非急性呼吸窘迫综合征患者作为对照组。检测所有患者血清ANGPTL4和KL-6的表达水平,分析血清ANGPTL4和KL-6与APACHE Ⅱ评分、PaO₂/FiO₂的关系,使用受试者工作特征曲线（ROC）下面积（AUC）评价血清ANGPTL4联合KL-6对急性呼吸窘迫综合征预后的评估效能。结果：对比对照组,观察组血清ANGPTL4、KL-6的表达水平均明显升高（P＜0.05）;血清ANGPTL4、KL-6的表达水平在轻度组、中度组和重度组中差异有统计学意义,且急性呼吸窘迫综合征越严重,升高越明显（P＜0.05）;经Pearson相关性分析,急性呼吸窘迫综合征患者血清ANGPTL4、KL-6的表达水平与PaO₂/FiO₂呈负相关,与APACHE Ⅱ评分呈正相关（P＜0.05）;经ROC曲线分析,血清ANGPTL4联合KL-6预测急性呼吸窘迫综合征患者入院28d内死亡的敏感度为90.14%、特异度为65.74%,AUC为0.900。结论：血清ANGPTL4、KL-6表达水平升高与急性呼吸窘迫综合征严重程度增大密切相关,两者联合在患者预后评估中具有一定价值,可作为判断病情及预后的辅助指标。     

血清IL-1β、FABP4、STRA6与2型糖尿病合并干眼症的关系研究

摘要 目的：探讨血清白细胞介素-1β（IL-1β）、脂肪酸结合蛋白4（FABP4）、视黄酸诱导基因6（STRA6）与2型糖尿病（T2DM）合并干眼症（DED）的关系。方法：选取2020年6月～2023年6月南京医科大学第四附属医院收治的T2DM合并DED患者129例（T2DM合并DED组）、单纯T2DM患者117例（单纯T2DM组）、85名体检健康志愿者（对照组）,根据DED病情程度将T2DM合并DED患者分为轻度组（61例）、中度组（36例）、重度组（32例）。采用酶联免疫吸附法检测血清IL-1β、FABP4、STRA6水平。通过多因素Logistic回归分析T2DM合并DED的影响因素,ROC曲线分析血清IL-1β、FABP4、STRA6水平对T2DM合并DED的预测价值。结果：T2DM合并DED组血清IL-1β、FABP4、STRA6水平高于单纯T2DM组、对照组,单纯T2DM组血清IL-1β、FABP4、STRA6水平高于对照组（P＜0.05）。重度组血清IL-1β、FABP4、STRA6水平高于中度组、轻度组,中度组血清IL-1β、FABP4、STRA6水平高于轻度组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示T2DM病程延长和糖化血红白蛋白、IL-1β、FABP4、STRA6升高为T2DM合并DED的独立危险因素,BUT升高为独立保护因素（P＜0.05）。血清IL-1β、FABP4、STRA6水平联合预测T2DM合并DED的曲线下面积为0.916,大于血清IL-1β、FABP4、STRA6水平单独预测的0.784、0.782、0.788。结论：T2DM合并DED患者血清IL-1β、FABP4、STRA6水平升高,是T2DM合并DED的独立危险因素,并且与DED病情严重程度相关。血清IL-1β、FABP4、STRA6联合检测对T2DM合并DED的预测价值较高。     

CYFRA21-1、MMP-3及CEA 和细胞学联合检查对恶性胸腔积液的诊断价值分析

摘要 目的：探讨细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）及癌胚抗原（CEA） 和细胞学联合检查对恶性胸腔积液的诊断价值。方法：选择2020年1月至2023年1月我院接诊的100例胸腔积液患者进行研究,并根据病理结果分为实验组47例（病理检查结果恶性）,对照组53例（病理检查结果良性）,分析血清CYFRA21-1、MMP-3及CEA 和细胞学水平变化情况及其的诊断价值。结果：实验组患者血清血清CYFRA21-1、MMP-3及CEA水平显著高于对照组,差异显著（P＜0.05）;实验组患者CYFRA21-1、MMP-3及CEA 和细胞学阳性率均显著高于对照组,差异显著（P＜0.05）;CYFRA21-1诊断恶性胸腔积液的AUC为0.989,95%CI为0.977~1.000;MMP-3诊断恶性胸腔积液的AUC为0.979,95%CI为0.964~0.994;CEA 诊断恶性胸腔积液的AUC为0.982,95%CI为0.967~0.997;细胞学诊断恶性胸腔积液的AUC为0.823,95%CI为0.766~0.879,联合检测时AUC为0.995,95%CI为0.990~1.000,较单独检测曲线下面积比较显著差异;且特异度、准确度均较单独检测更高。结论：CYFRA21-1、MMP-3及CEA 和细胞学联合检查可有效提高诊断恶性胸腔积液的准确性,临床应用价值高。     

2型糖尿病合并骨质疏松症患者外周血炎性因子表达与骨代谢、骨密度丢失的关系

摘要 目的：探讨2型糖尿病合并骨质疏松症患者外周血中炎性因子NLR、IL-1β、TNF-α与骨代谢指标骨密度、活性维生素D、PTH、ALP及生化指标FPG、2hPG、HbA1c、空腹C肽、BMI、血脂、血尿酸之间的关系,为该类患者的诊断和治疗提供参考。方法：选取2020年9月至2021年9月在本院内分泌科就诊的2型糖尿病合并骨质疏松症患者80例作为观察组,同时选取同期健康体检者80例作为对照组。比较两组患者的一般资料,采用ELISA法检测两组患者外周血中NLR、IL-1β、TNF-α的水平,采用双能X线吸收法（DEXA）检测两组患者的骨密度,采用放射免疫法检测两组患者外周血中活性维生素D、PTH的水平,采用生化分析仪检测两组患者外周血中ALP、FPG、2hPG、HbA1c、空腹C肽、BMI、血脂、血尿酸的水平。结果：观察组患者外周血中NLR、IL-1β、TNF-α的水平均高于对照组（P<0.05）,观察组患者骨密度低于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中活性维生素D水平低于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中PTH水平高于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中ALP水平高于对照组（P<0.05）,观察组患者外周血中FPG、2hPG、HbA1c水平高于对照组（P<0.05）,观察组患者空腹C肽水平低于对照组（P<0.05）,观察组患者BMI高于对照组（P<0.05）,观察组患者血脂异常率高于对照组（P<0.05）,观察组患者血尿酸水平高于对照组（P<0.05）。观察组患者外周血中NLR、IL-1β、TNF-α与骨密度呈负相关（P<0.05）,与活性维生素D呈负相关（P<0.05）,与PTH、ALP呈正相关（P<0.05）,与FPG、2hPG、HbA1c、空腹C肽、BMI、血脂、血尿酸无显著相关性（P>0.05）。结论：2型糖尿病合并骨质疏松症患者外周血中炎性因子NLR、IL-1β、TNF-α水平升高,可能与骨代谢紊乱和骨密度丢失有关,提示该类患者存在慢性低度炎症状态,应加强对其骨代谢和骨密度的监测和干预,以降低骨折风险和改善生活质量。     

Nrf2激动剂CDDO-Im对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪变性的影响

摘要 目的：探究Nrf2激动剂CDDO-Im对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪变性的作用。方法：33只雄性C57BL/6J小鼠随机分为两组：一组16只饲喂普通饲料,另一组17只饲喂高脂饲料建立肥胖模型。造模成功后将小鼠随机分成四组：普通饲料溶剂对照组（Control ND组）、普通饲料Nrf2激动剂组（Nrf2(+) ND组）、高脂饲料溶剂对照组（Control HFD组）和高脂饲料Nrf2激动剂组（Nrf2(+) HFD组）。分别给予Nrf2激动剂CDDO-Im和等体积溶剂灌胃干预6周后,检测各组小鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（T-CHO）和低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）。苏木素-伊红（HE）染色观察肝脏组织形态学变化。RT-qPCR检测肝脏Nrf2下游抗氧化基因Nqo1、Ho1和Gclc的mRNA表达水平,Western Blot检测肝脏NQO1、HO-1和GCLC的蛋白表达水平。结果：与正常小鼠相比,肥胖小鼠的体重、TG和LDL-C升高（P＜0.05）,肝脏脂肪变性增加,GCLC的蛋白表达水平降低（P＜0.05）。在肥胖小鼠中,与溶剂对照组相比,Nrf2激动剂组小鼠的体重、血清TG降低（P＜0.05）,肝脏脂肪变性减轻,Nqo1和Gclc的mRNA表达水平升高（P＜0.05）,NQO1和GCLC的蛋白表达水平升高（P＜0.05）。结论：Nrf2激动剂CDDO-Im可改善高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪变性,可能与Nrf2激动剂CDDO-Im激活抗氧化基因的表达来减轻肝细胞氧化应激有关。