定点突变优化信号肽对嵌合抗原受体T细胞功能的影响

信号肽(signal peptide, SP)参与调节嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构的分泌水平及跨膜易位过程,对嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)行使功能至关重要,本研究通过定点突变技术优化SP序列,并研究其对CD19-CAR-T杀伤功能的影响。首先,利用基因合成和分子克隆技术,构建含野生型SP (SP-wtY)、2种突变型SP (SP-muK或SP-muR)的靶向CD19的CAR载体;对构建成功的载体进行慢病毒包装,并使用慢病毒侵染T细胞,利用流式细胞术检测细胞的转染效率,钙黄绿素释放法检测对靶细胞的体外杀瘤能力,酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)技术检测2种细胞因子[干扰素-γ (interferon-γ, IFN-γ)和干扰素-α (interferon-α, TNF-α)]的分泌水平。结果显示,构建了野生型和信号肽突变的重组慢病毒质粒,慢病毒转导T细胞后,携带3种信号肽(SP-wtY、SP-muK或SP-muR)的CD19-CAR转染效率分别为33.9%、35.5%、36.8%。进一步杀伤实验显示,与SP-muK和SP-wtY细胞相比,SP-muR细胞的肿瘤杀伤效果显著提高,当效靶比为10:1时共培养24 h后,SP-muR组CAR-T细胞的细胞因子IFN-γ和TNF-α分泌水平显著高于SP-muK和SP-wtY组。本研究揭示信号肽N端正电荷数的增加可以提高CAR的表达效率和对CD19⁺靶细胞的杀伤作用,为CAR结构的优化改造和临床高效应用提供了科学依据。     

新型冠状病毒亚单位疫苗研究进展及现状*

自新型冠状病毒肺炎在2019年年末暴发以来,如何高效防控疫情一直是紧急的全球公共安全事件。疫苗是有效阻止病毒感染人体、保护高危人群免于疾病快速进展以及遏制疫情进一步扩大的手段之一,其中亚单位疫苗的主要成分为特定的病毒抗原蛋白或多肽,通过加入疫苗佐剂提高抗原的免疫原性。由于机体仅针对重组蛋白表面的特定抗原表位进行识别并产生抗体,因此亚单位疫苗具有较高的保护能力和安全性。通过对目前已上市及处于临床阶段的各类新型冠状病毒亚单位疫苗进行梳理,介绍了各类亚单位疫苗的抗原设计策略和佐剂选择、整体保护能力及研究进展,并对亚单位疫苗的应用及技术优势进行分析,期望能为亚单位疫苗研发及全球疫情防控提供参考。     

多层螺旋CT联合血清糖类抗原19-9、细胞角蛋白19片段抗原、Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的临床价值研究

摘要 目的：研究多层螺旋CT（MSCT）联合血清糖类抗原19-9（CA19-9）、细胞角蛋白19片段抗原（CYFRA21-1）、Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的临床价值。方法：选择2018年1月～2021年12月江苏省肿瘤医院收治的102例疑似食管癌患者。根据手术病理结果分为恶性组58例以及良性组44例,对所有受试者均进行MSCT扫描,比较两组各项MSCT影像学特征。检测并比较两组血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1表达水平。通过Logistic回归建立多指标联合应用的风险预测模型,应用受试者工作特征（ROC）曲线分析MSCT联合血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的效能。结果：恶性组MSCT特征表现为形态不规则、边界模糊病例数占比均高于良性组（均P＜0.05）。关联性检验P＜0.05,提示MSCT诊断方法和金标准病理方法显著关联;优势性检验P＞0.05,提示MSCT诊断方法和金标准病理方法优势差异不显著,即MSCT诊断方法是一种较有价值的食管癌诊断方法。恶性组血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1表达水平均高于良性组（均P＜0.05）。经ROC曲线分析发现：MSCT联合血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1诊断食管癌的曲线下面积（0.863）、灵敏度（0.879）、特异度（0.841）以及约登指数（0.720）均高于MSCT、血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1诊断。结论：MSCT联合血清CA19-9、CYFRA21-1以及Dickkopf-1蛋白诊断食管癌的临床价值较高,值得推广应用。     

真菌学报创刊十周年纪念

《真菌学报》自1982年创刊以来已10年,共发行10卷38期和1增刊,约450万字;刊登论文487篇,其中用英文撰写的85篇,占17.5%;简报34篇,占6.9%。发表菌物新属2个,新种413个,中国新记录种645个。论文主要内容涉及菌物的分类和资源、形态和超微结构、生态和区系、生理和遗传、应用菌物学和生物技术,以及病理学和综述等。对我国菌物学的发展起了促进作用。     

hhlim促进DMSO诱导的P19细胞向心肌分化

为了确定hhlim是否参与胚胎期的心肌分化和发育过程,用可表达hhlim蛋白和hhlim反义RNA的真核表达质粒转染P19胚胎干细胞,经G418筛选得到稳定表达hhlim和hhlim反义RNA的P19细胞克隆后,观察hhlim对P19细胞向心肌分化和发育的影响.结果显示,Nkx2.5和GATA-4在未被外源性hhlim基因转染的P19细胞中不表达.DMSO刺激细胞2天后,GATA-4开始表达,3天后Nkx2.5的表达活性显著升高.hhlim的过表达不但有利于P19细胞的存活和生长,而且还可以使Nkx2.5和GATA-4的表达比对照细胞提前1天.反义hhlim细胞株被DMSO诱导5天后,细胞仍呈集落化生长.同时,Nkx2.5和GATA-4开始表达的时间明显延滞.结果表明,hhlim能促进P19细胞向心肌细胞分化,其作用是通过促进转录因子GATA-4和Nkx2.5的表达而实现的.     

抗新冠肺炎药物研究进展

新冠病毒引发的急性呼吸道传染病造成了全球大流行的新冠肺炎,严重危害世界公共卫生安全,迫切需要研发有效治疗新冠肺炎的药物。综述了疫情暴发初期抗新冠肺炎药物研发的进展,重点介绍“老药新用”、小分子及抗体创新药物研发和中药等。通过“老药新用”研究发现多个老药具有抑制新冠病毒复制作用,其中瑞德西韦、法匹拉韦、氯喹和羟氯喹等进入临床研究,尤其是瑞德西韦成为被美国FDA批准用于新冠肺炎治疗的首个药物。针对新冠病毒识别宿主细胞受体的S蛋白开展的抗体发现和靶向3CL蛋白酶及RNA依赖的RNA聚合酶等新冠病毒复制过程中的关键蛋白质开展小分子抑制剂发现是抗新冠肺炎创新药物研究中的主要方向。此外,中药在防治新冠肺炎中发挥了重要作用,金花清感颗粒、莲花清瘟胶囊、血必净注射液、双黄连口服液、清肺排毒汤、化湿败毒方、宣肺败毒方等都进入了新冠肺炎治疗的临床研究及应用。     

抗体药物的发展与应用

早期抗体药物是鼠源单克隆抗体,存在免疫原性强、半衰期短等问题。历经数十年的发展,抗体药物从最初的鼠源单抗,逐步发展为人鼠嵌合抗体、人源化抗体及全人源化抗体。通过片段重组、位点修饰、药物偶联等方法,科研人员研发了包括抗体融合蛋白、抗体偶联药物、双特异性抗体、小分子抗体片段等形式多样的抗体药物。抗体药物在恶性肿瘤、自身免疫病、感染性疾病的治疗上发挥重要作用。通过对抗体药物人源化历程,不同类型的抗体结构和特点,以及抗体药物在新型冠状病毒肺炎治疗中的应用进行综述,并对抗体药物的发展前景进行展望,以期为我国抗体药物的研发提供参考。     

以“新冠”病毒肺炎疫情为案例的问题导向式微生物学课程思政教学设计

在微生物学课程中开展思政教学有助于提升相关专业学生的思想道德修养和综合素质,是当前高校教育"立德树人"根本任务的具体要求,也是思政教育"全过程、常态化"的重要体现。案例教学法是微生物学课程思政的一种重要教学方法,主要以微生物学科发展中的一些著名学者及其事迹为案例,引导学生认识和理解这些案例的思想内涵,以提升自身思想道德水平。该教学方法在实践中获得了较为理想的教学效果,但也存在着设计不够充分、时效性不足等问题。针对这些问题,本文提出了以新型冠状病毒肺炎(COVID-19,简称"新冠"病毒肺炎)疫情为案例的问题导向式微生物学课程思政教学设计方案。该设计基于当前"新冠"病毒肺炎疫情中涌现出的诸多先进人物和事迹,以及暴露出的一些不良现象和问题,通过将这些案例与微生物学专业知识,以及微生物学科发展历史上的经典人物事迹进行有机整合和提炼,开展问题导向式教学。这些案例都是学生亲身经历过的重大事件,因此能有效地提升学生的参与感,引发学生的共鸣。使用这些案例是对微生物学课程思政经典教学案例的有益补充,能更好地引导学生在学习相关专业知识的同时,主动思考各案例所蕴含的思想道德意义并将之内化为自己的价值信念,帮助他们塑造正确的"三观",最终实现微生物学课程思政"寓思想教育于科学知识学习"的教学目标。     

医学免疫学中西医融合教学的设计与实施

中医药在防治新型冠状病毒肺炎(简称"新冠"肺炎)上发挥了重要作用,与西医形成优势互补,促进了中医药创新发展,也是中医药人才培养的创新模式.为探索融入防治"新冠"肺炎中医药技术的医学免疫学中西医融合教学的设计及实施效果,以包头医学院2019级中医学专业一个班为研究对象,融合《医学免疫学》教材内容、中医药防治新型冠状病毒肺...