导入反义蜡质基因改良水稻稻米的食味品质和营养品质

经PCR、Southern blot和稻米GUS检测,蜡质基因反义片段与gus构成的融合基因已整合到8株水稻基因组中,并能正确表达。通过稻米GUS染色追踪分析获得转反义蜡质基因纯合后代。将转基因植株的稻米送农业部稻米及制品质量监督检验测试中心进行糙米蛋白质含量和直链淀粉含量测定。结果显示：（1）在转反义蜡质基因纯合的超2-10粳稻后代中,大多数单株糙米在直链淀粉含量降低的同时,蛋白质含量有不同程度提高,糙米蛋白质含量和直链淀粉含量呈显著负相关关系;（2）对照糙米直链淀粉平均含量和糙米蛋白质平均含量分别为13.4%和9.5%。在转基因植株中,稻米直链淀粉含量最低的为11.4%,而蛋白质含量也相对最高,为13.5%。本试验结果表明在水稻中导入反义蜡质基因不仅能够降低水稻稻米的直链淀粉含量,还有可能提高水稻稻米的蛋白质含量。     

Identification of a novel bifunctional delta12/delta15 fatty acid desaturase from a basidiomycete, Coprinus cinereus TD#822-2

A new gene encoding a delta12 fatty acid desaturase-related protein was cloned from a multicellular basidiomycete Coprinus cinereus TD#822-2. The 1326 bp full-length gene, designated as Cop-odeA, codes for a putative protein of 442 amino acids with a MW of 49224. The Cop-odeA yeast transformant accumulated four new fatty acids identified as 9,12-hexadecadienoic acid, 9,12,15-hexadecatrienoic acid, linoleic acid, and alpha-linolenic acid, which comprised 8.8%, 1.0%, 29.0%, and 0.6% of the total fatty acids, respectively. The Cop-odeA protein was confirmed to be a novel bifunctional fatty acid desaturase with both high delta12 desaturase activity and unusual delta15 desaturase activity.     

An intragenic deletion in pilQ leads to nonpiliation of a Pseudomonas aeruginosa strain isolated from cystic fibrosis lung

Deficient motility is one of the characteristic hallmarks observed in Pseudomonas aeruginosa strains that chronically colonize the lungs of cystic fibrosis (CF) patients. Pseudomonas aeruginosa TB is a nonpiliated CF isolate known to be defective in twitching motility. Complementation confirmed a direct link of this phenotype to an intragenic out-of-frame deletion in pilQ (PA5040). Sequence alignment of pilQ derived from TB vs. PAO1 suggests that close direct repeats framing the deletion site may have triggered this mutation. This type of mutation could play a role in the emergence of pathoadaptive mutations of P. aeruginosa in the CF lung habitat.     

玉米优良自交系愈伤组织基因枪转化的研究

利用基因枪将Ｂｔ基因导入玉米Ｅ２８幼胚愈合组织中,在潮霉素浓度为５ｍｇ／Ｌ选择培养基上,经过３５天的继代和分化２次选择及４５天继代继续３次选择后分化再生成植株,ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分子杂交结果表明,潮霉素基因及Ｂｔ基因已导入并整合到玉米基因组中,Ｅ２８２次选择的转化频率达到７．８％,显著地高于３次选择２．９％的转化频率,选择至再生的时间缩短２５天;自交系Ｐａｌ３７２次选择的转化频率为１３．３％     

siRNA在治疗学中的应用

小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）是外源性双链RNA（double strand RNA,dsRNA）的加工产物,在细胞内能介导RNA干扰（RNA interference,RNAi）效应,识别特异性mRNA,沉默同源基因表达。其特异性和高效性显示出很高的实用价值,siRNA已成为许多疾病潜在的治疗手段。对于siRNA的应用,尽管还需要在减少非特异反应,发掘高效递药载体,应对新的基因变异等方面进行深入研究,但其可望在抗病毒、神经系统疾病和肿瘤治疗等许多领域发挥治疗作用。     

新疆艾比湖和伊吾湖可培养嗜盐古菌多样性

新疆地区盐湖密布,蕴藏着丰富的微生物资源。为保护和利用微生物物种与基因资源,作者从新疆准噶尔盆地的艾比湖和天山山间盆地的伊吾湖分离纯化嗜盐微生物。采用PCR方法扩增其中65株嗜盐古菌16SrRNA基因序列。序列分析表明,分离的嗜盐古菌分属6个属,艾比湖以Haloterrigena和Natrinema属的菌株为主,伊吾湖由Haloarcula和Halorubrum两个属的菌株构成。通过多样性指数、丰富度指数、均匀度指数和物种相对多度模型对分离的菌株进行多样性分析和比较,结果表明,盐湖嗜盐古菌的多样性指数、丰富度指数和均匀度指数具有一定相关性,艾比湖可培养嗜盐古菌的多样性高于伊吾湖。研究发现了一些新的物种资源,表明新疆盐湖中孕育的特色微生物资源亟待保护与利用。     

Red重组技术研究进展

主要从Red系统组成元件、作用机理、重组策略以及先进性和发展前景四个方面综述了利用Red 重组系统敲除或替换细菌染色体目的基因的方法。首先简要介绍了传统的细菌染色体重组技术,指出了其中的缺陷。然后提出了Red重组技术的定义：利用噬菌体Red系统介导来实现外源线性DNA片断与细菌染色体的靶基因进行同源重组的方法,外源线性DNA通常是PCR产物、寡核苷酸片断等,在它们的两翼各含有与染色体靶基因两翼同源的序列40~60bp。这种Red重组技术省去了体外DNA酶切和连接等步骤,使细菌染色体靶基因的敲除与替换操作相对简单,逐渐成为基因功能探索以及新菌株构建的有力手段。     

基因枪法介导GNA基因遗传转化甘蔗的研究

目的:将含有雪花莲外源凝集素(GNA)基因的植物表达载体用基因枪法分别导入一个果蔗和一个糖蔗品种中,以期获得转基因植株。方法:将GNA基因插入到植物表达载体上,构建出不同选择标记、不同启动子的表达载体,并用基因枪法将之导入甘蔗胚性愈伤组织,分别在G418、PPT和Hyg的选择压力下,筛选抗性植株,并进行分子杂交鉴定。结果:通过斑点杂交和PCR-Southern杂交证明GNA基因已整合到甘蔗基因组中。结论:用基因枪法成功获得了含有GNA基因的甘蔗转化株,为培育抗甘蔗绵蚜(Ceratovacuna lanigeraZehnther)的新品种提供了基础。     

中国复套蛞蝓科一新种：肺螺亚纲：鞋形目

现已知我国复套蛞蝓科,复套蛞蝓属共计6种,主要分布于我国台湾、广东、海南、浙江、广西、上海、安徽、四川等省市以及香港、澳门等地区。作者在云南省玉溪地区峨山彝族自治县采得复套蛞蝓科一新种:玉溪复套蛞蝓Vaginulus yuxiensis。本文对该新种的外部形态和内部构造,尤其对生殖系统和齿舌的形态结构作了较详细的描述,其齿式为:(3:1:3)/152。并且作者与其近似种中国复套蛞蝓 Vaginulus chinensis Moellendorrf,1881;和佛尔复套蛞蝓 Vaginulus fargcsianus Heude,1885进行了比较。