苏铁属植物RAPD反应体系的优化及部分种类亲缘关系的探索

通过优化苏铁属植物的RAPD反应体系,进而探讨苏铁属部分种类的亲缘关系。结果表明,Mg~(2+)、dNTP、Taq酶及随机引物浓度在RAPD反应中有重要影响,而模板DNA浓度有一个很大的适应范围。适合苏铁属植物RAPD分析的反应体系:20μL反应体系中,含有10 mmol/L Tris-HCl(pH8.3)、50 mmol/L KCl、2.0mmol/L MgCl_2、200μmol/L dNTP、0.3μmol/L随机引物、模板DNA 50ng、Taq酶1.0 U。聚类分析结果基本反应了苏铁属各个种间的亲缘关系,证明了RAPD适用于苏铁属种间亲缘关系分析。RAPD聚类分析结合形态学研究表明:海南苏铁、台湾苏铁、广东苏铁、滇南苏铁和仙湖苏铁之间的亲缘关系较远,支持各自成为独立的种。     

玉米螟P450基因cDNA的克隆及植物次生物质对其诱导表达

昆虫细胞色素P450是一类在生物代谢中起重要作用的基因家族,承担着许多重要的生 理功能,包括对植物次生物质代谢和杀虫剂解毒等.本研究以玉米螟5龄幼虫中肠的总RNA为 模板,根据不同昆虫P450基因家族保守氨基酸序列,设计并合成简并引物,利用RT-PCR扩 增出了玉米螟细胞色素P450基因cDNA片段,将其克隆到pMD19 T载体进行序列测定.测序获得了编码213个氨基酸残基的641 bp的DNA片段,命名为OfP450(GenBank登录号：EU807990) ;与已公布的棉铃虫、家蚕、欧洲防风草结网毛虫、小菜蛾和黑腹果蝇等的细胞色素P450氨基酸序列进行比较,其一致性分别为55％、50％、49％、44％和31％.将植物次生物质棉酚、丁布添加入人工饲料中,对玉米螟进行了饲喂实验,采用优化半定量RT-PCR,以18S rRNA为内标,RT-PCR检测进食棉酚、丁布植物化合物的玉米螟中肠P450基因的转录. 结果表明,其转录水平能被棉酚、丁布显著诱导. 提示本实验克隆的玉米螟细胞色素P450对植物次生物质的代谢作用与P450表达量呈正相关.该研究为下一步将植物介导的RNA干扰技术应用于害虫生物防治提供坚实的基础.     

c-kit和PDGFRA基因对胃肠间质瘤的影响

胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GIST)是较常见的人消化道间叶性肿瘤,多发于胃部.尽管有不同临床病理特征,但绝大多数GIST均存在c-kit或血小板衍生生长因子受体α(PDGFRA)基因突变. c-kit、PDGFRA的抑制剂—格列卫是目前主要应用于GIST治疗的分子靶向治疗药物,c-kit、PDGFRA的不同基因状态会对分子靶向治疗药物呈现不同的反应.c-kit基因外显子11发生突变的GIST对格列卫呈现良好的反应,而外显子 9突变对格列卫的反应略差.另外发现,c-kit、PDGFRA基因的二次突变会引起格列卫抗性.本文简要介绍c-kit、 PDGFRA基因与GIST的临床表现、分子靶向治疗之间的关系及其二次突变的特征.     

仙湖苏铁群落优势种群的生态位特征

采用生态位宽度和生态位重叠探讨仙湖苏铁群落优势种群的生态位特征。结果表明,群落中生态位宽度大的优势种群,对其它种群的生态位重叠大,而生态位宽度小的种群对生态位宽度大的种群的生态位重叠不一定大;如果2个种群生态位宽度相近,则存在着较大的生态位重叠。优势种之间生态位重叠大,由于存在资源竞争,导致群落组成和结构发生变化从而影响群落的演替发展。相同的物种对在不同层次其生态位重叠水平不一致,从林下层到立木层,物种对的生态位重叠程度降低。仙湖苏铁种群与立木层中生性树种的生态位重叠大,由于植株高度的差异,它们之间可能存在着促进而非竞争关系,因此调整群落林分组成,使群落向着以中生性树种为优势种的方向发展,也许是促进仙湖苏铁种群恢复和发展的有利措施。     

Biological characteristics of wild Cycas fairylakea population in Guangdong Province,China

There are five wild populations of Cycas fairylakea in Guangdong Province,China,three of which are newly found.A study of the biological characteristics of C.fairylakea populations showed that this species had a narrow colonization area within 300 hm2,and an island pattern of distribution.Because of the overexploitation,urbanization,environment pollution,plant diseases,and insect pests,the wild populations and individuals of C.fairylakea decreased markedly in the past decades.All five populations have an opposite pyramid age structure,few coning plants,few seed production,and low level of seed germination rate or sterility.In conclusion,C.fairylakea in Guangdong Province was threatened seriously and an urgent need to take effective efforts to protect the plants and habitats in its location sites was required.     

乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ在肿瘤转移中的作用及其分子机理

目前研究表明N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ在肿瘤转移中有重要作用.在恶性肿瘤中, N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ活性增高,其催化产物β1,6分支也增加,β1,6分支与肿 瘤的侵袭转移密切相关.本文综述了N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ催化形成N-糖链 β1,6分支的特点以及在N-糖链生物合成中的重要作用;还介绍了N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ基因组成和参与其基因调控的转录因子Ets-1,及基因表达组织特异性;着重综述了近年来N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ与肿瘤侵袭转移相关的分子机理的最新研究进展,包括了粘附分子钙粘蛋白(cadherin)和整合素α5β1的作用,修饰表皮生长因子受体调节信号 转导,及通过对上皮衍生的细胞表面丝氨酸蛋白酶matriptase的β1,6分支修饰促进仲瘤的 侵袭等方面.提示有效抑制N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅴ参与作用的位点,为设计抗肿瘤新药提供潜在的治疗靶点.     

德保苏铁的核型分析

首次报道了德保苏铁(Cycas debaoensis Y．C．Zhong etC．J．Chen)的染色体数目和核型,其核型公式为K(2n)=2x=22=6m 4sm 12T,属于“3B”类型,全组染色体总长度为93．49μm,核型不对称系数为85．53％。实验结果显示其核型与又叶苏铁(Cycas micholitzii Dyer)和多岐苏铁(Cycas multipinnata C．J．ChenetS．Y．Yang)相似,仅稍有差异。     

Development of EST-microsatellites from the cycad <Emphasis Type="Italic">Cycas rumphii</Emphasis>, and their use in the recently endangered <Emphasis Type="Italic">Cycas micronesica</Emphasis>

We developed a set of 12 EST-microsatellite markers (EST-STRs) from Cycas rumphii Miq. and tested them on an ex situ collection of the endangered Cycas micronesica K.D. Hill. The number of alleles per locus in both species ranged from 1 to 15. Observed and expected heterozygosities ranged from 0.000 to 0.842, and 0.000 to 0.883, respectively. All primers amplified in four additional Cycas species. These markers are the first genome-enabled tools for cycad population level studies, and are now available to inform conservation efforts and disentangle the biogeographic history of the genus.     

14个蝴蝶兰品种遗传关系的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术对14个蝴蝶兰品种进行品种间遗传关系的研究。利用14个筛选的引物共扩增出179条带,其中多态性条带147条,多态性条带比率(PPB)为82%。品种之间的遗传相似系数范围在0.734~0.936间,说明部分蝴蝶兰品种间存在显著的遗传分化。14个引物组合可区分所有14个品种,并且检测到20条品种特异性条带,这些品种特异条带可用来鉴定供试蝴蝶兰中的10个品种。因此,ISSR分子标记能有效地进行蝴蝶兰品种鉴定。UPGMA聚类分析表明,14个品种可聚为2类,聚类情况与花色特征比较一致,但与花色的划分结果不完全相同,这可能是由于品种间杂交引起的。本文也论讨了ISSR分析结果对蝴蝶兰育种的指导意义。     

德国鸢尾‘常春黄’花芽分化的形态观察及两种代谢产物的动态变化

鸢尾是世界著名观赏花卉,为研究其花芽分化期的形态和生理指标变化情况,我们以德国鸢尾两季花品种‘常春黄’（Iris germanica cv. Lovely Again）为材料,运用扫描电镜（SEM）观察了德国鸢尾‘常春黄’的花芽分化过程。结果表明：整个形态分化过程可分为6个阶段：花序原基分化期、外轮花被分化期、雄蕊分化期、内轮花被分化期、雌蕊分化期、髯毛形成期。结合上述形态分化过程,分别取其二次花花芽分化时期的顶芽、根茎和叶片部位,以蒽酮比色法测定可溶性糖,以考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量。结果表明：可溶性糖在花序原基分化的初始阶段含量最高,且在3个部位的含量大小关系始终是：根茎﹥叶片﹥顶芽;蛋白质含量呈先上升后下降的趋势,蛋白质含量的峰值出现于花序伸展初期。