黄芪皂苷、多糖及黄酮在抗细胞凋亡方面的研究进展

黄芪系豆科植物蒙古黄芪Astragalus menabranaceus(Fish.)Bge.var.meongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalus mem-branaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。其味甘,性微温,具有"补气升阳、益卫固表、利尿消肿、托毒生肌"之功效。黄芪含有皂苷、多糖、黄酮、氨基酸等多种活性成分,对免疫系统、内分泌系统和心血管系统等均有明显功效,其中很多药理功效作用与抗氧化损伤、调节钙稳态、抗线粒体损伤有关。氧自由基损伤、钙超载、线粒体损伤三者是启动细胞程序性凋亡的共同通路,现从这三方面综述黄芪活性成分在抗细胞凋亡机制的研究进展。     

柱前衍生化HPLC法测定黄芪中黄芪甲苷的含量

目的：建立黄芪中黄芪甲苷的柱前衍化高效液相色谱测定法,并用该法对不同产地黄芪中黄芪甲苷的含量进行比较,方法：以吡啶－苯甲酰氯（２．５：１）为衍生化试剂,对黄芪甲苷分子中的羟基进行苯甲酰化,以甲醇－四氢呋喃－水（９０：４：６,０．２％三乙胺）为流动相,ＶＤ３为内标物,在２３０ｎｍ波长处检测。结果黄芪甲苷在０．００４－０．０８０ｍｇ．ｍＬ＾－１范围内呈线性,相关系数为０．９９９９,平均回收率为９４．７     

黄芪对镉致大鼠睾丸支持细胞超微结构及波形蛋白、E-钙粘蛋白表达改变的保护作用

目的 探讨黄芪对镉致大鼠睾丸支持细胞损伤的保护作用.方法 21只成年雄性SD大鼠随机分成镉组(0.1％氯化镉腹腔内注射,1mg/Kg体重/天,5天/周,处理后1、2、3、4周取材)、镉加黄芪组(注射氯化镉的同时注射黄芪,10g/Kg体重/天,5天/周,处理后2、4周取材)和对照组(腹腔内注射等量生理盐水).睾丸取材作光镜、免疫组织化学染色和图像分析及超微结构观察.结果 光镜H.E染色对照组支持细胞核不规则,染色浅,核仁明显,镉处理后胞浆内有空泡形成,镉加黄芪组支持细胞未见明显改变.对照组波形蛋白阳性产物在支持细胞靠近基室腔的胞浆中表达,E-钙粘蛋白阳性产物则主要定位于生精上皮近腔室的支持细胞和部分生精细胞胞浆中.镉处理后支持细胞胞浆中波形蛋白和E-钙粘蛋白阳性产物表达的平均光密度值均明显降低(P＜0.05),镉加黄芪组阳性产物表达虽较对照组减弱但明显高于相应镉组(P＜0.05).镉处理组支持细胞胞质特化区和紧密连接破坏,镉加黄芪组支持细胞超微病变较相应镉组为轻.结论 镉降低大鼠睾丸支持细胞波形蛋白和E-钙粘蛋白的表达并造成支持细胞的超微结构损伤,黄芪具有较好的保护效果.     

黄芪甲苷对人骨髓间充质干细胞体外增殖及细胞因子表达的影响

目的：探讨黄芪甲苷对人骨髓间充质干细胞体外增殖及细胞因子表达的影响。方法：采用Percoll密度离心法和贴壁法分离纯化hBMSC;流式细胞术检测hBMSC表面标志;MTT法检测不同浓度黄芪甲苷干预72h后hBMSC的增殖情况;Real-timePCR法检测经黄芪甲苷干预后hBMSC对SCF、VEGF、SDF-1、GM-CSFmRNA的表达水平。结果：成功分离培养出laBMSC;不同浓度（20、40、80、160、320mg／mL）的黄芪甲苷可促进hBMSC增殖（P〈0．05）,其中160mg／mL组促增殖最明显;黄芪甲苷可促进hBMSC对SCF、VEGF、SDF-1mRNA的表达,而GM—CSFmRNA表达无明显变化。结论：黄芪甲苷可促进hBMSC体外增殖,可能与其促进hBMSC对SCF、VEGF、SDF-1mRNA表达有关。     

黄芪对儿童哮喘T细胞亚群细胞周期的影响

目的:观察黄芪对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期的影响,揭示黄芪在哮喘治疗中的意义。方法:课题以儿童哮喘病人T细胞亚群为研究对象,对CD4+、CD8+T细胞进行分离,采用细胞培养技术,用黄芪对其进行体外处理,使用流式细胞仪测定经黄芪处理和未经黄芪处理的CD4+、CD8+T细胞的细胞周期分布情况。结果:儿童哮喘患者CD4+、CD8+T细胞分别在经黄芪处理和未经黄芪处理的条件下培养,在CD4+T细胞中,黄芪组的S期CD4+T细胞百分比显著低于对照组,有统计学意义(P<0.01);G1期细胞百分比显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01)。在CD8+T细胞中,黄芪组的S期CD8+T细胞百分比低于对照组,有统计学差意义(P<0.05);G1期细胞百分比高于对照组,有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪抑制发作期哮喘患者CD4+、CD8+T细胞DNA合成,进而调节细胞周期使之停滞在G1期。黄芪对发作期儿童哮喘患者有一定的治疗意义。     

曲美他嗪或生脉饮联合黄芪注射液治疗急性病毒性心肌炎的临床对比分析

目的:探讨曲美他嗪或生脉饮分别与黄芪注射液联用治疗急性病毒性心肌炎(AVMC)的临床疗效。方法:选取2013年4月~2016年4月我院收治的AVMC患者140例,按随机数字表法分为对照组(n=45)、曲黄组(n=46)及生黄组(n=49)。对照组患者给予常规药物治疗,曲黄组在对照组的基础上给予曲美他嗪联合黄芪注射液治疗,生黄组在对照组的基础上给予生脉饮联合黄芪注射液治疗。比较三组患者中血清肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌钙蛋白I(cTnI)水平、心电图指标、临床总有效率、临床症状改善及不良反应情况。结果:治疗后,曲黄组和生黄组总有效率均显高于对照组,曲黄组总有效率高于生黄组(P0.05)。曲黄组和生黄组患者的心悸和胸痛发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。曲黄组和生黄组患者血清CK-MB、cTnI水平低于对照组,且曲黄组低于生黄组(P0.05)。曲黄组患者房室传导阻滞、ST-T变化、室性期前收缩发生率低于对照组(P0.05)。三组患者不良反应发生率比较无统计学差异(P0.05)。结论:曲美他嗪联合黄芪注射液治疗AVCM的总有效率高于生脉饮联合黄芪注射液治疗,降低心肌损伤程度,改善临床症状,无严重不良反应,值得临床推广应用。     

黄芪甲苷促进心肌干细胞分化的作用研究

目的 探讨黄芪甲苷对心肌干细胞分化的促进作用。方法 采用磁珠分选法,分离小鼠Sca-1＋心肌干细胞,通过免疫组化方法观察黄芪甲甙处理后心肌细胞表面标志蛋白desmin、α-sarcomeric？actin和C-TnT表达的变化,以判断是否对心肌干细胞分化有促进作用。结果 250 mg/L的黄芪甲甙诱导4周后免疫组化染色显示心肌干细胞明显表达desmin、α-sarcomeric actin和C-TnT。而未诱导的细胞desmin、α-sarcomeric actin、C-TnT 均为阴性。因此黄芪甲甙可以促进小鼠Sca-1＋心肌干细胞分化为心肌样细胞,这些细胞表达心肌特异性的蛋白。结论 黄芪甲苷对心肌干细胞分化的促进作用表明其在心肌损伤性疾病的康复中有潜在的治疗价值,值得进一步研究。     

黄芪毛状根化学成分分和免疫功能活性的研究

应用大规模培养技术生产的黄芪毛状根、获得１０ｇ／Ｌ的产量。与黄芪干燥根化学在分相比,黄芪毛状根中粗皂甙和可溶性多糖含量较高,黄芪甲甙含量相当,而６种异黄酮,总多糖和生多糖含量较少,证明两种来源的黄芪根质量相似。从免疫功能低下的小鼠免疫功能恢复的实验结果也证实了这一点。本结果显示大规模生产的黄芪毛状根可能成为中药材黄芪的一种新来源。     

蒙古高原岩黄芪属植物的分支分类学研究

以蒙古高原岩黄芪属植物为对象, 应用徐克学的最大同步法, 探讨了蒙古高原岩黄芪属(豆科)植物的系统演化, 并根据分支分类结果对蒙古高原岩黄芪属进行了系统学处理。作者首次将蒙古高原岩黄芪属分为岩黄芪亚属、半灌木岩黄芪亚属(新拟)和无刺岩黄芪组、丛枝岩黄芪组、无茎岩黄芪组、半灌木岩黄芪组等4 个组。本文对蒙古高原岩黄芪组的划分符合苏联植物志(1945)中的观点。     

微分脉冲伏安法测定沙苑子中鼠李柠檬素类黄酮含量

在 0 .0 5 m ol/ L 硫酸铵溶液中 ,采用微分脉冲伏安法 ,测定沙苑子中鼠李柠檬素类黄酮含量。灵敏度达 10 - 6mol/ L,在 6 .10× 10 - 6～ 3.0 5× 10 - 5m ol/ L 浓度范围内峰电流与沙苑子苷浓度成线性关系 (r=0 .995 9) ,回收率达96 .9%～ 10 3.0 % (RSD=2 .5 4 % ,n=6 )。结果表明 ,可不经分离直接测定沙苑子提取液中鼠李柠檬素类黄酮的含量