三种蛇毒中三种酶的研究

我们选择分属三个不同蛇科的眼镜王蛇(Ⅰ,属眼镜蛇科)、尖吻蝮蛇(Ⅱ,属蝮亚科)和青环海蛇(Ⅲ,属海蛇科)分泌的原毒液,分别测定它们的γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT,E.C.2.3.2.2)、乳酸脱氢酶(LDH,E.C.1.1.1.27)和碱性磷酸酶(AKP,E.C.3.1.3.1)总酶活力,并应用浓度梯度聚丙烯酰胺电泳(PAGE)和等电聚焦电泳,比较上述三种酶的电泳表现。初步结果,总酶活力为,γ-GT:(Ⅰ)>(Ⅲ)>(Ⅱ)、LDH:(Ⅲ)>(Ⅰ)或(Ⅱ)、AKP:(Ⅰ)>(Ⅲ)>(Ⅱ);浓度梯度PAGE各呈不同酶谱,每种酶均有几种不同估计分子量;等电聚焦电泳显示各不相同等电点的多条酶带。此结果说明上述三种蛇毒中三种酶均存在多种形式,具多型性。     

蕲蛇酶对大白鼠和家兔实验性脑血栓的溶栓作用

采用血小板聚集诱导剂二磷酸腺苷（ＡＤＰ）加肾上腺素（Ａｄ）从家兔颈内动脉或大白鼠颈总动脉注入,以形成脑血栓,２ｈ后各组动物分别从静脉给予不同剂量蕲蛇酶（１５０、３００和６００ｍｇ／ｋｇ）,阳性对照药潘生丁（１０ｍｇ／ｋｇ）及空白对照生理盐水（１ｍｌ／ｋｇ）。以脑组织对伊文思蓝通透性改变及脑组织切片计算血栓数目为指标,判断蕲蛇酶对血栓的影响。结果不同剂量蕲蛇酶组对大鼠或家兔的实验性脑血栓均比生理盐水组血栓消褪加快,形成的血栓数目减少,脑组织伊文思蓝含量亦明显减少;潘生丁组亦显示促血栓消褪的效果     

蕲蛇酶在健康志愿者的Ⅰ期临床研究

健康志愿者１８人,男１１人,女７人,除该药研制者２人年龄为６５和６６岁外,其余平均年龄为２６±ｓ６．２岁。分３组,分别一次静脉滴注蕲蛇酶注射液１Ｕ（１５０μｇ）、２Ｕ（３００μｇ）、３Ｕ（４５０μｇ）。３种剂量均能使血小板明显抑制,血小板明显减少,部分凝血活酶时间明显延长,纤维蛋白原明显下降,血浆ＦＤＰ含量明显增多,优球蛋白溶解时间（ＥＬＴ）明显缩短,优球蛋白复钙时间明显延长,并大多呈量效关系。对凝血酶原时间无明显变化。３种剂量对血浆ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＡＬＰ、总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆固醇及胆红素等的影响均在正常波动范围内,此说明对肝功能无损害作用。其中对胆固醇则反有降低效果。对尿素氮和肌酐的影响亦均在正常波动范围内。对血糖亦无明显影响。对白细胞和血红蛋白等血像的影响亦在正常波动范围内。上述结果说明蕲蛇酶在高达３Ｕ（４５０μｇ）剂量下,对肝、肾、血像无明显不良反应。呼吸、血压、脉搏及体温均无明显变化。大剂量组有２例在血压计袖套压迫处出现数个散在性瘀血点,２４ｈ后自然消失。小剂量组１例（原为过敏体质）用药后出现喉头水肿过敏反应,经用氢化可的松静脉滴注即恢复     

江浙蝮蛇毒溶血毒素晶体培养及初步晶体学研究

从江浙蝮蛇中分离纯化的碱性磷脂酶Ａ２在ｐＨ９．５,０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ ＣＨＥＳ缓冲液中,用汽相悬滴扩散的方法,获得了适用于高分辨率Ｘ射线结构分析的单晶。经Ｘ２００Ｂ面探测器分析,表明该晶体属于正交晶系,Ｐ２Ｉ２Ｉ２Ｉ空间群,晶胞参数为ａ＝９７．１３Ａ,ｂ＝１０３．６９Ａ,ｃ＝２３．２７Ａ。并收集了一套衍射数据,独立衍射点数１２００１个,数据完整度为８６．２％,Ｒｍｅｒｇｅ为０．０４５９。最高分辨     

脱Ca~（2＋）与结合Ca~（2＋）蝮蛇毒酸性磷脂酶A_2晶体的培养和X射线衍射数据

钙离子是磷脂酶Ａ２催化必须的铺因子,以蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２为材料,采用在晶体培养液中加入ＥＤＴＡ或ＥＧＴＡ螯合剂络合法除去ＰＬＡ２中可能有的Ｃａ＾２＋离子和加入ＣａＣｌ２以确保ＰＬＡ２能克分结合上钙离子的方法培养充分结合Ｃａ＾２＋和脱Ｃａ＾２＋的ＰＬＡ２晶体。加了螯合剂后长出的晶体为长棒状六方柱,加Ｃａ＾２＋离子后长出的晶体则为短粗的六方柱。经Ｘ射线鉴定两种晶体为同晶型,空间群为Ｐ６１,晶胞参数很     

眼镜蛇毒研究与临床应用近况

用眼镜蛇整体泡酒饮服,治疗腰腿痛,祖国医学已有记载［１］,已有悠久历史。３０年代国外应用眼镜蛇毒治疗关节痛、神经痛,临床应用数百例,后因起效慢等原因,而终止研究与应用。我院于６０年代初开始对眼镜蛇毒进行系统研究,如原料标准,注射剂质控标准、安全试验、半数致死量（ＬＤ５０）试验、药理学、药效学、长毒以及“三致”试验等。结果表明：蛇毒及其制剂,治疗风湿痛、神经痛等疗效高于毒副反应。同时我们又研究以眼镜蛇毒为君药与中药伍用,治疗肝癌及消化道癌,亦收到了较好的疗效。这对深入研究与开发蛇毒新药是大有前途的     

蛇毒中γ-谷氨酰转肽酶

γ-谷氨酰转肽酶 (简称γ-GT)广泛存在各种哺乳动物组织中,在氨基酸转运中起重要作用。我们对分属于眼镜蛇科、蝰科和海蛇科的九种毒蛇的蛇毒进行研究,发现蛇毒中存在γ-GT,但各种蛇毒的总酶活力差异很大,以眼镜王蛇和眼镜蛇毒含量较丰富。聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶等电聚焦电泳分析指出,大多数蛇毒含多种形式的γ-GT,存在分子量与等电点不同的酶区带。     

四种圆斑蝰蛇蛇毒对血小板聚集抑制作用的比较研究

对四种不同来源的RVV对ADP、Col和Ris诱导的血小板聚集抑制作用进行比较研究。RVV-B,RVVS和RVV-Styp对三种诱导剂的血小板聚集均有抑制作用,而RVV-T虽有ADP和Col抑制作用,但缺乏对Ris的抑制活性。预先与RVV孵育的血小板经洗涤后重新悬浮于自身PPP中,与RVV-StyP孵育的血小板完全恢复对Ris的凝集反应,而与RVV-B和RVV-S孵育的血小板仅部分恢复其反应。上述结果表明,在RVV中可能含有二种不同的血小板聚集抑制活性,而其抑制机理可能牵涉到血小板、血浆等因素。