基于非靶代谢组学的多花黄精沙藏种子萌发过程差异代谢物分析

低温沙藏处理可以有效解除多花黄精种子休眠,为此本实验利用非靶向气相色谱-质谱法（GC-MS）技术鉴定并分析了沙藏后的多花黄精种子不同萌发时期的代谢产物及其变化规律。共鉴定出初级代谢产物116种,对多花黄精种子萌发0 d vs. 7 d,7 d vs. 14 d,14 d vs. 21 d,21 d vs. 28 d和28 d vs. 35 d等比较组进行成对比较筛选,分别筛选鉴定出各比较组中发生显著变化的差异代谢物（VIP>1.0,P<0.05）17,27,9,7和1种。多花黄精种子萌发初期的0 d、7 d和14 d,种子内的二糖（海藻糖,麦芽糖,蔗糖等）以及TCA循环中苹果酸,琥珀酸,柠檬酸等含量显著增加,而在14 d后整体呈现下降趋势。γ-氨基丁酸等氨基酸含量在萌发0 d时最高。HCA分析表明,大部分的代谢物含量在沙藏的多花黄精种子萌发7 d时上升,14 d后下降,表明在14 d前后初级代谢产物被快速消耗。KEGG分析表明,种子萌发过程中TCA循环,精氨酸与脯氨酸代谢,淀粉和蔗糖代谢等多条代谢通路表现活跃。在萌发初期,氨基酸、糖类和有机酸类物质含量三者间显著相关。本研究...     

湖北黄精大小孢子发生及雌雄配子体发育

【目的】研究湖北黄精花部形态结构特征和大小孢子发生及雌雄配子体发育过程,以丰富黄精属植物的生殖生物学理论,为进一步开展湖北黄精的品种选育提供依据。【方法】以不同发育时期的湖北黄精花芽为试验材料,用显微观察法观察花部形态结构特征,石蜡切片技术对单花雌雄蕊进行切片观察。【结果】湖北黄精的花被为白色或淡黄绿色,花被筒近喉部稍缢缩;具6枚雄蕊,花丝下端与花被合生,花药开裂方式为纵裂;雌蕊子房上位,3心皮,花柱与子房等长。湖北黄精花药壁由4层细胞组成,成熟的绒毡层具多核,绒毡层发育类型为分泌型;小孢子母细胞减数分裂为连续型,四分体呈左右对称型排列,成熟花粉粒为2-细胞型;存在小孢子发育不同步的现象。雌蕊胚珠具双珠被、厚珠心;四分体呈直线型排列,胚囊发育类型为蓼型;存在双胚囊胚珠现象。在雄蕊的花药壁和雌蕊的子房壁都观察到有束状草酸钙针晶。【结论】湖北黄精雌雄蕊具有较原始的发育特征,虽然在发育过程中都存在异常现象,但雄蕊最终能形成正常的雄配子体,雌蕊低频率的双胚囊现象对总体受精结果影响很小。湖北黄精杂交育种可以选择花药开裂前一时期的花粉,花药壁和子房壁观察到的束状草酸钙针晶无法作为湖北黄精物种鉴定的...     

黄精属5种植物的核型研究

本文报道了安徽省黄精属Polygonatum Mill．5种植物的染色体数目和核型。玉竹P. odoratum (Mill.)Druce黄山材料2n=16=10m(3sc)+6sm,滁县琅琊山材料2n=18=10m(1sc) +2sm+6st(2sc),二者均属2B核型． 长梗黄精P．filipes Mirr. 黄山材料2n=22=8m+8sm(2sc)+6st,属3B核型,安徽繁昌材料2n=14=10m+4sm和2n=16=8m +4sm+4st,二者均属2B核型。多花黄精(P.cyrtonema Hua)安徽黄山材料2n=20=8m+6sm+6st和2n=22=6m+8sm +4st+4t,二者均属3B核型,安徽滁县琅琊山材料2n=18=8m(2sc)+6sm+4st,属2B核型。长苞黄精(P．desoulayi kom．) 2n=22=10m(2sc)+6sm(1sc)+6st,属3B核型;轮叶黄精(P．verticillatum(L．)All．)2n=18=2m+2sm+10st+2t+2T和2n=24=6m+4sm+12st+2T,二者均属3B核型。其中玉竹2n=16,长梗黄精2n=14和2n=22,长苞黄精2n=22,轮叶黄精2n=18的染色体数目和核型均为首次报道。     

滇黄精组培褐化影响因素研究

以滇黄精Polygonatum kingianum块茎芽为外植体,对组培过程中褐化的影响因素(灭菌方式、基本培养基及培养温度)进行探讨。结果表明,先经过75%乙醇处理30s消毒表面,再用NaClO 12min+HgCl2 8min消毒的抗褐化效果最好;选用1/2MS基本培养基能有效抑制褐化;低温环境(20℃)能进一步降低褐化发生率。     

黄精凝集素Ⅱ的纯化及部分性质研究

囊丝黄精（ＰｏｌｙｇｏｎａｔｕｍｃｙｒｔｏｎｅｍａＨｕａ．）的根状茎,经浸取、用硫酸铵分级沉淀、猪甲状腺球蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱亲和层析、ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤,可以分离纯化出黄精凝集素Ⅱ（ＰＣＬⅡ）．纯化的ＰＣＬⅡ在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白染色带;在快速高效液相色谱中亦为单一蛋白峰,经分子筛层析测得分子量为１５．９ｋＤ,最大紫外吸收值在２７８ｎｍ,ＰＣＬⅡ只凝集兔红细胞,当浓度为０．２５μｇ／ｍｌ时,即可发生凝集反应,此凝集兔红细胞的能力可被Ｄ－甘露糖和猪甲状腺球蛋白所抑制．氨基酸组成分析表明ＰＣＬⅡ分子中富含酸性氨基酸,Ｎ末端为丙氨酸．经测定ＰＣＬⅡ分子中含有３个色氨酸和２．４％的中性糖．原子发射光谱分析表明,该凝集素分子中含有Ｍｇ和Ｃａ两种金属元素．     

多花黄精五个居群叶片的比较解剖学研究

利用石蜡切片技术、叶表皮离析法和电镜扫描技术,对多花黄精五个居群的叶片进行了比较解剖学研究。观察发现:多花黄精五个居群的叶肉细胞中均具有内含针晶束的异细胞,叶表皮细胞为长方形、不规则形或椭圆形,垂周壁一般为平直和弧形;有的居群下表皮有单细胞表皮毛分布。在扫描电镜下,角质层纹饰多为鳞片状。结果表明叶表皮特征,如:气孔器大小、气孔器指数、气孔器密度、气孔器分布特征、角质层纹饰及表皮毛的分布等受环境因子影响较大,同种不同居群间有一定差异,而叶肉的构成、内含物(如针晶束)、气孔器类型、表皮细胞形状等具有种间稳定性,可以作为分类的依据。     

黄精的化学组成及药理作用的研究进展

黄精是百合科黄精属(Polygonatum Mill.)植物,以根茎入药,具有健脾,润肺,补气等功效.黄精不仅是历代名贵的滋补药物,而且还是一味药食同源的药材.本文主要对2020版《中国药典》所收录的三种黄精的化学成分,药理作用及产品应用进行整理和归纳,为黄精的深入探索做铺垫.     

黄精中阿维菌素残留量检测方法研究

研究了高效液相色谱法(HPLC)检测中草药黄精中阿维菌素残留量.以丙酮为提取溶剂,经酸性氧化铝柱层析净化,用紫外检测器(UVD)在245 nm处进行检测,流动相为甲醇-水(体积比为85∶15),流速为1 mL/min.结果表明:阿维菌素在质量浓度为0.01~200μg/mL范围内有良好的线性关系,该方法添加回收率为87.74%~103.47%,变异系数为1.73%~4.43%,检出限为0.01 mg/kg.符合阿维菌素残留的检测要求.     

滇黄精资源的开发应用进展及前景分析

滇黄精为重要药食两用资源,誉有"血气双补之王"之称。其在云南蕴藏量大,是黄精品种中产量及市场份额最大的,为重要的"云药"品种。对黄精的药用记载、生长环境、资源状况,以及化学成分、药理作用和产品研发进展进行了综述;并对滇黄精的产品研发前景、产业发展潜力及研发可行性进行了分析。结果显示有必要进一步加大滇黄精的研发力度,充分发挥其药食两用的特点及优势,努力把滇黄精发展成为云药产业、乃至我国中药产业的一大支柱。     

新疆黄精凝集素基因的克隆、序列分析和表达

用百合科黄精属植物凝集素基因的保守序列为引物,从新疆黄精的叶中克隆出黄精凝集素的全长cDNA。序列分析表明, 克隆获得的新疆黄精凝集素(Polygonatum roseum agglutinin, PRA)基因完整的ORF片段大小为550 bp, 编码1 条长159个氨基酸肽链, 没有内含子, 其中N 端的28个氨基酸是信号肽。对新疆黄精凝集素cDNA 序列同源性的分析比较发现, 黄精属植物凝集素基因之间有很高的同源性(92%)。氨基酸序列比对和SWISS-MODEL同源模建分析表明, PRA由12个b-折叠片组成的b-桶结构, 具有与单子叶植物甘露糖结合凝集素相似的空间结构。重组质粒pGEX-4T-1-PRA 和pMAL-p2x-PRA, 分别转化E. coli BL21进行原核表达, 新疆黄精凝集素能够以可溶性融合蛋白形式表达, 分子量约为14 kD。构建真核表达载体pcDNA3-PRA, 免疫小鼠后获得了抗血清。免疫印迹结果显示为单一的条带, 证明该抗血清具有针对PRA抗原的专一性。新疆黄精凝集素基因的克隆、原核和真核的表达以及抗血清的制备, 为进一步研究凝集素蛋白的性质和功能, 并为植物抗病虫基因工程研究提供有用的实验材料。