用于MALDI-TOF MS分析的毛细管层析柱制备方法研究

研究了一种用于MALDI-TOF MS分析中样品预处理毛细管亲和层析柱的制备方法。首先采用硫酸和双氧水氧化法将羟基引入到石英毛细管内表面,进一步使用氨基丙基三乙氧基硅烷（APTES）对毛细管进行修饰以将氨基偶联到毛细管内表面;采用1,4-丁二醇二缩水甘油醚（BDDE）将魔芋葡甘聚糖（KGM）进行活化,将活化后的KGM与毛细管上的氨基进行了偶联,在此基础上将模型蛋白（胰蛋白酶）偶联到毛细管内KGM,成功制备出毛细管亲和层析柱,考察了KGM和环氧基含量对模型蛋白偶联量及其样品预处理效果的影响。结果表明,KGM分子量是影响毛细管层析柱上蛋白偶联量的关键因素,以胰蛋白酶抑制剂为目标物结合MALDI-TOF MS对亲和层析柱的分离效果进行了评价,证明了偶联胰蛋白酶的毛细管层析柱可有效实现胰蛋白酶抑制剂的分离和浓缩。基于表面处理和KGM衍生的毛细管亲和层析柱制备技术具有可行性,并可用于MALDI-TOF MS分析的样品预处理。     

固氮类芽孢杆菌YUPP-5中环糊精糖基转移酶基因的克隆与功能分析

从魔芋根际分离的固氮类芽孢杆菌Paenibacillus azotofixans YUPP-5对多种β-1,4糖苷键连接的多糖具有水解作用。通过构建该菌的fosmid文库,克隆到2 157 bp的基因片段,编码环糊精糖基转移酶。大肠杆菌中表达此酶,能降解葡甘聚糖、羧甲基纤维素钠盐、几丁质、木聚糖等多种β-1,4糖苷键连接的多糖,同时该酶还能以葡甘聚糖为底物生成β-1,4糖苷键连接的环糊精,而文献报道这种酶仅能利用α-1,4糖苷键连接的淀粉为底物生成环糊精;并展示了环糊精糖基转移酶的一些新功能。     

魔芋葡甘聚糖的pH触发酶解

利用高效凝胶排阻色谱技术研究并实现了以溶液pH值为简易调节开关,对魔芋葡甘聚糖的酶解反应进行触发调控：结果表明：pH为4时底物分子量不发生变化,而当pH调至7时,酶解被触发进行,底物分子量随之快速下降。分析表明：酶在pH变化过程中发生部分复性的可能原因是pH由7调至4的过程中发生沉淀的酶分子维持了天然构象,当pH反调回7时重新溶解,并对KGM进行剪切。     

魔芋低聚糖硫酸酯的制备及抗病毒活性研究

从酶解魔芋干粉中提取分子量在1500左右的葡甘露低聚糖Apkos,采用吡啶-氯磺酸法制备了它的硫酸酯衍生物S-Apkos,其硫含量为8.28%,取代度(Ds)为0.57.用Vero细胞和单纯疱疹病毒2型(HSV-2)考察硫酸酯化前后低聚糖的抗病毒活性.结果表明,本身无抗HSV-2活性的Apkos硫酸酯化后产生了抗病毒活性,500～4000μg/ml的SApkos能很好地抑制HSV-2引起的Vero细胞病变,而在500μg/ml及以上浓度条件下能完全抑制HSV-2在Vero细胞单层中形成病毒空斑.     

魔芋葡甘露低聚糖的酶法制备工艺的初步研究

利用β-甘露聚糖酶产品水解魔芋胶制备魔芋葡甘露低聚糖的工艺条件。在加样顺序、pH、酶添加量、时间、温度等单因素试验的基础上,进一步通过正交试验确定的最佳工艺条件为:魔芋胶浓度10g/L,酶添加量为100U/g,pH5.5,45℃条件下,酶解时间1.5h。再利用酵母发酵去除可发酵性糖的方法,以获得最终产物为100%的魔芋葡甘露低聚糖。     

魔芋精粉的加工工艺与设备

魔芋精粉的加工工艺与设备蒋建新（总社南京野生植物研究设计所,南京２１００４２）１魔芋简介魔芋属天南星科魔芋属多年生宿根草本植物。我国魔芋资源十分丰富,种植历史已达２０００年之久,且种类繁多。主产区分布在四川、云南、贵州、广西、广东、湖南、湖北、安徽等...     

药用植物磨芋的考证

磨芋是具有悠久栽培历史的食用、药用植物,有多个名称。经考证,首载于《名医别录》的由跋,是现今广泛载种的磨芋(A.Konjac),后来的许多本草著作把磨芋的一、二年生苗称为由跋;首载于《开宝衣草》的蒟蒻或蒻头,是指磨芋和疏毛磨芋(A Sinensis),但一般说来,蒟蒻就是磨芋(A.Konjac).“磨芋”这个词最早见于《植物名实图考》,吴其濬置之于“天南星”条下,后人以“魔芋”取代了“磨芋”;磨芋的学名是AmorphophalltlS konjac C.Koch,而Amorphophallus rivieri Durieu是它的同物异名。     

稻草覆盖对云南高原魔芋地温时空变化的影响

连续三年研究稻草覆盖对云南高原山地栽培‘花魔芋’地温时空变化的影响。结果表明：地温具有明显的时空变化特征,与‘花魔芋’的年生长周期各发育阶段的最适温度相吻合。稻草覆盖改变土壤热量交换层(地表层)的性质,具有延缓地温上升和下降的双向动态调控作用,调控幅度随气温升高而增大,随气温下降而加强;增强了同一土层温度的稳定性,其调控幅度随着土壤深度增加而降低,不同观察时间表现出13:00>19:00>7:00的规律。     

珠芽魔芋对细菌性软腐病的抗性鉴定研究

采用魔芋Amorphophallus spp.块茎点种、注射、灌根接种及田间调查等方法,对国内普遍栽种的珠芽红魔芋A. bulbifer、珠芽金魔芋A. muelleri、花魔芋A. konjac和白魔芋A. albus等12个种质材料进行抗软腐病鉴定、比较和评价,以分析珠芽魔芋对抗细菌性软腐病的抗病水平。结果表明,供试材料对软腐病抗性差异较大,珠芽金魔芋种质对细菌性软腐病均有免疫性(I),德宏及临沧珠芽红魔芋种质为高抗病品种(HR);缅甸珠芽红魔芋为抗病品种(R);富源花魔芋、楚雄花魔芋、日本农林2号、鄂魔芋1号、秦魔1号、昭通白魔芋、丽江白魔芋均属易感品种(S),与田间抗性调查情况基本相符。