用16S rRNA荧光定量PCR技术分析低出生体重儿肠道菌群变化及影响因素

目的监测低出生体重儿肠道细菌分布情况,并分析影响低出生体重儿肠道微生态平衡的因素。方法以低出生体重儿(1 500g≤体重2 500g)为研究对象,采用16SrRNA荧光定量PCR技术检测新生儿出生后第1天、3天、7天粪便中双歧杆菌、乳杆菌、大肠埃希菌和肠球菌4种细菌的含量,比较正常新生儿与低出生体重儿肠道菌群构建的差异;分析不同胎龄、体重、喂养方式、疾病状态等因素对低出生体重儿肠道微生态平衡的影响。结果 (1)低出生体重儿组和健康新生儿组粪便中大肠埃希菌、肠球菌、乳杆菌和双歧杆菌含量与婴儿日龄呈明显正相关关系,且低出生体重儿组婴儿粪便4种细菌含量均明显低于健康对照组(P0.05)。(2)2 000g≤体重2 500g组低出生体重儿大肠埃希菌和肠球菌含量在各日龄明显高于体重2 000g组新生儿(P0.05),双歧杆菌和乳杆菌含量在3日龄和7日龄阶段明显高于体重2 000g组(P0.05),而1日龄阶段差异无统计学意义(P0.05)。(3)母乳喂养组在3日龄和7日龄阶段双歧杆菌和乳杆菌含量明显高于乳制品喂养组(P0.05)。(4)无并发症患儿组在3日龄和7日龄阶段乳杆菌和双歧杆菌含量明显高于有并发症组(P0.05)。结论低出生体重儿肠道菌群构建规律异于正常新生儿,尤其是乳杆菌和双歧杆菌的定植差异更为突出;低出生体重儿的出生体重与肠道乳杆菌和双歧杆菌的含量呈正相关;母乳喂养对低出生体重儿肠道中益生菌的定植有明显的优势;新生儿相关疾病直接影响低出生体重儿肠道微生态的构建,可导致其胃肠道生态系统的异常;16S rRNA荧光定量PCR技术适用于评价婴幼儿肠道微生态状况。     

高危HPV 感染及hTERC 基因在宫颈癌发生发展中的相关性

目的:探讨高危人乳头瘤病毒及人类染色体端粒酶基因(hTERC)在宫颈癌发生发展中的关系。方法:2010年10月至2011年05月就诊于哈尔滨医科大学附属第一医院妇科患者445例,采用表面等离子体谐振法(SPR)及荧光原位杂交法(FISH)分别检测高危HPV和hTERC的表达情况,对任一结果阳性者行阴道镜下宫颈活检和病理学检查,其中炎症对照组45例,CIN组33例及宫颈癌组6例。结果:单一型HPV29例,多重型26例,最常见为HPV16型合并的二型感染(17例)。在炎症组,CINⅠ组,CINⅡ组、CINⅢ组及宫颈癌组中多重高危HPV比率为17.78%、28.57%、44.44%、50.00%、66.67%,与炎症对照组比较其他组均有统计学意义(P<0.05)。hTERC基因在各组中的阳性表达率分别为2.22%、14.29%、61.11%、75.00%及100%。CIN组及宫颈癌的hTERC基因表达与炎症组比较差异均有统计学意义(P均<0.01),其中CINⅡ及以上各组差异明显。多重HPV感染与hTERC表达呈中等正相关(r=0.462,P<0.01)。结论:随着宫颈病理类型分级升高,HPV感染及hTERC基因表达率升高,hTERC基因在宫颈癌发生发展中起重要作用;高危HPV感染与hTERC基因的异常扩增关系密切,提示二者可能存在因果关系。     

小于胎龄儿肠道菌群的前瞻性研究CSCD

目的调查小于胎龄(small for gestational age,SGA)儿出生早期肠道菌群特征,探究肠道菌群丰度对婴儿发育的影响。方法选择2021年7月至2022年2月在杭州市临平区妇幼保健院产科孕检母亲40例、出生婴幼儿40例作为研究对象,将分娩SGA婴儿妊娠妇女与分娩适于胎龄(appropriate for gestational age,AGA)婴儿妊娠妇女1∶1进行配对,匹配指标包括是否足月、BMI值是否在正常范围、母亲年龄±5岁以及顺产,作病例对照研究。符合入组标准的产妇40例,其中分娩SGA婴儿母亲20例,为SGA_M组;分娩AGA婴儿母亲20例,为Control_M组。对应新生儿40例,其中SGA婴儿20例,为SGA_C组;AGA婴儿20例,为Control_C组。采用高通量16S rRNA基因测序技术明确SGA婴儿肠道菌群的定植情况,采用Illumina NovaSeq 6000测序系统对V3~V4可变区进行高通量测序,获取肠道菌群的丰度和多样性分布情况。结果SGA组婴儿肠道内大肠埃希菌、双歧杆菌、肠球菌及乳杆菌拷贝数量均显著低于对照组(均P<0.05);基于alpha多样性Chao1指数的分析,估计群落中包含物种的数目,可以看出对照组与SGA组之间物种数目差异极显著;基于beta多样性主坐标分析PCoA的Unweighted_uniFrac_PCoA图,对照组和SGA组之间物种丰度有差异,ANOSIM,R=0.5,P<0.01。在科水平中,Lactobacillaceae、Enterobacteriaceae及Bifidobacteriaceae在4个组中差异均有统计学意义(均P<0.05)。在LEfSe分析中,与SGA组比较,对照组中差异显著的优势菌群数量较少,仅g_Leuconnostoc、f_Lactobacillaceae及g_Dongia为显著上调差异菌;而在SGA组中,差异上调菌群为g_Rothia、f_Micrococcaceae及o_Micrococcales,这些菌同样在SGA_M组与Control_M组比较中为SGA_M组显著上调的差异菌。结论SGA婴幼儿肠道菌群的丰富度和多样性个体间变异度高,致病菌占优,易导致患儿出现肠道微生态系统失衡,其与败血症等SGA婴幼儿并发症具有密切相关性。     

超声引导下经皮经肝胆囊穿刺置管引流术对高危急性胆囊炎患者炎症反应和肝功能的影响

目的:探讨超声引导下经皮经肝胆囊穿刺置管引流术(PTGD)治疗高危急性胆囊炎的疗效及对患者炎症反应和肝功能的影响。方法:选取2016年10月～2018年12月期间内蒙古医科大学附属医院收治的高危急性胆囊炎患者160例为研究对象,根据数字表法将患者随机分为对照组(n=80)和研究组(n=80),对照组给予胆囊造瘘术治疗,研究组给予超声引导下PTGD治疗,比较两组患者治疗后临床疗效、炎症反应以及肝功能指标变化情况,记录两组术后并发症发生情况。结果:研究组有效率高于对照组,住院时间短于对照组(P0.05)。对照组术后3 d、术后5 d以及研究组术后1 d、术后3 d、术后5 d白细胞计数、中性粒细胞百分比、C反应蛋白(CRP)水平均较术前降低(P0.05);研究组术后1 d、术后3 d、术后5 d白细胞计数、中性粒细胞百分比、CRP水平均低于对照组(P0.05)。两组患者术后1 d、术后3 d、术后5 d丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)水平均较术前下降,且研究组低于对照组(P0.05)。研究组术后并发症总发生率低于对照组(P0.05)。结论:超声引导下PTGD治疗高危急性胆囊炎,疗效确切,可有效减轻机体炎症反应、肝损伤,同时还可减少术后并发症发生率,具有较高的临床应用价值。     

Alberta婴儿运动量表指导治疗脑瘫高危儿的疗效观察

摘要 目的：通过运用Alberta婴幼儿运动量表评估并且治疗脑瘫高危儿,探讨婴幼儿早期运动发育的评价方法。方法：从国际和平妇幼保健院儿保康复科普通门诊2017年12月至2018年12月确诊的脑瘫高危儿中选取24例脑瘫高危患儿,采用随机数字表法随机分为治疗组和对照组,每组12例。治疗组通过量表指导家长进行家庭康复,对照组仅进行康复随访,评估三个月后患儿运动发育的改善情况。结果：治疗三个月后,两组Alberta分值均高于治疗前,且治疗组Alberta分值高于对照组(均P＜0.01)。结论：用Alberta婴儿运动量表指导评估、治疗脑瘫高危儿,效果显著,值得临床推广。     

高危型人乳头瘤病毒感染与女性生殖道常见病原菌和宫颈病变的关系

目的:探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染与女性生殖道常见病原菌以及宫颈病变的关系。方法:选取2017年1月至2018年6月于成都市妇女儿童中心医院进行宫颈癌筛查的732例妇女为研究对象,所有受试者均行HPV检测、生殖道病原菌检测,判定宫颈病变程度,统计高危型HPV感染及亚型分布特征,分析高危型HPV感染与女性生殖道常见病原菌和宫颈病变的关系。结果:732例妇女HPV感染率为44.95%,高危型HPV占85.11%,HPV-16在高危型HPV中占比最高。生殖道常见病原菌中感染率最高的是沙眼衣原体,感染率为18.99%,存在女性生殖道常见病原菌感染者高危型HPV的检出率高于未感染者(P0.05),而低危型HPV检出率在女性生殖道常见病原菌感染者和未感染者无统计学差异(P0.05)。高危型HPV检出率随着宫颈病变程度加重而升高(P0.05)。结论:高危型HPV感染与女性常见生殖道病原菌感染和宫颈病变程度有关,高危型HPV感染率越高,发生宫颈癌的危险性越大。     

青海地区46273例女性宫颈HPV检测结果分析

摘要 目的：根据青海地区妇女宫颈人乳头瘤病毒（HPV）检测结果,分析宫颈高危HPV（HR-HPV）感染分布特点,为指导HPV疫苗接种提供理论依据。方法：采用Hybriuax技术检测21种高危型HPV亚型,对2014年1月-2020年2月于我院就诊的46273例女性宫颈人乳头瘤病毒分型检测。结果：46273例妇女中,高危HPV阳性率10.23%,高危HPV阳性率和年龄之间存在线性趋势,随年龄的增大感染比例上升。单一高危亚型HPV感染前三位的HPV亚型为16、58和39,合计占到45.64%。HPV亚型感染以单高危阳性为主,占总HPV阳性数的88.26%,占全部筛查人数的9.03%。HPV16、58、31、68亚型阳性率和年龄段之间存在线性趋势,随年龄的增大感染比例上升。HPV感染亚型检出构成比各年龄段均以HPV16感染排在第一位,排在第二位除61-70岁为双高危外,均为HPV58为主。结论：青海地区女性HPV感染率较高,以单一高危型感染为主,HPV16、58、39、52是主要的感染亚型,所以应针对青海地区HPV感染状况设计具有针对性的预防HPV感染亚型的疫苗。     

宫颈癌中高危型HPV感染与miR-362-3p、Nemo样激酶表达的相关性研究

高危型人乳头瘤病毒(High-risk human papillomavirus,HPV)感染是宫颈癌发病的重要因素,但高危型HPV感染引起宫颈上皮恶变的机制尚不清楚.微小RNA (micro RNA,miR)-362-3p是具有抑癌活性的miR,在宫颈癌中表达降低;Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)是生物信息学预测得到的miR-362-3p靶基因,在宫颈癌中表达增加.但宫颈癌发病过程中高危型HPV感染与miR-362-3p、NLK的关系尚不清楚.本研究检测了miR-362-3p、NLK在宫颈癌组织及宫颈癌细胞株中的变化,并通过转染miR-362-3p模拟物、NLK表达质粒的方式验证了miR-362-3p靶向NLK调节高危型HPV阳性宫颈癌细胞增殖的作用.结果 显示:与癌旁组织比较,宫颈癌组织中miR-362-3p的表达明显降低、NLK的表达明显增加且与高危型HPV阴性的宫颈癌组织比较,高危型HPV阳性的宫颈癌组织中miR-362-3p的表达明显降低、NLK的表达明显增加;与正常宫颈上皮细胞比较,HPV16感染的SiHa细胞、HPV18感染的HeLa细胞及HPV阴性的C33A细胞中miR-362-3p的表达明显降低、NLK的表达明显增加且SiHa细胞中miR-362-3p表达降低、NLK表达增加最明显;在SiHa细胞中,过表达miR-362-3p能够降低细胞活力及NLK的表达,同时也使NLK双荧光素酶报告基因的荧光活力降低;过表达NLK能够逆转miR-362-3p降低细胞活力及NLK表达的作用.以上结果表明宫颈癌中高危型HPV感染与miR-362-3p低表达、NLK高表达有关,过表达miR-362-3p通过靶向抑制NLK降低高危型HPV感染宫颈癌细胞的增殖活力.本研究的创新点在于初步探索了高危型HPV感染促进宫颈癌细胞增殖的作用及机制,在高危型HPV感染的宫颈癌中miR-362-3p表达减少并靶向引起NLK表达增加,进而促进了宫颈癌细胞的增殖,这为将来深入认识高危型HPV引起宫颈癌发病的机制提供依据.     

TCT＋HPVDNA检测＋阴道镜检查对宫颈病变临床价值的研究

目的探讨对宫颈癌的筛查方法及其在防治中的作用。方法2012年3月至2012年8月,在绥化市第一医院妇科门诊行TCT检查的患者,年龄23—75岁,随机分为两组每组52例,一组宫颈液基细胞学检查阳性者行HPV检测,后再行阴道镜宫颈活检。一组宫颈液基细胞学检查阳性者直接行宫颈盲取活检。评价TCT检查联合HPV检测＋阴道镜诊断宫颈病变的作用。结果52例ASC-US患者,行HPV-DNA检测,阳性率为33．33％,HPV-DNA阳性率差异有统计学意义,P〈0.05。结论TCT＋高危型HPV是宫颈癌筛查中的最有效的方式,也是首选方法。若联合阴道镜检查则更能提高宫颈癌的检出率。     

乙肝疫苗在高危人群中的长期效果

<正>乙肝病毒慢性感染是全球性卫生问题。在试图控制感染的过程中,全球乙肝疫苗接种计划已经确立下来。沙特阿拉伯是乙肝病毒感染的地方性流行区,在1989年就建立了HBV免疫计划,此项交叉截