纳米基因转运体——原理、研制与应用

基因转移是基因治疗的关键技术,一直以来也是制约基因治疗成功开展的瓶颈问题.随着纳米技术的发展,纳米基因转运体的研制获得了积极发展,其系统内和细胞内基因转移机理得到了深入阐明.设计与研制在体内循环时间长、具有靶特异性的纳米转运体为突破基因转移瓶颈,实现安全、高效和靶向性基因治疗带来了新的希望.     

天然橡胶的生物合成机制

综合介绍了近年来有关橡胶生物合成机理研究方面的进展 ,包括橡胶分子结构 ,橡胶颗粒结构 ,橡胶生物合成途径、酶系及调控等问题     

Cr6+污染对水鳖的超微结构及菱、

Cr6+污染对水鳖超微结构的影响主要表现在胞间连丝呈现不同程度的断裂;细胞核出现各种各样的变形;叶绿体膨胀,其基粒解体.细胞损伤程度与Cr6+培养浓度呈正相关.Cr6+对水鳖、菱、莼菜和黑藻这几种水生高等植物的细胞膜影响主要表现在质壁发生分离,质壁之间有黑色颗粒存在.在做生理验证时发现处理组的膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)和超氧阴离子(O2)均高于对照.     

水霉Saprolegnia菌丝内细胞颗粒运动的特征

水霉菌丝内细胞颗粒的运动布朗运动和跳跃运动两种形式。跳跃运动的速度在０．０９至４μｍ／ｓ之间。细胞颗粒运动的速度时刻改变，不是均速运动。在同一根菌丝内细胞颗粒运动的速度与颗粒大小无明显相关性；在不同的菌丝内细胞颗粒运动的速度差异明显。细胞颗粒有共同的运动轨道。运动轨道变曲，并与细胞长轴基本平行，在同一运动轨道上，不同细胞颗粒的运动速度不同。     

不同脊髓灰质炎病毒株3CD蛋白酶在昆虫细胞中的表达及其对P1前体蛋白的剪切

目的获得在昆虫细胞中有效表达脊髓灰质炎病毒P1基因和3CD基因的重组杆状病毒,为制备脊髓灰质炎病毒样颗粒疫苗提供了科学依据。方法将I型脊髓灰质炎病毒(Mahoney株)的P1基因和3CD基因构建到供体质粒中,通过flash BAC ULTRATM系统制备重组杆状病毒;将Mahoney株的P1基因与Sabin株Ⅲ型的3CD基因组合,用同样方法构建重组杆状病毒。通过接种昆虫细胞草地贪夜蛾细胞(sf-9细胞)对两种病毒进行扩增,再接种昆虫细胞粉纹夜蛾细胞(High five细胞)扩大培养,并通过定量PCR对P1和3CD基因的表达进行验证,利用Western blot检测P1蛋白的表达及被3CD蛋白酶剪切的情况。结果获得了两株稳定表达脊髓灰质炎病毒P1和3CD基因的重组杆状病毒。其中,重组杆状病毒(Bac U-Mahoney-P1-3CD)在感染细胞后,3CD蛋白酶表达量较低,不能有效剪切P1前体蛋白;而重组杆状病毒(Bac U-Mahoney-P1-Sabin PV3 3CD)感染细胞后,3CD蛋白酶的表达量和对P1前体蛋白的剪切效力都有明显提高(P<0.05)。结论将Mahoney株P1基因和Sabin株Ⅲ型的3CD基因的组合构建重组杆状病毒,可有效地在昆虫细胞中表达P1和3CD基因,并且Sabin株Ⅲ型的3CD蛋白酶可有效地剪切Mahoney株的P1前体蛋白。     

氧化应激对磷酸三钙磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其机制

目的：探讨氧化应激对磷酸三钙（TCP）磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其作用机制。方法：36只雄性ICR小鼠随机分为3组（n=12）：假手术（Sham）组、TCP磨损颗粒（TCP）组和N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）组。将TCP磨损颗粒30 mg包埋于小鼠颅骨顶部构建假体周围骨溶解模型,于术后第2天颅顶骨膜局部注射NAC（1.0 mg/kg）,隔日1次,持续2周后处死动物采血、取颅骨。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察小鼠颅骨假体周围骨溶解情况;ELISA和化学比色法检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和总抗氧化能力（T-AOC）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;Western blot检测假体周围骨组织中内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、磷酸化PERK（p-PERK）、真核细胞翻译起始因子2α（eIF2α）和磷酸化eIF2α（p-eIF2α）的表达。结果：与Sham组比较,TCP组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及假体周围骨溶解面积显著增加（P<0.05）,T-AOC含量和SOD活性明显降低（P<0.05）,GRP78蛋白质表达、p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α值显著升高。与TCP组比较,NAC组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及骨溶解面积明显减少（P<0.05）,血清T-AOC含量和SOD活性明显增加（P<0.05）,GRP78蛋白质表达、p-PERK/PERK和p-eIF2α/eIF2α值明显降低。结论：抑制氧化应激可阻止TCP磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解,其机制可能与PERK/eIF2α通路的失活有关。     

活性氧参与一氧化氮诱导的神经细胞凋亡

采用激光共聚焦成像技术，用氧化还原敏感的特异性荧光探针(DCFH-DA和DHR123)直接研究了一氧化氮供体S-亚硝基-N-乙酰基青霉胺(SNAP)诱导未成熟大鼠小脑颗粒神经元凋亡过程中的细胞胞浆、线粒体中活性氧水平的变化，发现神经细胞经0.5 mmol/L SNAP处理1 h后，细胞胞浆及线粒体中活性氧水平大大增加.一氧化氮清除剂血红蛋白能够有效抑制细胞胞浆、线粒体中活性氧的产生，防止细胞凋亡.外源性谷胱甘肽对细胞也具有良好的保护作用，而当细胞中谷胱甘肽的合成被抑制后，一氧化氮的神经毒性大大增强.实验结果表明一氧化氮通过促进神经细胞产生内源性活性氧而启动细胞凋亡程序，而谷胱甘肽可能是重要的防止一氧化氮引发神经损伤的内源性抗氧化剂.     

脑脉利颗粒联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液对急性脑梗死患者神经功能、血液流变学和氧化应激的影响

目的：探讨脑脉利颗粒联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液对急性脑梗死（ACI）患者神经功能、血液流变学和氧化应激的影响。方法：选取南京市中心医院及常州市第一人民医院在2022年7月-2023年7月收治的ACI患者140例,根据随机数字表法将患者分为对照组（n=70,常规治疗联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液治疗）和观察组（n=70,对照组基础上接受脑脉利颗粒治疗）。对比两组疗效、神经功能、日常生活活动能力、血液流变学和氧化应激变化情况。结果：观察组的临床总有效率较对照组更高（P<0.05）。观察组治疗后美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、血浆黏度、全血低切黏度、全血高切黏度、红细胞压积、丙二醛（MDA）低于对照组,日常生活能力量表评分（Barthel指数）评分、超氧化物歧化酶（SOD）高于对照组（P<0.05）。结论：脑脉利颗粒联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液治疗ACI患者,有助于调节血液流变学,改善患者的神经功能,减轻氧化应激,提高其日常生活活动能力。     

乳癖散结颗粒联合达那唑治疗乳腺增生老年妇女内分泌激素及体重指数的疗效分析

目的：本研究旨在探讨乳癖散结颗粒联合达那唑治疗乳腺增生老年妇女内分泌激素及体重指数的疗效分析。方法：以2020年4月-2023年4月在我院诊治的102例老年妇女乳腺增生患者,分为对照组(给予达那唑治疗)和研究组(给予乳癖散结颗粒联合达那唑治疗)各51例,对比两组治疗后临床疗效及不良反应,分析内分泌激素、体重指数、免疫功能、疼痛程度及生活质量。结果：(1)治疗后,研究组临床疗效高于对照组(P<0.05);(2)治疗前,两组T、P、E₂、PRL水平比较,差异不显著(P>0.05);治疗后,研究组T、P、E₂、PRL水平优于对照组(P<0.05);(3)治疗后,研究组CD4⁺、IgG、IgA水平优于对照组(P<0.05);(4)治疗后,研究组精神状况、日常生活、食欲、睡眠评分较对照组高(P<0.05);(5)治疗后,研究组不良反应低于对照组(P<0.05)。结论：乳癖散结颗粒联合达那唑能够有效治疗老年妇女乳腺增生患者,可调节内分泌激素水平,不会影响体重指数,值得临床推广应用。     

乙肝核心抗原与外源抗原决定簇融合的基因工程肽苗研究进展

乙肝核心抗原与外源抗原决定簇融合的基因工程肽苗研究进展朱运峰（军事医学科学院生物工程所１００８５０）随着分子生物学的飞速发展,疫苗的发展已经历了几次大变革,早期的血源性疫苗由于受来源、数量等条件的限制,后被亚单位疫苗所取代,然而亚单位疫苗又受到不同亚型的限制,继而出现了合成肽苗,它克服了血清型不同的差异,且不含任何无用成分,无副作用,但由于其抗原决定簇本身的分子量较小,免疫原性低,且单个抗原决定簇受MHC限制,不能使各种HLA单倍型个体产生免疫应答,[1]幻因此对合成肤苗进行改造就成为新一代疫苗研究的主要课题。