Cpn0308基因真核载体构建及鉴定

目的:构建Cpn0308基因真核表达重组质粒,为肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)核酸疫苗的研制做准备。方法:用PCR技术从Cpn AR39株基因组DNA中扩增Cpn 0308基因,经双酶切、连接等反应,重组入pcDNA3.1/HisA真核表达载体,转化到感受态细胞,再经含氨苄青霉素的LB培养基筛选,酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果:从Cpn AR39株基因组DNA中扩增出特异的Cpn 0308基因,约400bp;酶切、重组、转化、筛选鉴定出pcDNA3.1/HisA-Cpn0308重组质粒;序列测定证实与GenBank登录的肺炎衣原体Cpn AR39株Cpn0308基因一致。结论:功地构建了pcDNA3.1/HisA-Cpn0308重组质粒,为肺炎衣原体核酸疫苗的研制奠定了基础。     

肺炎支原体感染与咳嗽变异性哮喘的关系探讨

近来,每年都有肺炎支原体感染的散发和不同程度的流行。肺炎支原体(MP)已成为小儿呼吸道感染的重要病原。目前,肺炎支原体与咳嗽变异性哮喘(CVA)的关系越来越受到重视。本文通过对86例咳嗽变异性哮喘进行回顾性分析,现报告如下。1对象与方法1.1对象CVA组:2004年2月至2006年4月在台州市中心医院儿科门诊及随访的病例。所有病例均符合儿童咳嗽变异性哮喘防治常规的诊断标准[1],并血清支原体抗体检测治疗组45 0.61±0.22 6.2±1.5对照组43 0.83±0.38 9.1±1.3P值<0.05<0.05(日本富士株式会社生产,应用颗粒凝集法测定MP-IgM,MP-IgM≥1∶…     

肺炎嗜衣原体、IL-6与冠心病关系的血清学探讨

采用血清学的方法观察冠心病(CHD)与肺炎嗜衣原体感染及白细胞介素-6之间相关性并对其致病机理作一简要探讨。用酶联免疫吸附分析(ELISA)技术检测136例CHD患者血清中的肺炎嗜衣原体抗体CP-IgA、CP-IgG、CP-IgM阳性率,并对其中肺炎嗜衣原体阳性者进行IL-6的检测。有64%CHD患者血清特异性CP-IgA呈阳性,与健康对照组的8.8%阳性率差异显著(P<0.01);而CP-IgG和CP-IgM与对照组的阳性率无显著差异(P>0.05);CHD肺炎嗜衣原体CP-IgA阳性者的IL-6明显高于对照组,两者之间有显著的差异(P<0.01)。冠心病病人血清肺炎嗜衣原体抗IgA的高阳性率与冠心病之间存在着有意义的联系,是CP-IgA慢性感染CP的标记物,肺炎嗜衣原体感染参与了冠心病的发生与发展。而炎症因子IL-6水平的升高也提示炎症反应在冠心病的发生以及疾病的发展过程中起着重要的作用。     

肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对荚膜多糖的调控作用

摘要:【目的】研究肺炎链球菌糖代谢蛋白CcpA对肺炎链球菌荚膜多糖(CPS)的调控作用。【方法】利用大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌原核表达CcpA蛋白,使用Ni2+亲和层析的方法纯化蛋白。利用纯化后的CcpA蛋白免疫昆明小鼠并制备多克隆抗体;采用ELISA法测定抗CcpA抗体效价。随后,利用Westertn blot方法分析CcpA蛋白在肺炎链球菌中的保守性。另外,利用EMSA方法分析CcpA与cps基因座启动子区域片段的结合。最后,构建ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株;利用ELISA法测定野生D39菌 株、ccpA基因缺失株和ccpA基因回复株的荚膜多糖含量。【结果】Western blot结果显示CcpA蛋白在多种血清型的肺炎链球菌均有表达,CcpA蛋白可与cps基因座启动子区域结合,且呈剂量依赖性;ccpA基因缺失时,细菌CPS含量升高,回复表达CcpA蛋白后,CPS含量显著降低。【结论】CcpA是肺炎链球菌中一种保守表达的蛋白,可通过调节cps基因座启动子负性调控肺炎链球菌荚膜多糖的表达。     

阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的效果观察和安全性分析

目的观察大环内酯类抗生素阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的临床疗效,并对用药安全性进行评价。方法选择我院2012年6月至2014年10月呼吸科收治的96例小儿支原体肺炎患者,随机平均分为观察组和对照组。观察组给予阿奇霉素治疗,对照组给予红霉素治疗,观察两组的临床疗效和不良反应。结果观察组患者治愈37例,显效8例,无效3例,总有效率为93.75%;对照组治愈30例,显效9例,无效9例,总有效率为81.25%,治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组患者平均退热、止咳、平喘、肺部啰音消失时间均短于对照组,平均住院时间和住院花费均少于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组均偶见局部皮疹、注射部分疼痛等轻度不良反应,差异无统计学意义;观察组无胃肠道反应,对照组有4例胃肠道反应。结论阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎能有效改善临床症状,较红霉素能提高治疗效果,缩短病程,且无严重不良反应,安全可靠,值得推广应用。     

含有两种常见肺炎球菌蛋白的疫苗的安全与免疫原性

<正>背景:为了提供抗肺炎球菌性疾病的广谱保护,新型的含有保守的肺炎链球菌蛋白的疫苗正在被人们开发出来。该研究评价了含有肺炎链球菌蛋白肺炎链球菌溶血素类毒素(dply)和三联组氨酸蛋白的Pht D的4种配方制剂在学步儿童中的安全和免疫原性。方法:在这项Ⅱ期临床试验中,采取了多中心,观察者盲性,在捷克的学步儿童(12~23月龄的儿童)中进行。按照随机原则(1∶1∶1∶1∶1)接受     

接种23价肺炎球菌多糖疫苗预防慢性阻塞性肺疾病急性发作的经济成本效益分析

目的了解23价肺炎疫苗对COPD患者急性发作的预防保护效果及成本效益分析。方法从2013年9月汉滨区新型农村合作医疗报销登记数据库中,随机抽取8个乡镇COPD症状的患者230人作为研究对象,以收集对象接种23价肺炎疫苗前后各一年的治疗成本及住院天数,并进行对比分析两组数据。结果接种23价肺炎疫苗后治疗成本、住院天数均显著低于接种前。接种疫苗后总效益803 716元,接种疫苗后效益成本比为11.4∶1,接种疫苗后净效益达到733 336元。结论 23价肺炎疫苗能有效预防COPD的急性发作,并降低COPD急性发作所致的治疗成本。     

肺炎支原体P1蛋白的研究进展

肺炎支原体(MP)是引起呼吸系统感染常见的病原微生物,P1蛋白是肺炎支原体上一种与黏附相关的跨膜蛋白,其黏附作用是引发炎症作用的重要原因.目前新发现的一种被称为孤立岛3的P1变异体引起了各学者的广泛关注.另外,还可以利用P1蛋白进行MP感染的实验室诊断.因此,探讨P1蛋白基因结构、致病机制和实验室诊断方法具有重要意义.     

肺炎支原体液体培养法检测的实验评价

目的比较液体培养法和固体培养法平行检测肺炎支原体结果的一致性;评价液体培养法检测肺炎支原体的可靠性。方法采用液体培养基和固体琼脂培养基平行检测1 648份临床标本的肺炎支原体,比较同一份标本在2种培养基上的检测结果。结果液体培养法阳性296例,阳性率为18%;固体培养法阳性244例,阳性率为14.8%;液体培养法阳性而固体培养法阴性57例;固体培养阳性而液体培养法为阴性5例。2种方法的阳性检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺炎支原体快速液体培养法与固体培养有较好的一致性,具有方便、简单、准确且可以用于早期检测等优点,适合临床大批量标本筛查。需结合患者临床症状等排除真菌和耐药菌造成的假阳性。     

急性肺炎支原体感染儿童白细胞和C 反应蛋白的变化及其临床意义

目的:探讨急性肺炎支原体感染后儿童白细胞及CRP变化的规律,为该病的临床治疗与诊断提供参考。方法:对65例急性肺炎支原体感染儿童和同期65例健康儿童的血常规白细胞和CRP检测结果采用t检验进行统计比较,分析二者的差异。结果:与同期健康儿童相比,急性肺炎支原体感染儿童白细胞计数增高,中性粒细胞比例及绝对值增高,淋巴细胞比例及绝对值下降,嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及单核细胞比例及绝对值均无明显变化,CRP水平明显升高。结论:急性肺炎支原体感染儿童通过白细胞、CRP的变化可以初步判断。