细菌Ⅴ型分泌系统研究进展

目前已知革兰阴性(G-)细菌的分泌系统至少有5种类型,即Ⅰ～Ⅴ型。其中Ⅴ型分泌系统为G-菌外膜通道转运蛋白系统中最大的一个家族,该系统又称自主转运蛋白系统,它首先通过Sec依赖的分泌通路跨内膜转运,到达外周质间隙后,又通过自身的C端在外膜上形成一个β折叠桶实现跨外膜转运。Ⅴ型分泌系统的分泌装置最为单一,且该系统分泌的蛋白在跨外膜转运过程中似乎不需要能量和辅助因子(蛋白)的参与。随着对运用Ⅴ型分泌系统在G-菌表面展示异源性多肽/蛋白质的深入研究,该系统在生物技术领域已展示出巨大的应用前景。     

产科感染革兰阴性菌株产超β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 了解引起产科感染革兰阴性杆菌产超β-内酰胺酶（ESBLs）及耐药情况。方法采用ESBLs确认试验检测ESBLs,头孢西丁三维试验检测AmpC和K-B进行药敏试验。结果 革兰阴性杆菌ESBLs、AmpC酶总检出率分别为32．0％、33．6％,单产ESBLs、单产AmpC、同产ESBLs＋高产AmpC酶和ESBLs＋诱导AmpC酶菌株依次占11．9％、13．5％、14．1％和6．03％．总分离株对亚胺培南、头孢哌酮-他唑巴坦的耐药率分别为5．28％、6．54％,其次为头孢吡肟,为25．0％。单产酶株较非产酶株,双产酶株较单产酶株具有较高的耐药率。结论 产酶是产科感染革兰阴性菌株多重耐药的主要原因之一,亚胺培南和头孢哌酮-他唑巴坦、头孢吡肟（FEP）对其具有良好的抗菌活性。     

肿瘤患者感染三种常见革兰阴性杆菌耐药性分析

目的分析肿瘤患者临床分离的革兰阴性杆菌分布及其主要菌株的耐药性,为指导临床合理用药提供依据。方法对2014年1月~2015年12月恶性肿瘤患者感染分离的1478株革兰阴性杆菌及其主要菌株的耐药性进行回顾性分析。结果分离的1478株革兰阴性杆菌中,以大肠埃希菌(568/1478)38.43%、肺炎克雷伯菌(338/1478)22.87%、铜绿假单胞菌(216/1478)14.61%3种为主。这3种革兰阴性杆菌均呈多药耐药性;除亚胺培南对革兰阴性杆菌有较好的抗菌活性外,其它药物均显示有一定的耐药性,其中对派拉西林的耐药率在91%以上,头孢他啶、头孢噻肟、复方新诺明等药物的耐药率在70%以上。结论肿瘤患者感染革兰阴性杆菌耐药现象严重,尤其是感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌呈多重耐药,实验室应加强对革兰阴性杆菌耐药性的监测,以指导临床合理选用抗菌药物。     

血液病患者革兰阳性菌感染病原菌构成及耐药性分析

目的 探讨血液病患者革兰阳性菌感染发生率、病原菌构成及其耐药性,为临床抗菌药物的合理使用提供参考.方法 对浙江大学医学院附属第一医院血液病患者临床标本进行细菌培养、细菌鉴定、药敏检测及耐药性分析.结果 革兰阳性菌分离率由2007年19.9％上升到2011年32.9％.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)与耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)的检出率分别为61.4％、43.1％,MRSA、MRSE、肠球菌呈多重耐药,但未发现耐万古霉素菌株.结论 近年来血液病患者革兰阳性菌感染呈上升趋势,且多重耐药现象严重,应根据药敏试验结果合理选用抗生素,谨慎使用万古霉素,以减少或避免新耐药菌株的出现.     

p38 MAPK通路在脂多糖致呼吸道上皮损伤中的作用

脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革兰阴性杆菌细胞壁的主要组成成分,也是一种很强的炎症反应和氧化应激诱导剂。呼吸道上皮是机体防御外界细菌、病毒、香烟烟雾等生物和化学因素损伤的天然屏障,在维持呼吸道局部微环境稳态中可发挥重要作用,也是吸入性药物治疗的主要靶细胞。呼吸道上皮结构完整性缺陷或功能紊乱还参与了哮喘、慢性阻塞性肺疾病等多种肺部疾病的发生和发展。LPS可引起呼吸道上皮损伤,但其具体的分子机制目前尚不清楚。p38丝裂原活化蛋白激酶(P38mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)作为MAPK家族四个亚家族成员之一,包含四个成员:p38α、p38β、p38γ和p38δ,可通过经典和非经典的p38 MAPK信号通路激活方式及通过激酶活性无关的功能参与调控炎症反应、细胞生长、细胞分化和细胞死亡等多种病理生理过程。本文就p38 MAPK信号通路在LPS致呼吸道上皮损伤中的作用做一综述。     

革兰阴性杆菌同产超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的耐药性分析

目的了解革兰阴性杆菌同时表达超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶(AmpCs)情况及耐药性。方法采用ESBLs确认试验检测ESBLs,头孢西丁三维试验检测AmpCs,用KB法进行药敏试验。结果4098株革兰阴性杆菌中,检出同产ESBLs+AmpCs株739株,占18.0%;其中ESBLs+高产AmpCs508株,占12.4%,主要见于不动杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,检出率分别为50.8%、44.1%和42.2%;ESBLs+诱导AmpCs231株,占5.6%,粘质沙雷菌、不动杆菌检出率分别为35.1%、27.7%;产ESBLs+高产AmpCs菌株对亚胺培南(IMP)、头孢哌酮-他唑巴坦(CSL)和头孢吡肟(FEP)的耐药率分别为3.54%、6.30%和51.8%,均显著低于其余抗生素的耐药率(均P<0.001);产ESBLs+诱导AmpCs菌株对亚胺培南、头孢哌酮-他唑巴坦和头孢吡肟的耐药率分别为1.30%、6.06%和38.5%,均显著低于其余抗生素的耐药率(均P<0.001)结论同时产生超广谱β-内酰胺酶和AmpCs菌株对多重药物耐药,IMP、CSL和FEP对其具有良好的抗菌活性。     

产超广谱β-内酰胺酶阳性菌检测及其耐药性分析

目的 了解新乡市中心医院近年来产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性菌的种类、分布及对11种常用抗菌药物的耐药情况,为控制其扩散、暴发流行和指导临床治疗提供科学依据。方法 对该院2003年1月～2004年1月从临床各类标本中分离的革兰阴性菌用双纸片协同法筛选产超广谱β-内酰胺酶阳性菌株,采用K-B纸片扩散法比较亚胺培南等11常用抗菌药物对产ESBLs耐药菌体外抗菌作用。结果 产ESBLs耐药株占全部革兰阴性菌的22.82%,克雷伯菌属、肠杆菌属、埃希菌属、假单胞菌属和沙雷菌属ESBLs的流行较严重,检出率分别为31.22%、29.02%、27.23%、25.19%和23.08%,在11种常用抗菌药物中,亚胺堵南的体外抗菌活性最好,敏感率为100%。结论 革兰阴性菌中,ESBLs阳性菌的发生率较高,同时ESBLs阳性菌有较高的耐药性。实验室应注重ES-BLs的检测和报告,指导临床合理应用抗生索,有效地控制ESBLs菌株在医院内的传播和流行。     

豆豉中发酵菌株的分离与鉴定

目的 从豆豉菌曲中分离并鉴定其发酵菌株.方法 将豆豉菌曲采用平板稀释的方法进行菌种分离后,采用革兰染色和16S rDNA序列分析进行菌株的鉴定.以黑豆为原料,分别接种分离的菌株进行豆豉的纯种发酵,观察并测定豆豉在发酵过程中的外观、温度、气味的变化.结果 筛选并鉴定获得10株分属魏斯菌、乳杆菌、芽胞杆菌和葡萄球菌等的菌株,且用枯草芽胞杆菌、发酵乳杆菌纯种发酵的豆豉在外观及气味等方面与自然发酵相近.结论 分离得到的枯草芽胞杆菌、发酵乳杆菌可取代自然发酵菌种,作为工业纯种发酵的参考菌株应用.     

关节镜清理联合抗菌药物治疗膝关节革兰阳性菌感染的疗效观察

目的:探讨关节镜清理联合抗菌药物治疗膝关节革兰阳性菌感染患者的疗效,为临床合理治疗提供参考依据。方法:选取2017年4月～2019年7月在我院治疗的经细菌学检查确诊为革兰阳性菌感染的膝关节炎症患者128例,随机分为观察组和对照组,各64例,观察组接受关节镜下膝关节清理术联合万古霉素或替考拉宁治疗,对照组接受万古霉素或替考拉宁治疗。分析患者治疗前病原菌分布情况,比较两组临床疗效、不良反应发生情况及复发率,比较两组患者的膝关节症状评分、体征评分。结果:128例革兰阳性菌感染患者中,共检出病原菌128株,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌及肠球菌分别占23.71%、25.77%、24.74%、20.62%。观察组的优良率为95.31%(61/64),高于对照组的81.25%(52/64),两组优良率比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后观察组的膝关节症状评分、体征评分均低于对照组(P0.05)。观察组的复发率低于对照组(P0.05),而两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:采用关节镜清理联合抗菌药物治疗膝关节革兰阳性菌感染患者疗效确切,可改善患者症状积分和体征积分,降低复发率,安全可靠。     

厌氧产氢颗粒污泥蛋白质组分析样品的高效制备方法

【背景】厌氧产氢颗粒污泥比絮状产氢污泥具有更高的生物量、沉降性与反应效率,对颗粒污泥进行蛋白质组学研究,有助于揭示其代谢调控的分子机制,从而对厌氧代谢过程进行优化调控。目前关于产氢颗粒污泥蛋白质组分析样品制备方法的研究尚未见文献报道。革兰氏阳性菌Ethanoligenens harbinense YUAN-3是自凝集产氢发酵细菌,在间歇和连续流培养中可形成自聚集的厌氧颗粒,由于其全基因组信息清楚,可作为模式研究材料对制备方法进行评估。【目的】针对厌氧产氢颗粒污泥的蛋白质组学研究,比较不同蛋白质提取方法进行优化。【方法】分别利用液氮研磨、超声破碎、匀浆破碎对产氢颗粒污泥破碎,比较这3种方法对总蛋白提取量的影响;通过双向电泳比较三氯乙酸(Trichloroacetic acid,TCA)-丙酮沉淀法与苯酚抽提法对总蛋白提取效果的影响;对总蛋白样品分别进行同位素标记相对和绝对定量标记(Isobarictagsforrelativeandabsolutequantification,i TRAQ)、串联质谱标签(Tandemmasstag,TMT)标记以及质谱鉴定。【结果】液氮研磨、超声破碎、匀浆破碎3种破碎方法下总蛋白的提取量分别是对照样品的2.0、3.9与5.2倍。与TCA-丙酮沉淀法相比,苯酚抽提法总蛋白样品在双向电泳图谱上的蛋白质点明显增多,分布均匀,同时其在碱性蛋白端与小分子量蛋白端的蛋白质点也明显增多。质谱分析发现,iTRAQ标记样品与TMT标记样品中分别鉴定到1797个与1644个蛋白,在分子量、等电点、亚细胞定位的各个分布范围内,这些蛋白良好地覆盖了E.harbinenseYUAN-3中各个类型的蛋白。【结论】匀浆破碎与苯酚抽提法联用的总蛋白制备方法更适用于厌氧产氢颗粒污泥,该方法有利于后续的蛋白质双向电泳和定量蛋白质组质谱分析,可作为产氢颗粒污泥以及革兰氏阳性菌总蛋白制备的方法参考。