用Gateway 系统构建携带Grb2-SH2 基因重组慢病毒载体

目的:构建携带Grb2-SH2基因重组慢病毒载体。方法:把Grb2-SH2基因从合成的工程载体PUC-57中导到入门载体pentr-3C中,再利用LR反应重组到目的载体plenti,通过酶切和测序分析对比验证Grb2-SH2基因后,将plenti-Grb2-SH2质粒利用慢病毒转染系统转染人胚胎肾上皮细胞株293T细胞获得携带Grb2-SH2慢病毒载体。结果:构建的重组质粒经酶切及测序和分析比对鉴定正确,目的基因片段大小约为500bp;该质粒与包装质粒共转染293T细胞获取的慢病毒,转染效率约为90%。结论:成功构建转载质粒plenti-Grb2-SH2及携带Grb2-SH2基因慢病毒载体。     

青岛蓝色生物医药产业园

青岛蓝色生物医药产业园位于美丽的胶州湾半岛北部,是未来青岛第三代新城的核心区。园区重点发展现代生物技术和新医药产业,发展方向包括国家基本药物、小分子药物、蛋白质药物、基因重组药物、海洋生物药、临床诊断试剂、现代生物制剂、高端生物实验设备及医疗设备等,     

生物工程药物生产纯化工艺研发指导思想和设计技巧

以重组DNA技术为特征的现代生物技术正在以产业发展形式实现其社会经济潜力。疾病和健康决定着人类的生存质量,医疗是我国人民最关心的问题之一,也是全球人民的重要需求。基因组学和蛋白质组学研究的进展使人类对疾病分子机制的认识更加深入,引起人们重新思考传统制药工业模式,     

自拟健脾化湿汤治疗非酒精性脂肪肝53 例疗效观察

目的:观察自拟健脾化湿汤治疗脾虚湿蕴证非酒精性脂肪肝的疗效.方法:对106例脾虚湿蕴证非酒精性脂肪肝患者按就诊顺序1∶1等分为自拟健脾化湿汤方治疗组、对照组两组,每组病例53例.两组患者在强调戒酒,控制饮食,加强运动的基础上,治疗组采用自拟中药健脾化湿汤治疗,对照组选用多烯磷脂酰胆碱胶囊治疗.用药疗程为3个月,疗程结束后统计疗效.结果:两组患者症状疗效比较,治疗组明显优于对照组(P＜0.01);两组患者治疗前后肝功能变化比较,治疗组优于对照组(P＜0.05);两组患者治疗前后血脂变化比较,治疗组优于对照组(P＜0.05);两组治疗前后CT检查结果比较,治疗组优于对照组(P＜0.05).结论:自拟健脾化湿汤治疗脾虚湿蕴证非酒精性脂肪肝疗效显著.     

青岛蓝色生物医药产业园

青岛蓝色生物医药产业园位于美丽的胶州湾半岛北部,是未来青岛第三代新城的核心区。园区重点发展现代生物技术和新医药产业,发展方向包括国家基本药物、小分子药物、蛋白质药物、基因重组药物、海洋生物药、临床诊断试剂、现代生物制剂、高端生物实验设备及医疗设备等,努力打造以生命科学为核心的生物医药科技产业集群。     

家蚕核型多角体病毒ORF 75基因的克隆和表达

河南农业大学植保学院尹新明、安世恒、江志伟、胡鹏等博士、教授根据GenBank序列L33180设计引物用PCR技术扩增了编码家蚕核型多角体病毒bombyx mori nueleopolyhedrovirus,BmNPVORF75基因的DNA片段,将其连接至PMD18-T载体上,获得了该基因的成熟蛋白阅读框序列,用设计的酶切位点将目的基因从克隆载体上切下,     

假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine, Phe)为唯一碳源生长。SEFA-PCR扩增转座子侧翼序列发现其与已报道的尿黑酸1,2-双加氧酶基因hmgA的同源性为92%。将hmgA定向克隆至表达载体pET-29a中,转化至Escherichia coli BL21,经IPTG诱导后可表达分子量约为48kD的蛋白;诱导后转化子粗酶液对尿黑酸有很好的降解效果。将hmgA连入自杀性载体pEX19Gm,通过同源重组整合至M18染色体中,使其恢复了DLL-E4利用Phe的能力,证实了HmgA是尿黑酸苯环裂解酶。     

狂犬病病毒CVS株核蛋白基因的原核表达、纯化及鉴定

用KT-PCR技术对狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因进行扩增,经克隆与序列分析,该基因编码450个氨基酸残基.将目的基因克隆到原核表达载体pET28a( )中,构建了重组质粒pET-N,将其转化表达菌BL21(DE3),于37℃1.0mmol/L IPTG条件下诱导表达.大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为54kD处出现一新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符.质谱鉴定的结果表明成功表达了RV N蛋白,为狂犬病的进一步研究奠定了基础.     

病毒干扰MHCⅠ类抗原呈递策略的研究进展

细胞表面MHCⅠ类分子在CTL的产生和作为CTL受体的配体清除病毒感染细胞中发挥着重要作用。因此,许多病毒在其生活周期的不同阶段干扰MHCⅠ类抗原呈递并不足为奇。深入理解病毒利用的干扰策略不仅有助于揭示病毒的致病机理,而且有助于制定新的对策避免病毒逃逸,这些研究最终可能建立有效控制病毒感染的免疫疗法。因此,本文将就病毒干扰MHCⅠ类抗原呈递策略的研究进展做一综述。     

道达尔与上海巴斯德研究所携手中国病毒性肝炎预防

2008年5月14日,道达尔集团与巴斯德研究所在上海签署了一项为期三年的科学合作项目,共同致力于加强中国病毒性肝炎的预防。