不动杆菌的分离鉴定及各类标本中的分布

不动杆菌属是一群不发酵糖类的革兰阴性球杆菌,是;临床L重要条件致病菌及医院内感染的常见菌之一,1986年巴斯德研究所的Bouret通过DNA杂交将该菌分为6个种［‘1,即醋酸钙不动杆菌,洛菲不动杆菌,溶血不动杆菌,鲍曼氏不动杆菌,琼氏不动杆菌及约翰逊不动杆菌。目前,对于该菌的临床细菌学研究报告诸多［2］,愈来愈引起广泛关注。我们将1990年卫月至1996年12月从各种临床标本中分离的344株不动杆菌的鉴定结果及药敏情况报告如下。1材料与方法1．且标本来源1990年卫月～1996年12月本院各科送检的血、尿、痰、胸腹水及其它标本。至．2…     

枯草芽孢杆菌中性β-甘露聚糖酶的产生及性质

由土壤中分离出一株产中性β甘露聚糖酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),编号BM9602。该菌在液体培养条件下,产生中性β甘露聚糖酶。多糖能作为碳源,而单糖不能作为碳源;有机氮源优于无机氮源。产酶最适培养基组成：魔芋粉4%,牛肉蛋白胨和酵母膏各1%。产酶最适培养条件：培养基起始pH85,35℃,振荡培养36〖KG*3]h。以槐豆胶为底物,培养滤液中性β甘露聚糖酶活力为96IU/mL。酶在pH50～100和50℃下稳定;作用最适条件为pH60和50℃;水解魔芋粉和槐豆胶均产生寡聚糖。     

大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位在婴儿双歧杆菌中的表达

目的将大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位（LTB）克隆到表达载体pBV220,使LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中稳定表达。方法将LTB基因克隆到表达载体pBV220中,再分别转化大肠埃希菌DH5a和婴儿双歧杆菌,使之表达,表达产物用SDS—PAGE鉴定。并通过家兔肠袢实验验证表达蛋白的安全性。结果LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中均可稳定表达,毒性实验证明LTB保留轻微的毒性。结论稳定表达LTB的双歧杆菌为今后的口服疫苗佐剂奠定了基础。     

海参溶菌酶枯草芽孢杆菌基因工程菌构建

通过基因重组等技术构建重组海参溶菌酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌,并对此基因工程菌进行生长曲线的测定和稳定性分析。结果表明,海参溶菌酶基因特异引物在400 bp处扩增出特异性条带,与预期的海参溶菌酶基因大小一致;重组表达质粒pHT43-SjLys经双酶切验证得8 000 bp和400 bp左右的片段;重组海参溶菌酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌与原始菌株WB600相比生长趋势基本一致,外源基因的插入对菌体的生理代谢未造成太大影响;在无选择压力的条件下,重组质粒的稳定性良好,连续传5次后的遗传稳定性为94%,并且提取质粒和双酶切验证后发现工程菌没有发现重排或丢失现象。表明重组海参溶菌酶基因工程菌pHT43-SjLys/WB600构建成功。     

产精氨酸的黄色短杆菌菌种保藏方法的研究

采用甘油防冻营养液对产精氨酸的黄色短杆菌（Brevibacterium flawm）变异株AN78在普通冰箱冷冻室（-18℃～-20℃）进行冷冻保藏试验,4年中分别进行了AN78菌株的产L-精氨酸试验,在500mL摇瓶试验中产精氨酸30-35g／L;保藏2年的菌种在20L发酵罐试验中产精氨酸63．1g／L,转化率22．8％,发酵周期81h。试验结果好于以前的报道。该方法可作为氨基酸生产行业中一种简便有效的菌种冷冻保藏方法。     

甘露寡糖对断奶仔猪肠道主要菌群的影响

选择健康的 35日龄断奶仔猪 4 8头 ,随机分为两组 ,每组 3圈 ,每圈 8头。一组为含 0 .5 %甘露寡糠 +基础日粮 ,另一组为基础日粮。试验开始第 7天 ,每组各随机选 6头仔猪 ,麻醉后剖腹取肠道内容物以测定盲肠和结肠大肠杆菌、乳酸杆菌及双歧杆菌浓度和 p H。试验结果表明 ,与对照组相比 ,甘露寡糖可以显著降低盲肠、结肠大肠杆菌浓度 (P<0 .0 5 ) ;同时显著提高盲肠乳酸杆菌和双歧杆菌浓度 (P<0 .0 5 ) ,但对结肠乳酸杆菌和双歧杆菌数影响不显著 (P>0 .0 5 )     

一株γ-多聚谷氨酸生产菌的分离筛选与鉴定

从菜园土壤中取样,在含有谷氨酸的筛选培养基上采用梯度稀释涂布、平板划线的方法,以菌落/菌液黏稠度为指示,分离筛选生产γ-多聚谷氨酸的菌株。利用氨基酸分析仪测定提取纯化后的γ-多聚谷氨酸的产量,并通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA基因序列分析鉴定该菌株,并对其合成γ-多聚谷氨酸的功能基因进行PCR扩增。结果表明:筛选到1株产γ-多聚谷氨酸的细菌C1,其液体摇瓶发酵产量为18.4 g/L,相对分子质量为1.8×106;该菌株为革兰氏阳性,菌落黏稠、菌体呈杆状、产芽胞、且形成荚膜;主要生理生化特点为能利用葡萄糖和蔗糖发酵,水解淀粉,H2O2酶阳性,产吲哚等;经16S rDNA鉴定与Bacillus amyloliquefaciens ATCC23350同源性为100%,故命名为Bacillus amyloliquefaciens C1,且拥有γ-多聚谷氨酸合成的相关基因pgsA、pgsB和pgsC。     

农杆菌介导玉米遗传转化体系的研究进展

玉米(Zea maysL.)是世界上三大主要粮食作物之一,至今其遗传转化仍比较困难,目前报道有多种成功的方法,其中农杆菌(Agrobactierium tumefaciens)介导法是当前玉米遗传转化的主要方法。本文综述了农杆菌介导的玉米遗传转化研究的发展历史、存在问题和影响因素等,并对未来发展趋势进行展望。     

炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)检测质粒的构建及其应用

根据炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)毒性质粒pX01和pX02上的2个毒力相关基因cya和capA的序列特点,以pIJ2925为出发载体,采用一步重叠延伸PCR技术(One-step Overlap Extension PCR,简称OOE-PCR)构建了包含cya基因和capA基因保守区DNA片段的炭疽检测质粒pBIB2006。采用复合PCR对模拟炭疽危险品进行分析,结果表明pBIB2006可以为炭疽芽胞杆菌的检测提供准确、安全和方便的阳性参照品,从而为检测炭疽芽胞杆菌和炭疽芽胞杆菌灭活疫苗提供了便利。     

革兰氏阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶菌的耐药分析

目的了解ESBLs的发生率和耐药特点,为临床合理用药提供依据.方法从住院及门诊病人的尿、粪、痰、血、分泌物等标本中分离的菌株共284株,使用法国梅里埃公司的细菌分析仪进行细菌鉴定和药敏检测及纸片扩散法确证试验.结果检出ESBLs菌株81株,检出率28.52%;产ESBLs的菌株主要是大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌、铜绿假单胞菌;以阿莫西林和复方新诺明耐药率最高,达90%以上.结论对ESBLs细菌感染应根据药敏结果选择碳青霉烯类、喹诺酮类及β-内酰胺类/酶抑制剂等抗生素治疗.